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一种杆状病毒表达干扰素重组转移质粒及制备、重组杆粒和应用
本发明涉及分子生物学技术领域,尤其涉及一种杆状病毒表达干扰素重组转移质粒及制备、重组杆粒和应用。该重组转移质粒整合了如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的两段IFN‑α基因,SEQ ID No.1包含...
袁小远张玉霞李桂明董雯雯孟凯田野王文彬韩吉娜王云超李峰张世栋
一种重组干扰素纯化蛋白过滤除菌装置
本实用新型公开了一种重组干扰素纯化蛋白过滤除菌装置,涉及重组干扰素制备技术领域,具体为一种重组干扰素纯化蛋白过滤除菌装置,包括灭菌筒,安装在灭菌筒底部的第一支撑架,螺栓固定在灭菌筒顶部的盖板,所述灭菌筒的内部安装有...
马斌
一种重组干扰素融合蛋白及其应用
本发明提供了一种重组干扰素融合蛋白及其制备方法以及应用,所述重组干扰素融合蛋白为一种重组长效干扰素融合蛋白,包含干扰素和蓖麻毒B链截短肽,所述干扰素IFNα突变体蛋白,所述IFNα突变体蛋白的氨基酸序列...
许娜王燕石晶
一种重组干扰素α蛋白、其制备方法及应用
本发明公开一种重组干扰素α蛋白、其制备方法及应用,属于蛋白融合技术领域。本发明提供的重组干扰素α蛋白,由干扰素α和白蛋白融合而成,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明所制备的重组干扰素α蛋白,延长了...
李凤华彭大鹏汪安国
干扰素基因刺激因子cDNA克隆及生物信息学分析
2023年
试验旨在利用RT-PCR方法扩增干扰素基因刺激因子CDs区,回收产物转化DH5α感受态细胞后提取质粒送测序,并根据测序结果对其进行生物信息学预测分析。结果显示干扰素基因刺激因子基因CDs区为1140bp,编码379个氨基酸。同源性比对和系统进化分析显示,干扰素基因刺激因子基因与环颈雉、火、盔珠等禽类同源性较高。生物信息学分析结果表明干扰素基因刺激因子蛋白理论分子量为42.6kD,平均亲水指数为-0.041,无信号肽,存在1个跨膜区;干扰素基因刺激因子蛋白主要定位于内质网。α-螺旋(54.62%)是主要的二级结构。该研究成功克隆了干扰素基因刺激因子基因CDs区,并利用生物信息学软件对其进行了生物信息学分析预测,试验结果为进一步探讨干扰素基因刺激因子在先天免疫中的生物学功能及抗病毒作用的分子机制提供了理论依据。
黄秋楠亢守亭徐良腾周长明王艳葛仕豪姜莉莉樊兆斌
关键词:生物信息学
口服表达胸腺肽和干扰素融合蛋白的重组乳酸乳球菌对肠道菌群影响的研究被引量:4
2023年
为构建表达胸腺肽和γ干扰素融合蛋白(Tα1-cIFN-γ)的重组乳酸乳球菌并检测其作为口服免疫增强剂对外周血单个核细胞(PBMC)的增殖活性及肠道菌群的影响,本研究将胸腺肽(Tα1)和干扰素(cIFN-γ)的编码基因序列(去除干扰素信号肽编码基因序列),并按照宿主菌乳酸乳球菌NZ3900株的基因组优化密码子后,以经G4S-linker连接的Tα1-cIFN-γ基因为模板,采用PCR扩增携带表达载体p NZ8149同源臂及HA标签的目的基因序列(Tα1-cIFN-γ-HA);通过PCR扩增携带Tα1-cIFN-γ-HA基因序列同源臂的全长p NZ8149载体序列,利用同源重组的方式将这两段基因连接构建重组质粒p NZ8149-Tα1-cIFN-γ-HA,并经PCR和测序鉴定正确后电转化乳酸乳球菌NZ3900感受态细胞中,构建重组乳酸乳球菌p NZ8149-Tα1-cIFN-γ-HA/NZ3900(r L.lactis-Tα1-cIFN-γ)并经PCR和测序鉴定;将重组乳酸乳球菌r L.lactis-Tα1-cIFN-γ经乳酸链球菌(Nisin)诱导6 h~7 h,离心超声破碎后取上清采用western blot鉴定Tα1-cIFN-γ的表达。结果显示,r L.lactis-Tα1-cIFN-γ经PCR扩增到3185 bp的目的基因片段,测序结果显示目的片段完全正确;且在约25 ku处出现特异性条带,与目的蛋白Tα1-cIFN-γ大小相符,利用BCA蛋白测定试剂盒构建标准曲线,对Tα1-cIFN-γ绝对定量显示其含量为31μg/m L。以重组乳酸乳球菌裂解液(含重组蛋白40μg/m L,重组菌2×10^(9)cfu/mL)经口服免疫21日龄SPF,并于28日龄加强免疫一次,于首免后2周、4周、7周采血分离PBMC,并分别采用Con A+Ionomycin、Con A+PMA及LPS刺激后,采用CCK-8法检测PBMC的增殖活性。结果显示,经刺激后的各实验组于首免后2周、4周、7周PBMC的增殖活性均极显著高于阴性对照组(口服PBS的)(P<0.001、P<0.0001、P<0.0001);7周后剖杀各组取其盲肠粪便样品经PCR扩增16S rDNA基因的保守区V3~V4基因序列,采用高通量测序并采用SIMCA软件、MOTHUR程序、AMDIS软件等�
刘增琪王贺胡洪娇崔子扬邱宇张素华崔红玉王云峰何高明
关键词:胸腺肽鸡干扰素肠道菌群
一种使用酵母一步多靶点底盘细胞构建的干扰素λ重组菌株及其构建方法
本发明提供了一种使用酵母一步多靶点底盘细胞构建的干扰素λ重组菌株及其构建方法,构建方法包括如下步骤:步骤1是构建具有n个靶点的酵母底盘细胞;步骤2是使用所述的酵母底盘细胞构建整合具有n个拷贝的干扰素λ重组酵母菌株;步...
