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一种糖基转移酶基因UGT90A2及其应用
本发明公开了一种糖基转移酶基因UGT90A2及其应用,所述糖基转移酶基因UGT90A2编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过转基因手段获得的UGT90A2过表达的转基因毛状根植株的枯萎病抗性明显提高,接...
汪阳东陈益存高暝赵耘霄杨扬
远志苯丙素蔗糖酯酰基转移酶基因、蛋白及其应用
本发明涉及合成生物学技术领域,具体涉及远志苯丙素蔗糖酯酰基转移酶基因、蛋白及其应用。本发明提供了苯丙素蔗糖酯酰基转移酶基因PtPSE1,PtPSE2,PtPSE3和PtPSE4,及所述基因编码的蛋白。本发明利用所述基因编...
周绍群邓仁榆余胜
山新杨谷胱甘肽转移酶基因的生物信息学与表达模式分析
2025年
【目的】分析山新杨谷胱甘肽转移酶(GST)基因的表达模式,为深入研究木本植物GST基因的功能提供基础。【方法】克隆山新杨GST基因并进行生物信息学分析,通过荧光定量PCR技术分析GST基因在植物激素及非生物胁迫下的表达模式。【结果】克隆了3个PdbGST基因家族成员,分别命名为PdbGST1、PdbGST2和PdbGST3,cDNA全长分别为678、660和690 bp,编码氨基酸分别为225、219和229个,形成的蛋白质均为稳定亲水酸性蛋白,且均定位于细胞质。同时,这3个蛋白质均具有谷胱甘肽转移酶的典型结构,且其启动子区域具有能够响应生物或非生物胁迫以及植物激素的元件。此外,这3个基因的表达不同程度地受外源植物激素或非生物胁迫诱导。【结论】3个PdbGST基因均能够不同程度地响应非生物胁迫或外源植物激素的诱导,可能参与到杨树对逆境胁迫的响应过程中。
黄颖遇文婧刘雪峰刘雪峰
关键词:谷胱甘肽转移酶生物信息学分析基因表达模式山新杨
苦荞麦来源的糖基转移酶基因及其表达载体和应用
本发明公开了苦荞麦来源的糖基转移酶基因及其表达载体和应用。本发明从苦荞麦中分离得到糖基转移酶FTUGT71K6基因;所述FTUGT71K6基因的多核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示,其编码蛋白的氨基酸序列为SEQ I...
周美亮高元芬张凯旋何毓琦石亚亮林豪
一种大麦胍丁胺香豆酰基转移酶基因HvACT2及其在提高大麦抗病性中的应用
本发明公开了一种胍丁胺香豆酰基转移酶基因HvACT2及其在提高大麦抗病性中的应用。本发明首次克隆和分析了大麦胍丁胺香豆酰基转移酶合成基因HvACT2,首次通过转基因手段证实了HvACT2基因在羟基肉桂酸酰胺和大麦芽胍碱的...
赵慧芳蔡圣冠梅自律张国平
水稻丝氨酸羟甲基转移酶基因OsSHMT5克隆与功能分析
2025年
水稻中已克隆到OsSHMT4(OsCADT1),该基因编码丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT),可调控硫酸盐/硒酸盐吸收和同化,其高度同源基因OsSHMT5的功能尚不清楚。本研究基于反向遗传学研究方法,对水稻OsSHMT5基因进行分子克隆,发现OsSHMT5与OsSHMT4(OsCADT1)的同源性高达84%。亚细胞定位结果表明,OsSHMT5蛋白定位于细胞核。利用CRISPR/Cas9技术构建OsSHMT5基因敲除突变体,发现OsSHMT5基因敲除突变体的地上部或地下部中总硫/总硒及各形态硒含量与野生型相比无显著差异。基于转录组水平分析发现,OsSHMT5对水稻硫酸盐/硒酸盐吸收和同化相关基因的表达无显著调控作用。在水稻地下部,OsSHMT5可能具有四吡咯结合、血红素结合、氧化还原活性、电子转移活性和铁离子结合等分子功能;在地上部,OsSHMT5可能具有转录调节因子活性、分子功能调节因子、内肽调节活性、肽抑制剂活性、铜离子结合等分子功能。本研究结果为水稻中OsSHMT家族功能的研究奠定了基础。
陈杰陈杰黄新元
关键词:水稻丝氨酸羟甲基转移酶硒元素
苹果GT1家族A组中8个糖基转移酶基因克隆及蛋白表达
2025年
