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猪A 群 轮状病毒 DNA 疫苗及其应用 A 群 轮状病毒 DNA 疫苗及其应用。所述DNA 疫苗由含有G5基因型VP7蛋白基因序列的真核表达质粒、含有G9基因型VP7蛋白基因序列的真核表达质粒、含有P[23]基因型VP4蛋白基因序列的真核表达质粒与TN...A 群 轮状病毒 抗原检测试剂盒参考品的制备及稳定性考察2025年 A 群 轮状病毒 (group A rotavirus,RVA )抗原检测试剂盒(胶体金法)质量控制参考品,并对其稳定性进行考察。方法用细胞培养法制备的1组肠道病毒 液、轮状病毒 (rotavirus,RV)液及致腹泻的主要细菌培养物,建立RVA 抗原检测试剂企业用参考品。阳性参考品(P1~P8)、阴性参考品(N1~N8)、检测限参考品S0、精密性参考品R0。随机抽取3套参考品(P1~P8、R0、S0),使用BioRad ChemiDoc MP系统将试剂盒条带亮度信号转化为灰度值,结果结合检测线(T线)灰度值的变异系数(coefficient of variation,CV)以及肉眼观察条带是否阳性且显色均一,考察分装均匀性;将参考品分别放置于4℃、25℃、37℃保存3、7 d及反复冻融2~6次,测定灰度值,利用Mann-Whitney U检验考察参考品的稳定性。结果阳性参考品、检测限参考品、精密性参考品显色条带均一,无肉眼可见的差异,灰度值CV在4%以内,参考品分装均匀性良好;冻融2~6次检测显色条带均一、无肉眼可见的差异,经灰度值检测及统计分析,差异无统计学意义(P>0.05);参考品在4℃、25℃及37℃放置7 d内,均具有较好的稳定性,差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究建立了RVA 抗原检测试剂盒(胶体金法)企业用参考品,均一性、稳定性好,可用于RVA 抗原检测试剂盒的质量控制。关键词：A群轮状病毒 参考品 胶体金 稳定性 A 群 轮状病毒 抗原检测试剂盒的研究及性能评价2025年 A 群 轮状病毒 (group A rotavirus,RVA )抗原检测试剂盒并对其性能进行评价,为轮状病毒 (rotavirus,RV)的快速检测提供有效手段。方法采用胶体金纳米粒子(gold nanoparticles,A uNPs)标记Rabbit anti-G1P[8]A b1,将Goat anti-G1P[8]A b2及Goat A nti-Rabbit IgG分别包被在硝酸纤维膜(nitrocellulose membrane,NC膜)的检测线(T线)和质控线(C线)上,将吸水纸、NC膜、结合垫、样品垫依次组装到PVC底板上,切割成3.75毫米/条,安装到适配卡壳,即制成RVA 抗原检测试剂盒;采用轮状病毒 抗原检测国家参考品(简称“国家参考品”)和本室制备企业参考品,分别对试剂盒敏感度、特异性、包容性、高剂量钩状效应、稳定性、重复性等性能进行考察,同时用同类产品对比评价。结果敏感度:用国家参考品L考察,最低检出限为1∶128倍稀释,相当于企业参考品最低检出限浓度1×10^(4)pfu/ml或2344copies/ml的病毒 含量水平,且与同类商品化产品比较,敏感度高8倍左右;特异性:本试剂盒与10种临床常见腹泻致病病原体均不发生交叉反应;包容性:本试剂盒能同时检测G1~G4、G8、G9等多种不同血清型RVA ;重复性:本试剂盒重复性检测考察,条带颜色均一,一致性较好;高剂量钩状效应:在1×10^(7)pfu/ml范围内不存在高剂量钩状效应;热加速稳定性:分别在37℃、50℃条件下保存14天,试剂盒检测条带清晰且均匀。结论本研究制备了性能良好的RVA 抗原检测试剂盒,适用于临床辅助诊断、流行病学研究及疫苗毒株筛选等多方面快速检测工作,具有良好的应用前景及实用价值。关键词：轮状病毒 免疫胶体金技术 性能评价 一种猪流行性腹泻病毒 、猪A 群 轮状病毒 和猪传染性胃肠炎病毒 的多重PCR检测核酸组合物及检测产品 病毒 、猪A 群 轮状病毒 和猪传染性胃肠炎病毒 的多重PCR检测核酸组合物及检测产品，涉及猪病原体检测技术领域。检测核酸组合物其包括：如SEQ ID NO.1‑2所示的用于检测猪流行性腹泻病毒 的第一核...犬C群 轮状病毒 探针法实时荧光RT-LA MP方法的建立与应用 2025年 群 轮状病毒 (CRV C)的探针法实时荧光反转录环介导等温扩增方法(RT-LA MP)。以病毒 基因组的保守序列VP6为靶标,设计合成1组LA MP引物探针,对反应的各项参数进行优化后确定方法的特异性、敏感性等各项指标,进行临床样品检测以评估方法的实际效果。结果:该方法检测下限为7.71×10^(0) copies/μL,敏感性与荧光定量RT-PCR相当。重复试验结果的变异系数小于4.35%。与犬A 群 轮状病毒 (CRV A )、犬瘟热病毒 (CDV)、犬细小病毒 (CPV)、犬肠道冠状病毒 (CCoV)和犬星状病毒 (CaA stV)均无交叉反应。临床样品检测符合率试验表明,本方法与荧光定量RT-PCR方法的总体符合率达到了98.46%(64/65)。综上,本研究建立的探针法实时荧光RTLA MP方法具有反应快速、灵敏度高、特异性强、仪器成本低等优点,可用于CRV C快速检测、临床诊断与疫病监测。