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关节镜下微骨折术联合富集自体骨髓单核细胞移植治疗膝关节自发性骨坏死的疗效观察: 2025年; 目的观察关节镜下微骨折术联合富集自体骨髓单核细胞移植治疗膝关节自发性骨坏死(Spontaneous osteonecrosis of the knee,SONK)的临床疗效。方法纳入自2018-01—2023-01手术治疗的35例SONK,观察组18例采用关节镜下微骨折术联合富集自体骨髓单核细胞移植治疗,对照组17例单纯采用关节镜下微骨折术治疗。比较两组术后6个月疼痛VAS评分、膝关节功能HSS评分、MRI图像上同一部位软骨缺损面积,以及组间并发症发生率。结果35例均获得随访,随访时间6~36个月,平均12.8个月。观察组出现3例并发症,对照组出现2例并发症,组间并发症发生率差异无统计学意义(P>0.05)。观察组和对照组术后6个月疼痛VAS评分、膝关节功能HSS评分较术前明显改善,MRI图像上软骨缺损面积较术前明显减小,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组术后6个月疼痛VAS评分低于对照组,膝关节功能HSS评分高于对照组,MRI图像上软骨缺损面积较对照组缩小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论关节镜下微骨折术联合富集自体骨髓单核细胞移植治疗SONK可以明显减轻患者膝关节疼痛症状,改善膝关节功能,并发症发生率低,是一种安全、有效的手术治疗方法。; 尚雷冯仕明裴非凡郭通亚刘光旺马超许永; 关键词：关节镜微骨折术骨髓单核细胞

多发性骨髓瘤患者骨髓单核细胞免疫表型特点及其临床意义: 2024年; 目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单核细胞免疫表型表达的特点及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测67例MM患者和30例贫血患者(对照组)骨髓单核细胞免疫表型表达,筛选出与对照组有统计学差异的免疫表型。进一步采用单因素及多因素回归分析影响预后的危险因素,分析单核细胞免疫表型对MM预后的影响,进一步分析CD38+单核细胞与临床特点的相关性。结果:MM组中CD138+单核细胞比例(CD138+M%)、CD27+单核细胞比例(CD27+M%)、CD56+单核细胞比例(CD56+M%)显著高于对照组(P<0.05);而CD38+单核细胞比例(CD38+M%)、HLA-DR+单核细胞比例(HLA-DR+M%)显著低于对照组(P<0.01)。低CD38+M%组中位PFS低于高CD38+M%组;低CD138+M%、低CD27+M%、低CD38+M%、低HLA-DR+M%组中位OS显著缩短。Cox回归分析结果显示,低CD38+M%是预后的独立危险因素。低CD38+M%组受累/非受累游离轻链比值≥100比例及1q21+比例较高CD38+M%组明显升高(P<0.05);低CD38+M%组骨髓瘤细胞CD38-所占比例显著高于高CD38+M%组(P<0.05)。结论:MM患者骨髓CD38+单核细胞的表达与患者预后及临床特点密切相关,或可用来评估预后,指导治疗。; 王宁方赵崇山尤月明刘方蔡芳芳张东东; 关键词：多发性骨髓瘤流式细胞术

小鼠原代骨髓单核细胞分离与培养方法的改进: 2023年; 目的探索更好的原代小鼠骨髓单核细胞的分离与培养方法。方法将小鼠股骨取出置入预冷的PBS中修剪、冲出骨髓组织至预冷的DMEM培养基中,吹打混匀制成单细胞悬液后过滤。应用差速贴壁方法培养6~8 h后留取未贴壁的细胞,加入巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)培养7 d,获得小鼠骨髓单核巨噬细胞。光镜下观察细胞形态;流式细胞术检测骨髓单核巨噬细胞表面抗原CD11b、F4/80的表达,评估细胞纯度;应用转化生长因子(TGF)-β_(1)和M-CSF培养将其诱导分化为肌成纤维细胞,免疫印迹检测其标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果冰上预冷缩短热缺血时间方法分离的骨髓单核细胞损伤小,细胞形态均一,纯度高(可达95%以上),较对照组有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05);加入TGF-β_(1)共培养后可见细胞呈细长纺锤形,与对照组相比,α-SMA的表达明显升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论本方法分离提取的原代小鼠骨髓单核细胞纯度高,状态良好,表型稳定,满足做进一步实验研究的要求。; 李香敏王华张春蕾蒙军平张冰张平; 关键词：骨髓单核细胞细胞培养流式细胞术巨噬细胞集落刺激因子转化生长因子

