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一种质粒载体及其构建方法和应用
本发明属于质粒载体构建领域,提供一种质粒载体及其构建方法和应用。该质粒载体是由pAN7‑1改造构建形成,该质粒载体在pAN7‑1多克隆位点插入启动子基因、抗性基因,所述抗性基因位于启动子基因的下游。本发明...
张小蒙周敏吴红雁
感染引起的腹膜炎1例报道被引量:5
2017年
属真菌是-类常见的植物腐生菌和腐菌,一直被认为是污染菌.引起侵袭性感染的报道越来越多,免疫功能低下患者的侵袭性感染的报告尤为多见[1-3].是引起侵袭性真菌感染较为常见的菌种[3-4].本研究将分析1例感染引起的侵袭性腹膜炎病例.
郭建何丽华倪丽君吕莉邓淑文吴文娟
关键词:长梗木霉腹膜炎腹膜透析药物敏感性试验
寄生于南方根结线虫卵的几丁质酶基因TlChi46的克隆被引量:6
2016年
为进一步筛选高效寄生线虫真菌和阐明其寄生线虫卵的机理,本研究从湖北省烟草南方根结线虫雌虫分离到1株具高效生防潜力的菌株HBF1。形态学、rDNA-ITS和翻译延因子tef1-α序列分析鉴定该菌为菌Trichoderma longibrachiatum,其对南方根结线虫卵第10 d寄生率为80.45%。通过简并引物设计和RACE技术克隆其几丁质酶基因,分析该基因序列及与其他几丁质酶的同源性。该菌是1株可以产生几丁质酶的南方根结线虫卵寄生真菌,第10 d几丁质酶的活性达到高峰,为24.88μmol/h/mL。本研究首次从HBF1菌株中克隆到1个几丁质酶基因TlChi46,该基因DNA全1 793 bp,含3个内含子和1个1 272 bp的开放阅读框,编码423个氨基酸,理论分子量45.9 kDa,等电点5.23。同源性比对表明和昆虫寄生菌几丁质酶的亲缘关系较远。从HBF1中克隆得到的几丁质酶基因编码的几丁质酶的功能域可供进一步研究,高效产几丁质酶并有效寄生南方根结线虫卵的对南方根结线虫具有良好的生防潜力。
朱先婷赵洋王凯王凤龙陈德鑫梁文星武侠
关键词:克隆长梗木霉寄生几丁质酶基因
寄生于南方根结线虫卵的几丁质酶基因TlChi46的克隆
植物病原线虫造成的土传植物病害对农业生产造成了相当大的经济损失。根结线虫病害频繁为害世界范围的蔬菜生产,尤其是我国保护地最常出现的土传植物病害。化学杀线剂已被广泛的用于线虫病害的治理,但化学杀线剂对土壤环境和人类健康的高...
朱先婷
关键词:长梗木霉几丁质酶基因基因克隆
β-葡萄糖苷酶基因的克隆及表达被引量:3
2012年
【目的】以实验室筛选获得的一株GM2(Trichoderma longibrachiatum)为材料,克隆出其β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase)基因bgl并在大肠杆菌和酵母中进行表达。【方法】利用同源克隆扩增出其β-葡萄糖苷酶基因bgl全序列,分别亚克隆到质粒pET-32a(+)和pPICZα-B中,构建其原核表达载体pET32a(+)-bglI和真核表达载体pPICZα-B-bgl。【结果】bgl基因序列全2 369 bp,含两个内含子,编码744个氨基酸。在大肠杆菌BL21(DE3)中表达bgl,重组蛋白以包涵体形式存在,上清液中没有β-葡萄糖苷酶的酶活。将载体pPICZα-B-bgl电转化入毕赤酵母GS115,得到78 kD左右重组蛋白,与预测大小相符。按9%接种量接入50 mL YP培养基(初始pH 5.5),30°C振荡培养96 h,添加终浓度1%的甲醇诱导后β-葡萄糖苷酶酶活达60 U/mL。重组酶bgl催化水杨苷水解反应的最适pH为5.0,最适温度为70°C;另外,此bgl在pH 3.0 10.0和40°C 60°C范围内具有比较好的稳定性。【结论】GM2的β-葡萄糖苷酶在P.pastoris中获得可溶性表达,并证明有一定的活性。
钟斐叶秀云李仁宽严芬林娟华宝玉杨捷
关键词:Β-葡萄糖苷酶长梗木霉克隆毕赤酵母
一种用于治疗真菌性疾病的裂解酶的制备方法
本发明公开了一种用于治疗真菌性疾病的裂解酶的制备方法,含以下步骤:配制酶的发酵培养基,在发酵培养基中加入菌种,调节温度为25-30℃,pH值为6.0-7.5,溶氧为40%-55%,进行发酵3-6天,...
