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植物信号指示剂的研究进展
2025年
离子(Ca^(2+))是植物信号传递中重要的第二信使,对植物的生长发育和胁迫响应起着至关重要的作用。近年来,随着生物化学和分子生物学技术的不断进步,信号指示剂在植物研究中的应用取得了显著进展。本文综述了关于信号指示剂在植物应用中的发展情况,包括指示剂的分类、信号检测原理及其在植物应用中的发展。信号指示剂的应用提供了可视化观察植物细胞内离子动态变化的有效手段,将植物细胞内的离子浓度转化为荧光信号。随着指示剂的发展,从最早的化学荧光指示剂逐步向基因编码指示剂过渡,能更加精确、实时、生物友好地观察到植物信号,对植物应对外界刺激时分子水平的应激手段有了更加深入的认识,成为研究植物应激分子水平上的重要生理指标。同时,本文还对信号指示剂在植物研究中存在的挑战和未来发展方向进行了讨论,指出了植物信号研究的特殊性与植物细胞中孵育指示剂的挑战性,以期为进一步推动该领域的研究提供参考和启示。
陆雯艳刘金枝沈钰琪亓果宁柳参奎任慧敏
关键词:钙离子植物生长发育胁迫响应
离子指示剂GCaMP在人心肌细胞系信号检测中的应用
本发明提供了离子指示剂GCaMP在人心肌细胞系信号检测中的应用,将离子指示剂GCaMP成功地应用到了心肌细胞信号的检测中,增加了离子指示剂GCaMP在心肌细胞信号检测中的用途。其次,本发明提供了一种基于离子...
马宏黄道伟项美香朱心怡孟晓雨
高糖抑制蛋白KIAA0753和CCSAP表达并通过信号阻断小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1的成骨分化
2025年
目的探究高糖对蛋白KIAA0753和CCSAP的影响,以及高糖条件下KIAA0753和CCSAP与成骨分化以及信号通路三者之间的联系。方法利用5.5和25 mmol·L^(-1)葡萄糖浓度的成骨培养基诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1),通过Western blot检测KIAA0753和CCSAP蛋白表达情况;转染过表达质粒进入人胚肾细胞(HEK-293T),免疫共沉淀检测蛋白KIAA0753和CCSAP相互作用;利用成骨培养基分别在不同葡萄糖浓度和不同诱导时间处理MC3T3-E1细胞,试剂盒检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,Western blot检测KIAA0753、CCSAP、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨素(osteocalcin,OCN)等蛋白的表达情况,然后再设置5.5、25 mmol·L^(-1)和25 mmol·L^(-1)+OE-CCSAP组MC3T3-E1细胞,依次检测KIAA0753、OCN、OPN蛋白的表达情况以及ALP活性;利用高通量基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)中糖尿病鼠模型数据集筛选差异基因进行生物信息学分析;对MC3T3-E1细胞分别设置5.5、25 mmol·L^(-1)和25 mmol·L^(-1)+OE-KIAA0753组,Western blot检测离子-调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡbeta,CAMK2B)、受磷蛋白(phospholamban,PLN)蛋白的表达。结果与5.5 mmol·L^(-1)组相比,25 mmol·L^(-1)抑制成骨细胞中KIAA0753和CCSAP蛋白表达,且蛋白KIAA0753和CCSAP存在相互作用。同时25 mmol·L^(-1)也抑制成骨细胞ALP、OPN、OCN蛋白表达,在25 mmol·L^(-1)的条件下过表达CCSAP上调KIAA0753、OCN、OPN、ALP的表达。糖尿病鼠模型的差异基因主要富集在“信号受体、信号调控”等方面。25 mmol·L^(-1)葡萄糖抑制成骨细胞中CAMK2B、PLN蛋白的表达,且在25 mmol·L^(-1)的条件下过表达KIAA0753上调CAMK2B、PLN蛋白的表达。结论高糖抑制KIAA0753和CCSAP蛋白表达,抑制小鼠胚胎成骨细胞前体细胞成骨分化和信号传导,过表达CCSAP挽救高糖对成骨分化的抑制作用以及过表达KIAA0753逆转高糖对信号通路
王吉春钱正霞李梦雪汪长东
关键词:蛋白相互作用成骨分化钙信号
苹果响应信号转录因子MdbHLH2原核表达分析
2025年
转录因子MdbHLH2能响应信号且影响苹果采后贮藏的性能。为进一步探究其结构和功能,文章利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增MdbHLH 2基因的编码序列(coding sequence,CDS)全长,连接至pMAL-c2X原核表达载体,并将重组质粒转入表达菌株Rosetta(DE3);利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合MBP标签的MdbHLH2重组蛋白,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术检测出MdbHLH2-MBP的重组表达蛋白。该结果为进一步研究MdbHLH2的结构和功能提供了重要依据。
