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- 一株非洲绿猴肾细胞克隆株及其在鸡新城疫病毒检测上的应用
- 本发明公开了一株非洲绿猴肾细胞克隆株及其在鸡新城疫病毒检测上的应用,具体涉及生物制品检测技术领域。检测方法具体包括以下步骤:(1)细胞铺板:取出已制备好的VERO‑K6细胞悬液,取一定量至平皿中,再用排枪加入到细胞培养板...
- 许冬张辰羽虞慎义魏磊侯丹丹张肖玲曹锋郑玉芳赵文艳黄浩张维维苏明慧
- 非洲绿猴肾细胞的全悬浮细胞株及其应用
- 本发明公开了非洲绿猴肾细胞的全悬浮细胞株及其应用。本发明的非洲绿猴肾细胞的全悬浮细胞株已于2021年10月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.23098。本发明采用非洲绿猴...
- 韩伟黄书林周建民潘京学
- D816V突变型KIT特异性诱导COS-1非洲绿猴肾细胞核不均一核糖核蛋白 L(HNRNPL)和HNRNPK磷酸化
- 2023年
- 目的探究Ⅲ类酪氨酸激酶受体KIT D816V突变对核不均一核糖核蛋白L(HNRNPL)和HNRNPK的调控作用。方法在COS-1非洲绿猴肾细胞表达野生型KIT或KIT D816V,或与HNRNPL或HNRNPK共表达,用免疫沉淀法和Western blot法检测KIT活化及HNRNPL、HNRNPK的磷酸化,通过激光共聚焦显微镜检测KIT、HNRNPL、HNRNPK在COS-1细胞中的定位。结果野生型KIT需要其配基干细胞因子(SCF)的刺激发生活化,而KIT D816V无需SCF刺激即可发生自活化。此外,KIT D816V可诱导HNRNPL和HNRNPK发生磷酸化,而野生型KIT无此功能。HNRNPL和HNRNPK在细胞核表达,野生型KIT在细胞膜和细胞质表达,而KIT D816V主要表达于细胞质。结论野生型KIT活化需要其配体SCF参与,而KIT D816V无需SCF刺激即可发生自活化,并能特异性诱导HNRNPL和HNRNPK磷酸化。
- 张良颖张少婷范朝阳蒋宗英李淑璟刘安步孙建民
- 关键词:KIT
- 一种稳定表达SLAM蛋白的非洲绿猴肾细胞系及其构建方法和应用
- 本发明属于基因重组与蛋白表达技术领域,具体涉及一种稳定表达SLAM蛋白的非洲绿猴肾细胞系及其构建方法和应用,本发明的细胞系为非洲绿猴肾细胞Vero‑E6‑SLAM,于2021年11月11日送往广东省微生物菌种保藏中心保藏...
- 陈晶王晓虎张翩向华黄元黄忠王刚
- 非洲绿猴肾细胞的全悬浮细胞株及其应用
- 本发明公开了非洲绿猴肾细胞的全悬浮细胞株及其应用。本发明的非洲绿猴肾细胞的全悬浮细胞株已于2021年10月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.23098。本发明采用非洲绿猴...
- 韩伟黄书林周建民潘京学
- 黄曲霉毒素B1对非洲绿猴肾细胞的毒性效应及作用机制研究被引量:1
- 2017年
- 目的探讨黄曲霉毒素B1(AFB1)对非洲绿猴肾细胞(Vero E6)的毒性效应及其作用机制。方法体外培养Vero E6细胞,不同浓度AFB1处理细胞后,采用CCK-8法检测细胞存活率;检测乳酸盐脱氢酶(LDH)释放率;利用Annexin V/PI双染、DAPI染色研究细胞死亡机制。结果 AFB1对Vero E6细胞有显著毒性损伤效应,200μmol/L AFB1处理Vero E6细胞48h后,细胞存活率不到10%。细胞LDH释放率随着AFB1浓度增加而显著升高。Annexin V/PI染色检测到细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻。DAPI染色检测到细胞核碎裂。结论 AFB1对Vero E6细胞具有明显的毒性损伤作用,其可能通过凋亡的机制引起细胞死亡。
- 刘珊罗仲秋范小明吴昊李明勇谭洪
- 关键词:黄曲霉毒素B1非洲绿猴肾细胞细胞凋亡细胞毒性
- 氧氟沙星与Cu^(2+)复合物对非洲绿猴肾细胞(Vero)的毒性效应
- 2017年