仙茅苷下调ROS/NLRP3途径对大鼠骨髓单核细胞增殖及向破骨细胞分化的影响: 2023年; 目的研究仙茅苷(curculigoside,CCG)对骨髓单核细胞体外增殖及分化的抑制作用。方法体外无菌分离大鼠骨髓单核细胞,通过细胞染色、周期分析评估CCG对巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)刺激的细胞增殖及核因子κB受体活化因子配体(receptor-activating factor ligand,RANKL)诱导分化的抑制效果。检测并分析活性氧(reactive oxygen species,ROS)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)途径相关成分的变化明确其作用途径和效果。结果CCG对骨髓单核细胞体外增殖有显著抑制作用,对细胞周期的作用在S期,并能诱导细胞凋亡(P<0.01)。当CCG干预浓度达到10-6 mol/L时,对骨髓单核细胞的体外破骨诱导有显著抑制作用。NLRP3、Cleaved casp-1、ROS、白介素18(interleukin-18,IL-18)、白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)水平随着CCG干预浓度增大而降低(P<0.05)。构建NLRP3过表达质粒,转染骨髓单核细胞可逆转CCG在破骨诱导过程中对Cleaved casp-1的表达和IL-1β和IL-18水平的作用,使其上调(P<0.01)。结论CCG通过下调ROS/NLRP3途径抑制骨髓单核细胞增殖及向破骨细胞分化。; 王瑛胡婷婷付燕于雪莹范佳慧满秋红; 关键词：仙茅苷骨髓单核细胞 NLRP3

氯喹对骨髓单核细胞向破骨细胞分化的抑制作用及其机制: 2022年; 目的观察氯喹对骨髓单核细胞(BMMs)向破骨细胞分化的抑制作用,并基于T细胞免疫调节因子1(TCIRG1)基因调控探讨相关机制。方法获取小鼠BMMs,分为对照组、氯喹1组、氯喹2组,分别加入0、5、10μmol/L的氯喹,用核因子κB受体激活因子配体和巨噬细胞集落刺激因子刺激BMMs分化;采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞分化情况,RT-PCR法检测破骨细胞分化相关基因TCIRG1、T细胞活化核因子1(NFATc1)、Dc-stamp、MMP9、Oscar、IP3受体(IP3R)1、IP3R2、IP3R3 mRNA,Westernblotting法检测TCIRG1、NFATc1、IP3R蛋白,免疫组化法观察NFATc1的亚细胞定位,流式细胞术检测溶酶体酸化情况,RT-PCR法检测空泡型质子泵相关亚基ATP6 V0d2、ATP6 V1c1 mRNA。将BMMs分为A、B、C、D组,A组转染过表达TCIRG1的腺病毒并以10μmol/L氯喹刺激,B组转染空病毒并以10μmol/L氯喹刺激,C组仅给予10μmol/L氯喹,D组不转染也不添加氯喹;采用Westernblotting法检测细胞中的TCIRG1、NFATc1、IP3R2蛋白,RT-PCR法检测TCIRG1、NFATc1、IP3R1、IP3R2、IP3R3 mRNA。结果氯喹2组TRAP阳性细胞体积小于氯喹1组;氯喹1组和氯喹2组细胞中NFATc1、Oscar、IP3R1、IP3R2、IP3R3 mRNA相对表达量低于对照组,氯喹2组Dc-stamp、MMP9 mRNA表达低于对照组(P均<0.05);对照组、氯喹1组、氯喹2组细胞中TCIRG1、NFATc1、IP3R2蛋白表达依次降低(P均<0.05),氯喹2组细胞核中NFATc1表达减少;氯喹1组、氯喹2组相较对照组溶酶体酸度降低;对照组、氯喹1组、氯喹2组TCIRG1、ATP6 V0d2、ATP6 V1c1 mRNA相对表达量依次降低(P均<0.05)。与B、C组相比,A组出现了一些体积较大的TRAP阳性细胞,但是数量和体积未超过D组;A组NFATc1、IP3R2 mRNA及蛋白表达高于B、C组,但低于D组(P均<0.05)。结论氯喹对BMMs向破骨细胞分化有抑制作用,TCIRG1过表达可部分逆转氯喹对分化的抑制作用;氯喹的作用机制可能与调控TCIRG1、IP3R、NFATc1表达有关。; 林立营张文史要鹏姜梅荣张冬燕; 关键词：骨髓单核细胞氯喹

MDS患者骨髓单核细胞表面CD200表达及其临床意义: 目的应用流式细胞术检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者骨髓单核细胞表面CD200表达水平并与相关临床指标进行相关性分析,评价其临床意义;随访患者生存时间,评价CD20...; 陆凤祝; 关键词：骨髓增生异常综合征 CD200 单核细胞