苟莎莎安欣张玮玮胡康棣张华姚改芳
关键词:苹果
基于信号转导的稳心颗粒抗心律失常机制研究
2025年
目的基于信号转导探讨稳心颗粒抗心律失常的可能作用机制。方法60只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组及稳心颗粒低、中、高剂量(1.34、2.68、5.36 g/kg)组和胺碘酮(35.7 mg/kg)组。各组大鼠连续预防性ig给药21 d,对照组和模型组ig纯水,末次给药1 h后麻醉大鼠,尾iv乌头碱以诱导心律失常。采用RM6240多道生理信号采集处理系统记录大鼠心电表现,并进行心电参数分析。采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting,WB)检测心肌组织/调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,Ca MKⅡ)、兰尼碱受体2(ryanodine receptor 2,RyR2)和L-型通道(L-type calcium channel,LTCC)的蛋白表达。采用瞬时转染方法将编码LTCC(α1dδ、α2δ、β2α)和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的质粒共转染至人胚胎肾细胞HEK293上,予以稳心颗粒含药培养液干预,用离子荧光探针(Fluo-4 AM)检测细胞内离子浓度的变化、膜片钳技术检测细胞膜上LTCC电流变化。结果尾iv乌头碱后大鼠出现心律失常,与对照组比较,模型组大鼠心率显著加快(P<0.05),心律失常评分显著升高(P<0.01),Ca MKⅡ和RYR2蛋白表达增加(P<0.01),LTCC蛋白表达减少(P<0.01);与模型组比较,稳心颗粒高剂量组和胺碘酮组心率显著减慢(P<0.05),心律失常评分降低(P<0.01),Ca MKⅡ和RYR2蛋白表达减少(P<0.05、0.01),LTCC蛋白表达增加(P<0.05、0.01)。稳心颗粒在0.78~12.50 g/L对细胞的促增殖作用最强(P<0.05、0.01);稳心颗粒能增加LTCC电流峰值和电流密度,导致电压依赖性通道激活曲线发生负向偏移、电压依赖性通道失活曲线发生正向偏移。结论稳心颗粒可能通过影响信号转导相关蛋白表达并改变L-型通道的门控动力学发挥抗心律失常效应。
钱舒乐赵虎成于露李晓凤郭海珍赵玉珂王润英丛紫东杜武勋
关键词:心律失常膜片钳稳心颗粒
Advancing insights into calcium homeostasis and signaling in plant growth and resilience
2025年
Calcium is a crucial macronutrient and functions as a widespread signal in eukaryotes,ranging from yeast,plants to animals.As crucial second messengers,calcium ions(Ca^(2+))play indispensable roles in plant growth and development,response to external stressors,and signal transduction by modulating downstream cellular responses,including gene expression,metabolic activities,and transport functions[1,2].Unlike other nutrients,the levels of Ca^(2+)in the extracellular space and in certain intracellular stores are typically 10,000 times higher than resting cytoplasmic Ca^(2+)([Ca^(2+)]_(cyt))levels.This substantial gradient poses potential risks of[Ca^(2+)]_(cyt)overload and toxicity,and it can also lead to a rapid and transient increase in[Ca^(2+)]_(cyt),which is a key signaling mechanism for plants to respond to environmental cues.To mitigate the cytotoxicity of Ca^(2+)and continuously maintain the potential to generate specific Ca^(2+)signals,it is essential to keep the resting[Ca^(2+)]_(cyt)at a low level of approximately 100 nmol/L[3].Calcium homeostasis is fundamental for maintaining cellular function and organismal health in plants.
