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一种侏儒蛤精子玻璃化超低温冷冻保存方法
本发明公开了一种侏儒蛤精子玻璃化超低温冷冻保存方法,涉及海洋生物技术领域。所述保存方法包括如下步骤:(1)取处于繁殖期的侏儒蛤,依次用阴干和变温刺激使其自然排放精子,过滤,离心,获取高密度精子,于冰上保存;(2)将步骤(...
刘一兵徐镇黄晓婷杨祖晶包立随
蛋白质乙酰基供体在家禽精液超低温冷冻保存中的应用
本发明涉及家禽保种生物技术领域,公开了蛋白质乙酰基供体在家禽精液超低温冷冻保存中的应用。本发明蛋白质乙酰基供体在家禽精液超低温冷冻保存中的应用,其中,所述蛋白质乙酰基供体包括但不限于乙酸镁、乙酸钾和乙酸钠。经试验证明,蛋...
李云雷孙研研宗云鹤陈继兰陈超倪爱心
蛋白质去乙酰化酶抑制剂NAM在家禽精液超低温冷冻保存中的应用
本发明提供了蛋白质去乙酰化酶抑制剂NAM在家禽精液超低温冷冻保存中的应用,属于家禽保种技术领域。本发明所述蛋白质去乙酰化酶抑制剂NAM作为一种冷冻保护剂,或将其与其他冷冻保护剂联合使用,将蛋白质去乙酰化酶抑制剂NAM作为...
陈继兰孙研研李云雷宗云鹤陈超韩昕彤
蛋白质去乙酰化酶抑制剂NRD167在家禽精液超低温冷冻保存中的应用
本发明涉及家禽保种生物技术领域,公开了蛋白质去乙酰化酶抑制剂NRD167在家禽精液超低温冷冻保存中的应用。经试验证明,蛋白质去乙酰化酶抑制剂NRD167可提高家禽精子的乙酰化修饰水平,并提高家禽冷冻‑复融精子的受精能力;...
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蛋白质去乙酰化酶抑制剂3-TYP在家禽精液超低温冷冻保存中的应用
本发明涉及家禽保种生物技术领域,公开了蛋白质去乙酰化酶抑制剂3‑TYP在家禽精液超低温冷冻保存中的应用。经试验证明,蛋白质去乙酰化酶抑制剂3‑TYP可提高家禽精子的乙酰化修饰水平,并提高家禽冷冻‑复融精子的受精能力;因此...
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蛋白质去乙酰化酶抑制剂SirReal2在家禽精液超低温冷冻保存中的应用
本发明提供了蛋白质去乙酰化酶抑制剂SirReal2在家禽精液超低温冷冻保存中的应用,属于家禽保种技术领域。本发明所述蛋白质去乙酰化酶抑制剂SirReal2能够抑制精子细胞去乙酰化修饰,以维持较高水平的乙酰化修饰水平,提高...
陈继兰宗云鹤李云雷孙研研陈超马琳
稀有鮈鲫精子超低温冷冻保存
2024年
为建立稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)精子超低温冷冻保存技术,研究了稀有鮈鲫精子在不同种类和浓度稀释液与抗冻剂、降温程序中的冷冻保存效果,并开展授精实验,以期建立稀有鮈鲫精子超低温冷冻保存方法。首先,比较了5种精子稀释液对稀有鮈鲫精子活力的影响,发现在BSMIS(Buffered Sperm Motility-inhibiting Solution)稀释液中,精子活力最高(95.55±2.35)%,精子曲线运动速度(VCL)、直线运动速度(VSL)和平均路径速度(VAP)分别为(103.00±29.82)、(84.00±26.21)和(126.67±27.57)μm/s,寿命(37.67±0.58)s,与鲜精无显著差异(P>0.05);其次,筛选了不同浓度的6种渗透性抗冻剂,发现当BSMIS稀释液含有10%甲醇时,精子活力最高(22.33±2.08)%;再次,筛选和优化了不同浓度的非渗透性抗冻剂,发现当BSMIS稀释液含有8%甲醇和90 mmol/L葡萄糖时,精子活力最高(46.00±4.00)%,且VCL、VSL和VAP分别为(125.02±7.42)、(107.10±4.92)和(116.99±6.34)μm/s,寿命(32.67±2.52)s,其中VSL、VAP与鲜精相比无显著差异(P>0.05)。最后,比较了4种液氮蒸气中平衡高度和3个液氮蒸气中平衡时间对稀有鮈鲫精子冷冻保存效果的影响,发现液氮蒸气中平衡高度为3 cm且平衡时间为10min时,精子活力显著高于其他实验组。采用流式细胞仪检测冻精质膜完整性、线粒体活性和DNA完整性,分别为(55.78±2.13)%、(56.18±0.64)%和(55.07±2.00)%。进一步通过授精实验评估冻精质量,冻精受精率和孵化率分别为(87.31±1.38)%和(98.84±1.02)%,与鲜精无显著性差异(P>0.05)。上述结果表明,稀有鮈鲫精液以BSMIS稀释液、8%甲醇和90 mmol/L葡萄糖为抗冻保护液,液氮蒸气中3 cm处平衡10min后置于液氮的超低温冷冻保存效果最好。研究初步建立稀有鮈鲫精子超低温冷冻保存技术,为其种质资源的长期保存提供技术支撑。
李鑫叶欢何勇凤余乐程佩琳杜浩吴金明
关键词:精子冷冻保存精子质量流式细胞仪
台湾泥鳅精子超低温冷冻保存技术研究被引量:1
2024年