安鸿尹海滨
纤维素酶基因的克隆及里氏外源基因表达载体的构建
近年来,随着人们对传统化石燃料的过分开采,其储量正在急剧减少,而燃料乙醇作为一种性能优良的清洁能源受到越来越广泛的关注。质纤维素是地球上最丰富的生物质能源,如果能构建高产纤维素酶菌株将纤维素高效水解成葡萄糖,并用于发酵...
刘月
关键词:纤维素酶基因克隆长梗木霉里氏木霉
纤维素酶基因的克隆及序列分析被引量:10
2010年
从富含纤维素环境筛选获得一株纤维素降解菌株FU05,通过形态学特征及ITS序列分析确定其为(Trichoderma longibrachiatum)。PCR扩增获得该菌株的bgl2、cbh2和eg1。序列分析表明,这3种纤维素酶基因与GenBank上其他同种纤维素酶基因具有较高同源性:bgl2基因与里氏bgl2基因(AB003110)同源性达91%;cbh2基因与康宁cbh2基因(DQ504304)同源性达99%;eg1基因与eg1基因(X60652)同源性达95%。3种纤维素酶基因编码的相应氨基酸序列与其他纤维素酶的氨基酸序列相似性也非常高。对上述纤维素酶基因编码的相应蛋白进行PROSITE motif search,对其N端糖基化位点、纤维素结合区、糖基水解酶家族特征结构区等进行了定位。
石贤爱刘月陈飞杨锦
关键词:长梗木霉ITS序列纤维素酶基因同源性
外切纤维素酶基因的克隆及其表达
本研究对一株纤维素酶高产菌株XSTl进行ITS分子标记鉴定,进一步克隆了该菌的两个外切纤维素酶基因cbhⅠ和cbhⅡ,并进一步实现了外切纤维素酶基因在毕赤酵母中的表达,为改造现有纤维素酶提供新的基因资源,也为纤维素酶的进...
王娟李欣吴松刚黄建忠
关键词:外切纤维素酶长梗木霉毕赤酵母
外切纤维素酶基因的克隆及其表达
本研究对一株纤维素酶高产菌株XST1进行ITS分子标记鉴定,接着克隆了该菌的两个外切纤维素酶基因cbh I和cbh II,进一步实现了外切纤维素酶基因在毕赤酵母中的有效表达。外切纤维素酶基因的克隆及其表达,丰富了现有的纤...
王娟
关键词:长梗木霉外切纤维素酶毕赤酵母基因表达基因工程菌分子鉴定

相关作者

黄建忠
作品数:534被引量:1,093H指数:16
供职机构:福建师范大学
研究主题:酿酒酵母 脂肪酶 二十二碳六烯酸 DHA 裂殖壶菌
刘海英
作品数:6被引量:16H指数:2
供职机构:广州科技职业技术学院
研究主题:长梗木霉 毕赤酵母 内切葡聚糖酶 纤维素酶 分子标记
舒正玉
作品数:70被引量:187H指数:8
供职机构:福建师范大学
研究主题:脂肪酶 突变体 BURKHOLDERIA 黑曲霉 破囊壶菌
王娟
作品数:46被引量:192H指数:9
供职机构:福建师范大学
研究主题:紫球藻 藻红蛋白 长梗木霉 毕赤酵母 均匀设计
吴松刚
作品数:368被引量:1,497H指数:21
供职机构:福建师范大学
研究主题:碱性脂肪酶 脂肪酶 扩展青霉 选育 黑曲霉