Songchong LuYan SunLichao MaSheng LuanGuofeng Yang
关键词:HOMEOSTASISSTORES
金丝桃素通过调节小鼠小胶质细胞内CN-NFAT信号通路改善压力应激诱导的抑郁样行为
2025年
目的探究金丝桃素(HY)通过调蛋白(CaM)介导引起调磷酸酶蛋白(CN)-活化T细胞因子(NFAT)信号通路变化调节压力应激引起的抑郁(DP)障碍并研究其机制。方法将C57BL/6J小鼠随机分为正常组(Control组)、DP组和DP+HY组(15只/组),行为学测试旷场实验(PFT)、糖水偏好实验(SPT)、悬尾实验(TST)、黑白场实验(LDB)、新奇食物抑制实验(NSFT),免疫组化检测小鼠脑海马体1区(CA1)酪氨酸羟化酶(TH)阳性表达,ELISA检测小鼠血清5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NA)水平,Western blotting检测炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-2(IL-2)及CN-NFAT通路相关蛋白表达水平。同时,将小胶质细胞(BV-2)分为Control组、脂多糖(LPS)组、LPS+HY组以及调磷酸酶抑制剂(CNIS)组,采用免疫荧光法检测离子结合接头分子1(IBA-1)阳性表达,ELISA检测细胞上清液5-HT、NA水平,Western blotting检测炎症因子IL-1β、IL-2和TNF-α以及CN-NFAT通路相关蛋白表达水平。结果与Control组相比,DP组小鼠的PFT经过中间区域的次数、SPT糖水消耗率、LDB明暗箱之间的穿梭次数以及NSFT食物的摄食率都降低(P<0.05),TST不动时间增加(P<0.05),TH神经元的数量减少(P<0.05),5-HT和NA的水平减低(P<0.05),促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-2)及CaM-CNNFAT信号通路的蛋白表达水平升高(P<0.05),LPS组的IBA-1表达上升(P<0.05),神经递质水平(NA、5-HT)减少(P<0.05),促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-2)及CaM-CN-NFAT信号通路的蛋白表达量升高(P<0.05),与DP组相比,HY组均逆转了上述结果(P<0.05),与LPS组相比,CNIS组与HY组作用相似,对IBA-1表达及神经递质水平(NA、5-HT)和促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-2)及CaM-CN-NFAT信号通路的蛋白表达量均有逆转作用(P<0.05)。结论HY对于压力应激诱导的DP样小鼠和激活态下BV-2的改善作用,可通过靶向降低CN-NFAT信号通路表达起有效作用。
高正涛林萍燕周炳灿陈明恒刘尔祺雷添翔倪慧心刘海鑫林瑶许茜
关键词:金丝桃素抑郁
锌指蛋白ZBTB17通过细胞内信号调控成纤维细胞衰老的机制研究
背景:细胞衰老的主要特征为增殖细胞进入稳定的增殖停滞状态和其分泌的衰老相关分泌表型。作为一把双刃剑,细胞衰老在胚胎发育、伤口愈合、损伤修复、机体衰老及肿瘤的发生发展等方面发挥重要的病理生理学功能。近年来研究报道,内质网...
王超凡
关键词:细胞衰老钙信号DNA损伤
拟南芥损伤诱导的信号传递模式的研究
2024年
为了研究植物系统性信号的产生和传递,本研究采用化学损伤和机械损伤等刺激方式,利用能够实时记录细胞质中游离离子浓度变化的GCaMP6s荧光指示器,观察并比较拟南芥叶片受到刺激后产生的离子信号变化,系统地记录和分析不同方式诱导的离子信号在植物体内的长距离传递模式。结果显示:水滴加到拟南芥叶表面会引起较为微弱的信号产生,沿叶片发育顺序传递;化学损伤和机械损伤刺激诱导的信号主要由损伤组织产生并传递至临近叶片,其中强酸刺激和切除叶片时,植物体内离子信号的长距离传递速度较快。不同类型的损伤信号导致植物信号在长距离传递的速度、强度和模式上存在差异,表明植物采用多样的长距离信号传导方式适应环境变化。
冯长鑫刘禹卿王晓蒋亚云陈洁婷侯聪聪李乐攻
关键词:拟南芥化学损伤机械损伤钙信号
工程化天然光热材料用于细胞信号通讯与动物行为调控
细胞信号传导是指细胞感知周围环境刺激后通过信使分子向邻近未受激细胞发出信号,从而在组织或器官水平上调节群体细胞的生理行为。离子(Ca2+)是细胞内重要的第二信使,参与调控细胞的多种生理活动和功能。在外界刺激下,外源性C...
黄浩烨

相关作者

王世强
作品数:84被引量:107H指数:5
供职机构:北京大学生命科学学院
研究主题:心肌细胞 钙释放 钙火花 钙 钙信号
祝善俊
作品数:396被引量:1,734H指数:21
供职机构:第三军医大学新桥医院
研究主题:心力衰竭 心肌细胞 心力衰竭患者 冠心病 心肌肥厚
王培勇
作品数:104被引量:416H指数:10
供职机构:第三军医大学
研究主题:缺氧 细胞核 内皮细胞 肺动脉内皮细胞 平滑肌细胞
祝之明
作品数:419被引量:2,437H指数:27
供职机构:第三军医大学大坪医院
研究主题:代谢综合征 高血压 糖尿病 代谢 肥胖症
程和平
作品数:56被引量:154H指数:5
供职机构:北京大学
研究主题:钙火花 心肌细胞 飞秒脉冲激光器 激光 调制器