黄金海张丽琳姚兰孙瑞骐李志博曹宁
一种重组干扰素融合蛋白及其应用
本发明提供了一种重组干扰素融合蛋白及其制备方法以及应用,所述重组干扰素融合蛋白为一种重组长效干扰素融合蛋白,包含干扰素和蓖麻毒B链截短肽,所述干扰素IFNα突变体蛋白,所述IFNα突变体蛋白的氨基酸序列...
许娜王燕石晶
干扰素γ与白介2对外周血中Th1细胞分化相关细胞因子的影响被引量:4
2022年
为了探讨干扰素γ(chicken interferon-γ,ChIFN-γ)与白介2(chicken interleukin-2,ChIL-2)对1型辅助性T细胞(type 1 helper T lymphocytes,Th1)分化的影响,本研究原核表达、纯化了ChIFN-γ与ChIL-2,并以不同浓度刺激刀豆球蛋白A(concanavalin A,Con A)活化的外周血淋巴细胞,检测其对Th1细胞分化相关细胞因子表达的影响。结果表明,不同浓度的ChIFN-γ与ChIL-2均可上调Th1细胞分化相关细胞因子的转录水平,最佳刺激浓度分别为12.5μg/mL和25.0μg/mL。然后将ChIFN-γ和ChIL-2分别与H9N2灭活疫苗联用,以口服或肌肉注射方式免疫无特定病原体(specific pathogen free,SPF),检测其对Th1细胞分化相关细胞因子表达的影响。结果表明,与单独使用H9N2疫苗相比,ChIFN-γ和ChIL-2均能显著上调H9N2疫苗诱导的Th1细胞分化相关细胞因子的转录水平,且肌肉注射的效果优于口服。本研究通过对Th1细胞分化相关细胞因子进行检测,从体外和体内水平证实了ChIFN-γ与ChIL-2能够增强ConA或H9N2灭活疫苗诱导的Th1细胞分化,为其作为疫苗佐剂使用提供了理论依据。
刘玲刘玲王萌李晶李晶范文辉孙蕾
关键词:细胞因子疫苗佐剂
一种重组干扰素纯化蛋白过滤除菌装置
本实用新型公开了一种重组干扰素纯化蛋白过滤除菌装置,包括灭菌桶组件和阀门,用于保温的所述灭菌桶组件的外表面上方设置有螺栓,且螺栓的外表面安装有桶盖,所述灭菌桶组件包括内桶胆、保温棉和外桶壳,所述保温棉的外表面设置有外桶...
刘丽赵海成未钰杨张永彬

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赵德刚
作品数:518被引量:2,278H指数:19
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研究主题:烟草 基因 水稻 基因克隆 生物信息学分析
王连民
作品数:160被引量:9H指数:1
供职机构:天津市生机集团股份有限公司
研究主题:甘油磷酸钙 单氟磷酸钠 病毒性疾病 宠物 防龋
宋莉
作品数:31被引量:40H指数:4
供职机构:贵州大学
研究主题:药用蛋白 兴义矮脚鸡 干扰素 鸡干扰素 机体免疫功能
张桂红
作品数:432被引量:1,157H指数:16
供职机构:华南农业大学兽医学院广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室
研究主题:猪繁殖与呼吸综合征病毒 非洲猪瘟病毒 鸭肝炎病毒 PRRSV 猪繁殖与呼吸综合征
程俊贞
作品数:50被引量:60H指数:5
供职机构:许昌市动物疫病预防控制中心
研究主题:免疫增强 白细胞介素-2 猪等孢球虫 诊治 传染性法氏囊病病毒