为建立台湾泥鳅精子超低温冷冻保存方法,采用显微镜观察精子活率,流式细胞术检测质膜完整性,研究4种稀释液[Hank′s平衡盐溶液(HBSS)、D-15、D-17、鱼用任氏液],5种抗冻剂(甲醇、乙二醇、丙二醇、二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺)在4个体积分数(2.5%、5.0%、7.5%、10.0%),不同平衡时间、熏蒸高度和时间、解冻温度和时间对台湾泥鳅精子超低温冷冻保存的影响。试验结果显示:以Hank′s平衡盐溶液为稀释液的精子活率最高,为(45.28±5.75)%;以5%甲醇作为抗冻剂的台湾泥鳅精子活率和质膜完整比例最高,分别为(51.25±5.03)%和(81.70±2.35)%;最佳平衡时间为30 min,最佳熏蒸高度和时间为9 cm和10 min,最后将冻精在37℃水浴锅中解冻10 s的解冻效果更佳。用冷冻复苏的台湾泥鳅精子进行人工授精,受精率达(68.94±6.22)%。综上,用Hank′s平衡盐溶液稀释台湾泥鳅鲜精,与甲醇1∶1混合至终体积分数为5%,放于4℃平衡30 min,而后装入麦管,在液氮面上方9 cm处熏蒸10 min后投入液氮保存可作为台湾泥鳅精子超低温冷冻保存方法,解冻时在37℃水浴锅中解冻10 s,可获得更好的解冻效果。
汪吟杰汪品采克俊
关键词:精子超低温冷冻保存流式细胞术碘化丙啶
三种超低温冷冻保存香椿种子的研究初探
2024年
香椿是具有极高应用价值的优良资源植物。为了能够稳定保存优良香椿种质资源,本研究采用3种超低温保存方法处理香椿种子,通过发芽率和生理生化指标检测,对比了三种香椿种子低温保存方法的优劣。结果表明,经过冷冻后,香椿种子的超氧化物歧化酶活性和过氧化氢酶活性均升高,过氧化物酶活性和MDA含量均降低。但玻璃化冷冻对种子的发芽率和可溶性蛋白含量与对照组相比无显著差异,因此玻璃化冷冻法更适合香椿种子的超低温冷冻保存
陈清怡刘雅琪鲍芙蓉余世玉苏芊妮屈长青
关键词:香椿种子超低温保存发芽率生理生化特性
鱼类精子超低温冷冻保存技术的创新与挑战
2024年
鱼类精子超低温冷冻保存对种质资源保护意义重大,但面临诸多技术挑战。本研究旨在探索优化鱼类精子超低温冷冻保存技术,以提高保存效果。明确了超低温冷冻保存原理,分析了影响因素,包括抗冻剂和稀释液的选择、冷却与解冻速率等。对比了新型抗冻蛋白样液与传统样液的优劣。研究结论表明,鱼类精子超低温冷冻保存技术为鱼类种质资源保护提供了重要手段,但仍需不断优化。未来可从保存液配方、冷冻和解冻技术、细胞损伤机制及新技术应用等方面深入研究。Ultra-low temperature cryopreservation of fish sperm is of great significance for germplasm resources protection, but it also faces many technical challenges. The purpose of this research is to explore and optimize the ultra-low temperature cryopreservation technology of fish sperm so as to improve the preservation effect. The principle of ultra-low temperature cryopreservation was clarified, and the influencing factors were analyzed, including the selection of antifreeze agents and diluents, the cooling and thawing rates, etc. The advantages and disadvantages of the new antifreeze—protein-like solution and the traditional like solution were compared. The research conclusion shows that the ultra-low temperature cryopreservation technology of fish sperm provides an important means for fish germplasm resources protection, but it still needs to be continuously optimized. In the future, in-depth research can be carried out from the aspects of preservation solution formulation, freezing and thawing technologies, cell-damage mechanisms and the application of new technologies.
冯绣云董俊徐潇孟庆磊安丽王超朱永安
关键词:鱼类精子超低温冷冻保存冷却速率

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李军
作品数:281被引量:1,022H指数:18
供职机构:中国科学院海洋研究所
研究主题:精子 试剂盒 条石鲷 牙鲆 海洋生物技术
刘清华
作品数:101被引量:213H指数:9
供职机构:中国科学院海洋研究所
研究主题:精子 大菱鲆 海洋生物技术 超低温冷冻保存 种质保存
王晓爱
作品数:71被引量:116H指数:6
供职机构:中国科学院昆明动物研究所
研究主题:催产剂 滇池金线鲃 鱼苗饲养 超低温冷冻保存 细胞系建立
杨君兴
作品数:209被引量:833H指数:17
供职机构:中国科学院昆明动物研究所
研究主题:鱼类 滇池金线鲃 白鱼 催产剂 鱼苗饲养
潘晓赋
作品数:122被引量:303H指数:13
供职机构:中国科学院昆明动物研究所
研究主题:滇池金线鲃 催产剂 鱼苗饲养 细胞系建立 鱼类