关键词：环介导等温扩增 一种鸽A 群 轮状病毒 、灭活疫苗及其制备方法 A 群 轮状病毒 灭活疫苗的制备方法及产品，其技术要点主要涉及鸽A 群 轮状病毒 流行毒株的分离、鉴定、筛选及制苗工艺。本发明中制备的疫苗免疫后抗体水平高，对鸽A 群 轮状病毒 攻毒保护率达到80％～100％。该疫苗生产工...猪A 群 轮状病毒 DNA 疫苗及其应用 A 群 轮状病毒 DNA 疫苗及其应用。所述DNA 疫苗由含有G5基因型VP7蛋白基因序列的真核表达质粒、含有G9基因型VP7蛋白基因序列的真核表达质粒、含有P[23]基因型VP4蛋白基因序列的真核表达质粒与TN...贵州1株G9P[23]型猪A 群 轮状病毒 的分离鉴定及基因组序列分析 2024年 轮状病毒 (PoRV)流行毒株的基因组特征和遗传进化关系,本试验对送检腹泻仔猪的肠内容物和粪样进行病原检测,选取G9型PoRV阳性样品通过Vero细胞进行分离培养及病毒 鉴定,并对分离毒株进行基因组遗传变异分析。结果显示,阳性样品经胰酶预处理后接种至Vero细胞,盲传至第15代出现稳定CPE,前期细胞变圆后固缩、脱落,后期胞浆界限不清,出现拉网现象,用特异性引物对细胞培养物进行RT-PCR鉴定,成功扩增341 bp的目的条带。细胞培养物的间接免疫荧光鉴定显示有特异性绿色荧光反应,电镜观察下可见晶格状排列的无囊膜病毒 粒子,大小约70 nm,表明成功分离到1株PoRV,将之命名为GZZY2021。病毒 增殖曲线结果显示,用GZZY2021株感染细胞后,0~12 h病毒 含量最低,12~30 h病毒 增殖速度最快,30~48 h病毒 增殖速度较平缓,48 h病毒 滴度达到峰值(10-5.60/0.1 mL),而后进入稳定期。全基因组克隆测序分析结果显示,GZZY2021分离株基因组全长为18 506 bp, 11个基因最相似序列同源性均>95.00%,VP1、VP2、VP4、VP7、NSP1、NSP3、NSP4基因与猪源毒株同源性最高,VP3基因与大熊猫源毒株相似性最高,VP6、NSP2、NSP5基因与人源毒株同源性最高,提示分离株为三元重配毒株,完整的基因型为G9-P[23]-I1-R1-C1-M1-A 8-N1-T1-E1-H1。VP4、VP7基因与同型参考毒株相比,分别发生5、3处独有氨基酸位点变异;与NX疫苗株的中和表位分别存在22、4处氨基酸位点差异。重组分析结果显示,GZA S2020株的NSP5基因是以PTR(FJ422141.1)为主要亲本毒株,A 411(EF990694.1)为次要亲本毒株重组产生的毒株,重组断点位于121和321 bp。综上所述,本研究应用Vero细胞成功分离到1株G9P[23]型基因重配PoRV,不但可对持续监测贵州省PoRV的流行动态趋势提供研究数据,而且对筛选该领域的候选疫苗株以及该病的深入研究打下基础。猪轮状病毒 感染病例的病毒 组研究及猪A 群 轮状病毒 荧光定量RT-PCR检测方法的建立 轮状病毒 （PoRV）是引起幼龄动物急性病毒 性胃肠炎的主要病原之一，近年来在我国生猪养殖地区广泛流行，检出率逐年增加。其中A 群 轮状病毒 （PoRVA ）的危害较为严重，感染后仔猪死亡率为7~20%，严重影响了我国生猪养殖业的...关键词：猪轮状病毒 荧光定量RT-PCR 基因分型 2012—2021年丽水市7308例儿童A 群 轮状病毒 感染流行特征及与气候因素的相关性分析 被引量：4 2024年 A 群 轮状病毒 (RV)感染流行特征及气候因素对其发病的影响,为防控A 群 RV的流行提供科学依据。方法 选取2012—2021年在丽水市人民医院门急诊就诊及住院的腹泻患儿41 310例为研究对象,收集其粪便标本,采用胶体金法进行A 群 RV抗原检测,对阳性检出率和A 群 RV感染患儿的性别、年龄分布特点及与气候因素的相关性进行统计学分析。结果 2012—2021年检验儿童腹泻粪便标本共计41 310份,A 群 RV检出共计7 308例,总阳性检出率为17.69%。阳性检出率最高为2018年(27.68%,1 450/5 237),阳性检出率最低为2020年(8.95%,245/2 736)。2012—2021年A 群 RV阳性检出率比较,差异有统计学意义(χ^(2)=1 236.500,P<0.05)。7 308份阳性标本中,男性阳性标本3 898份,女性阳性标本3 410份,男女性别之比为1.18∶1。男性阳性检出率为18.11%(3 898/21 529),女性阳性检出率17.24%(3 410/19 781),不同性别A 群 RV阳性率比较差异有统计学意义(χ^(2)=5.322,P<0.05)。病例年龄22 d~13岁1个月,以5岁以下儿童发病为主,占95.37%(6 970/7 308),其中以6个月~2岁年龄段发病例数最多,占64.57%(4 732/7 308)。主要发病季节为冬季(12月~次年2月),多元逐步回归分析显示月平均气温(X)与月累积病例数(Y)呈负相关关系,曲线回归方程为:Y=3 332.011-259.469X+5.319X2。结论 丽水市A 群 RV感染主要发生在6个月~2岁儿童,男性患儿多于女性患儿,A 群 RV感染与气温密切相关,在冬季应重点加强对A 群 RV监测和防控力度。关键词：A群轮状病毒 腹泻 儿童 气候因素