糖基转移酶(Glycosyltransferase,GT)是一类可糖基化修饰小分子化合物的类,可改变受体分子的水溶性、抗逆性等生物学功能。为探究候选糖基转移酶基因的组织表达模式,qRT-PCR检测GT1家族A组中8个糖基转移酶基因在苹果植株不同部位的基因表达水平。结果发现,7个糖基转移酶基因MdUGT91AJ1、MdUGT91AJ3、MdUGT91AJ4、MdUGT91AJ5、MdUGT91AJ6、MdUGT91AJ7和MdUGT91C7在不同组织部位中均有表达,差异较小,而MdUGT91AJ2差异较大。为了异源表达候选糖基转移酶的蛋白,以苹果‘嘎拉’(Malus domestica Gala)cDNA为模板成功克隆了这8个基因,分别将其连接到原核表达载体pGEX-2T中,将阳性重组质粒转化到大肠杆菌(Escherichia coli)BL-21中。经过诱导条件探索,发现不同糖基转移酶的最佳诱导条件如下:MdUGT91AJ1、MdUGT91AJ2、MdUGT91AJ3为20℃,1.0 mmol·L^(-1) IPTG诱导,培养16 h;MdUGT91AJ4、MdUGT91AJ5、MdUGT91AJ6、MdUGT91AJ7为16℃,0.5 mmol·L^(-1) IPTG诱导,培养24 h;糖基转移酶MdUGT91C7为20℃,0.75 mmol·L^(-1) IPTG诱导,培养24 h。总之,本研究检测了GT1家族A组中8个糖基转移酶基因在苹果植株不同部位的基因表达水平,成功构建了其原核表达载体,经诱导纯化后获得了它们的蛋白,为下一步糖基转移酶糖基化修饰功能鉴定奠定了基础。
马迎新商金海于薏珊刘倩张新莹冀芦沙李攀
关键词:苹果糖基转移酶基因克隆蛋白表达
白花鬼针草DN19630等19个糖基转移酶基因的组织特异性表达分析
2025年
目的:通过分析白花鬼针草不同组织中候选糖基转移酶基因的表达规律,初步筛选可能参与聚多炔糖苷生物合成途径的糖基转移酶,为白花鬼针草的糖基转移酶基因的研究提供数据支持。方法:本研究利用白花鬼针草转录组数据库中的DN19630等19个候选糖基转移酶基因的DNA序列,设计特异性引物。通过qRT-PCR技术检测候选糖基转移酶基因在白花鬼针草叶、茎、果、花、根中相对表达量。结果:通过对DN19630等19个候选糖基转移酶基因PCR产物扩增情况、扩增曲线图、熔解曲线图及相对表达量进行综合分析,发现DN19630、DN18211、DN12914、DN6852、DN5000g2、DN38310、DN14409g1、DN5293、DN34556、DN14409g2、DN15831这11个候选糖基转移酶基因在叶中表达量相对较高,在根中表达量最低;而DN3608在茎中表达量最高,根中表达量较低;DN21732、DN14031在花中表达量较高,在根中表达量最低。结论:DN19630等14个糖基转移酶可能参与聚多炔糖苷类化合物的生物合成。Objective: By analyzing the expression patterns of candidate glycosyltransferase genes in different tissues of Bidens pilosa var. radiata, we initially screened the glycosyltransferases that may be involved in the biosynthetic pathway of polyacetylene glycosides, providing data support for the study of glycosyltransferase genes in B. pilosa var. radiata. Methods: This study used the DNA sequences of 19 candidate glycosyltransferase genes such as DN19630 from the transcriptome database of B. pilosa var. radiata to design specific primers. The relative expression levels of the selected glycosyltransferase genes in the leaves, stems, fruits, flowers, and roots of B. pilosa var. radiata were determined through qRT-PCR technology. Results: Through comprehensive analysis of the PCR product amplification status, amplification curves, melting curves, and relative expression levels of 19 candidate glycosyltransferase genes including DN19630, it was found that the exp