一种骨髓单核细胞分离、鉴定及诱导分化的方法: 本发明公开了一种骨髓单核细胞分离、鉴定及诱导分化的方法，包括骨髓单核细胞分离、鉴定及诱导分化等步骤。本发明采用骨髓单核细胞作为研究对象，较破骨前体细胞系更具有说服力；本发明所述方法克服了传统的注射器冲洗骨髓腔法的不足，大...; 马勇王礼宁郭杨郑苏阳潘娅岚司誉豪孙杰; 文献传递

骨髓单核细胞和RAW264.7细胞诱导培养破骨细胞的条件研究被引量：2: 2020年; 目的:研究骨髓单核细胞(BMMs)和RAW264.7细胞诱导培养破骨细胞(OC)的条件。方法:采用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)共同诱导骨髓单核细胞和RAW264.7细胞,2 d换液一次,镜下见大量体积较大的OC时行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定。结果:骨髓单核细胞和RAW264.7细胞加入M-CSF和RANKL诱导培养4 d后见体积较小的OC形成,5 d时体积增大,数量增多,7 d时数量减少。TRAP染色见大量体积较大的OC,核呈深染,细胞核数量可达数十个。结论:骨髓单核细胞和RAW264.7细胞在M-CSF(50ng/mL)、RANKL(100 ng/mL)的诱导培养下5 d可见体积大且TRAP染色阳性的成熟OC,RAW264.7细胞诱导形成的OC较多。; 杨佛杨文龙李明慧李威刘璞杨凤云; 关键词：骨髓单核细胞 RAW264.7细胞

铁皮石斛多糖对RANKL诱导的小鼠骨髓单核细胞向破骨细胞分化影响的体外研究被引量：7: 2020年; 目的体外探讨铁皮石斛多糖对核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导骨髓巨噬细胞(BMMs)向破骨细胞分化的影响。方法使用水提醇沉法从铁皮石斛研磨物提取石斛多糖;通过巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导培养C57BL/6小鼠BMMs;用CCK-8法检测不同浓度石斛多糖对小鼠BMMs的增殖和细胞活力的影响;通过Western blot检测p65蛋白(p65)、磷酸化p65蛋白(p-p65)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)、磷酸化p38(p-p38)、活化T细胞核因子1(NFATc1)、转录因子c-Fos(c-Fos)的表达;通过qRT-PCR检测抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)、活化T细胞核因子1(NFATc1)、组织蛋白K(CTSK)、金属基质蛋白酶9(MMP9)基因的表达;通过RANKL与不同浓度石斛多糖作用BMMS,进行TRACP染色。结果铁皮石斛多糖浓度达到400μg/ml时,其对BMMs的增殖产生明显抑制作用(P<0.05);Western blot结果显示:铁皮石斛多糖降低了NFATc1、c-Fos蛋白的表达,降低了p65和p38的磷酸化水平,而且表现出了一定的剂量依赖性(P<0.05);qRT-PCR结果显示:相较于RANKL诱导组,石斛多糖组下调NFATc1、MMP9、CTSK、TRACP基因的表达(P<0.05);TRACP染色显示,RANKL诱导组可见体积相对较大,细胞核数目>10的破骨细胞形成,浓度为200μg/ml石斛多糖组破骨细胞形成受到抑制,仅形成少数体积相对较小的不成熟破骨细胞。结论体外铁皮石斛多糖抑制破骨细胞相关基因的表达和相关通路蛋白的合成,抑制RANKL诱导的BMMs的破骨细胞分化。; 李汉青王芳王芳; 关键词：骨髓单核细胞核因子ΚB受体活化因子配体破骨细胞分化

自体骨髓单核细胞移植对兔退行性病变后椎间盘的修复作用: 2020年; 目的研究自体骨髓单核细胞移植对兔退行性病变后椎间盘的修复作用。方法选取新西兰大白兔12只,随机分为对照组(n=6)与治疗组(n=6)。取新西兰大白兔髂后上棘骨髓,密度梯度离心法提取骨髓单核细胞。两组实验兔麻醉后使用16 G穿刺针进行L4/5、L5/6、L6/7椎间盘穿刺造模。治疗组将骨髓单核细胞注入到穿刺造模的椎间盘中,对照组不予治疗。第4、8、24周分别进行椎间盘的影像学(X线和MR)与组织学观察。结果在椎间隙高度维持方面,随着周数的增加,治疗组优于对照组;在MR T2W1加权像的信号强度及组织形态方面,治疗组明显优于对照组。组织学观察显示,与治疗组相比,对照组中的髓核细胞数量减少,胞外基质收缩、不均。结论自体骨髓单核细胞移植对兔退行性病变后的椎间盘具有一定的修复再生作用。; 崔基浩李创马文斌李春徐万宏; 关键词：椎间盘退行性病变

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