- 抗生素氧氟沙星(Ofloxacin,OFL)与重金属铜离子(Cu^(2+))复合污染对离体培养的非洲绿猴肾细胞(Vero)的生长抑制作用及毒性效应,是值得关注的热点问题。通过模拟试验,研究了抗生素OFL与Cu^(2+)及其复合物对非洲绿猴肾活体细胞(Vero)的毒性效应。在正常体细胞环境下培养非洲绿猴肾细胞(Vero)3 d,加入OFL浓度为0.63、1.25、2.5、5、10 mg·L^(-1),加入Cu^(2+)浓度为2.75、6.88mg·L^(-1),反应24 h,并通过MTT法检测OFL与Cu^(2+)及其复合物对非洲绿猴肾细胞生长的抑制率。结果表明:OFL与Cu^(2+)及其复合物会导致细胞形态变化,细胞破碎,贴壁率降低。随着Cu^(2+)浓度增加,Vero细胞生长抑制率逐渐上升;OFL对Vero细胞生长有显著的影响。在2.75 mg·L^(-1)Cu^(2+)浓度时,OFL与Cu^(2+)的复合物对细胞的抑制率在30%到36%之间;当OFL浓度为2.5、5、10 mg·L^(-1)时,OFL与Cu^(2+)的复合物对细胞的抑制率与OFL、Cu^(2+)单一抑制率之和有显著差异,但随OFL浓度的变化没有显著差异;在6.88 mg·L^(-1)Cu^(2+)浓度处理时,OFL浓度为1.25、2.5 mg·L^(-1)时,OFL与Cu^(2+)复合物对细胞抑制率的实测值与OFL、Cu^(2+)单一抑制率之和之间没有显著差异;而当OFL浓度为0.63、5、10 mg·L^(-1)时,OFL与Cu^(2+)的复合物对细胞抑制率的实测值显著低于OFL、Cu^(2+)单一抑制率之和;OFL与Cu^(2+)的复合物对细胞的抑制率随着OFL浓度的增加而增加。OFL与Cu^(2+)的复合物会对Vero细胞产生毒性效应,并表现为抑制细胞生长,对细胞产生了复合污染;OFL与Cu^(2+)的复合物对细胞生长的抑制率小于OFL与Cu^(2+)单一对细胞生长抑制率之和,OFL与Cu^(2+)对细胞生长的毒性具有拮抗作用。
- 李祖然梁妮
- 关键词:氧氟沙星复合物非洲绿猴肾细胞
- 非洲绿猴肾细胞中猪圆环病毒1型的检测被引量:1
- 2017年
- 目的建立轮状病毒疫苗污染事件中的外源因子猪圆环病毒1型(porcine circovirus type1,PCV1)感染非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)的检测方法。方法培养感染PCV1的Vero细胞6d后,通过定性PCR、定量PCR、电子显微镜(电镜)检查和原位杂交检测PCV1的复制与增殖。结果从感染PCV1的Vero细胞培养物提取的DNA,其PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳可见特异性条带;定量PCR检测显示,感染6d后病毒总拷贝数是感染前的794.3倍;定性和定量PCR的最低检出浓度均为10^2.0拷贝/ml;电镜观察到PCV1特征性形态病毒颗粒;原位杂交检测到出现深色阳性信号的PCV1阳性细胞。结论PCV1感染Vero细胞后的复制增殖可以通过上述方法进行检测。
- 刘艳于晴川杜加亮刘悦越李东高加梅范行良张韵祺赵荣荣国秦
- 关键词:VERO细胞显微镜检查原位杂交
- 氧氟沙星和铜及其络合体系对非洲绿猴肾细胞(Vero)的毒性效应
- 抗生素的滥用使其通过多种途径进入环境,从而产生健康风险。重金属在土壤及水体环境中普遍存在,其隐蔽性强的特性导致它容易通过食物链富集,造成动植物出现重金属中毒。抗生素及重金属在环境中的共存现象非常普遍,并且抗生素易与重金属...
- 李祖然
- 关键词:氧氟沙星VERO细胞
- 放线菌素D诱导非洲绿猴肾细胞(Vero)凋亡模型的建立被引量:2
- 2013年
- 用不同剂量(0,0.25,0.5,1.0,2.0,4.0 mg/L)的放线菌素D(actinomycin D,ActD)诱导Vero细胞凋亡不同时间(0,12,24,36,48,60 h)。MTT法和流式细胞术的结果显示,以未处理的细胞作为对照组,各剂量ActD处理Vero细胞不同时间后,细胞的活力均下降,凋亡率均升高,且呈剂量和时间依赖效应。当ActD浓度为1 mg/L、作用时间为36 h,细胞的存活率为(0.55±0.01),凋亡率为(34.83±1.13)%。Gimesa染色、Hoechst33258染色表明,经ActD(1 mg/L)诱导36 h后Vero细胞形态学发生明显改变,出现膜小泡和凋亡小体形成等凋亡细胞特征;Real-time PCR结果显示,诱导组Bax/Bcl-2 mRNA相对含量明显大于正常对照组,且差异有统计学意义;分光光度法结果表明,与正常对照组相比较,凋亡诱导组caspase-3和caspase-8活性明显升高且差异具有统计学意义,caspase-9活性与对照组相比较,差异无统计学意义。用1 mg/L ActD诱导Vero细胞36 h时,细胞存活率和凋亡率都很高,可作为ActD诱导Vero细胞的最佳剂量。在该剂量及作用时间下,caspase-3和caspase-8活性明显升高,表明ActD诱导Vero细胞凋亡是通过caspase-8相关的途径。该实验成功建立了ActD诱导非洲绿猴肾细胞凋亡模型,将有助于进一步探讨目的基因在Vero细胞凋亡作用的的分子机制。
- 钟菲菲杨慧兰吕芳彪樊建勇
- 关键词:肾细胞细胞凋亡
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