段柳剑韦萍付志鹏
关键词:糖基转移酶基因QRT-PCR组织特异性
金银花糖基转移酶基因的原核表达及其编码蛋白纯化
2025年
目的以金银花Lonicerae Japonicae Flos中糖基转移酶为研究对象,进行糖基转移酶LjUGT73C1基因的生物信息学分析、基因合成与亚克隆、表达分析和纯化。方法利用前期盐胁迫金银花组学研究构建的金银花转录组数据库注释信息,筛选得到金银花中关键糖基转移酶LjUGT73C1,进行基因合成和亚克隆;利用基因重组技术构建了原核表达载体Pet-30a-LjUGT73C1,遗传转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态;应用SDS-PAGE凝胶电泳和Western blotting检测蛋白的表达量、检测不同诱导条件下基因的表达情况,最后经亲和色谱进行纯化。结果通过基因合成与亚克隆得到糖基转移酶LjUGT73C1的全长序列,理论编码氨基酸数目为493,等电点(PI)预测为6.27,理论相对分子质量为55530。构建了LjUGT73C1基因的原核表达载体并且在大肠杆菌中诱导表达得到重组蛋白,应用His亲和色谱柱进行蛋白纯化并经SDS-PAGE凝胶电泳检测,确定为金银花LjUGT73C1蛋白。结论首次报道了盐胁迫金银花中糖基转移酶基因LjUGT73C1,并进行表达分析和纯化,为进一步研究金银花中苯丙素的生物合成及表达调控研究奠定了基础。
蔡芷辰赵君谊陈海杰刘训红王进
关键词:金银花生物信息分析原核表达蛋白纯化
比利时杜鹃类黄酮3-O-糖基转移酶基因的克隆、原核表达及功能分析
2025年
类黄酮3-O-糖基转移酶是植物花青素糖苷化的关键。为研究杜鹃花3GT基因的功能,本研究从红比利时杜鹃中克隆了一个3GT基因开放阅读框(open reading frame,ORF)命名为Rh3GT,分析、测定并验证了该ORF及其编码蛋白的理化性质、表达水平、学功能等生物学特性。结果表明,Rh3GT全长993 bp,编码330个氨基酸;编码蛋白为亲水稳定的弱酸性蛋白,隶属糖基转移酶家族(GT-B型),PSPG box结构域中第44位为谷氨酰胺(Q);系统进化分析发现比利时杜鹃Rh3GT与越橘Vc3GT和黑果越橘Vm3GT的亲缘关系最近;Rh3GT在根中几乎不表达,在茎、叶、花中均有表达,且在盛开期花瓣中表达量最高;花瓣瞬时过表达Rh3GT后发现其总花青苷积累也显著增加;Rh3GT重组蛋白在大肠杆菌BL21中成功表达,并以包涵体形式存在,大小约为36 kDa,与理论预测值接近;高效液相色谱检测发现,经过变性纯化和稀释复性后的Rh3GT重组蛋白可催化矢车菊素和UDP-葡萄糖合成矢车菊素3-O-葡萄糖苷,表明表达的蛋白具有3GT活性。本研究为深入探讨杜鹃花花青苷生物合成分子调控机制提供了基础数据,并为潜在的杜鹃花分子育种提供了理论支持。
鄢毅铖吴泽航姜宇航胡高源杨宇杰谢晓鸿吴月燕贾永红
关键词:比利时杜鹃原核表达

相关作者

徐齐君
作品数:65被引量:83H指数:5
供职机构:西藏农牧科学院
研究主题:青稞 西藏青稞 试剂盒 转移酶基因 葡萄糖苷
王玉林
作品数:65被引量:134H指数:7
供职机构:西藏农牧科学院
研究主题:青稞 西藏青稞 葡萄糖苷 转移酶基因 青稞品种
原红军
作品数:86被引量:145H指数:7
供职机构:西藏农牧科学院
研究主题:青稞 西藏青稞 白粉病 干旱胁迫 基因
曾兴权
作品数:90被引量:218H指数:8
供职机构:西藏自治区农牧科学院
研究主题:青稞 西藏青稞 种质资源 遗传多样性分析 克隆
柳志强
作品数:656被引量:20H指数:4
供职机构:浙江工业大学
研究主题:突变体 基因工程菌 编码基因 工程菌 重组大肠杆菌