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- 一种豇豆胰蛋白酶抑制剂基因、及其应用、大量制备豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法
- 本发明涉及基因工程领域,具体地,本发明涉及一种豇豆胰蛋白酶抑制剂基因、及其应用、大量制备豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法。如上所述本发明的发明人首先利用PCR反应从豇豆基因组DNA中直接获得CPTI基因(CPTI基因不含有内含子...
- 高伟李峰陆庆宇
- 文献传递
- 一种豇豆胰蛋白酶抑制剂基因、及其应用、大量制备豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法
- 本发明涉及基因工程领域,具体地,本发明涉及一种豇豆胰蛋白酶抑制剂基因、及其应用、大量制备豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法。如上所述本发明的发明人首先利用PCR反应从豇豆基因组DNA中直接获得CPTI基因(CPTI基因不含有内含子...
- 高伟李峰陆庆宇
- 豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(CpTI)的克隆及其植物表达载体的构建被引量:3
- 2008年
- 用CTAB法提取豇豆叶片总DNA后,根据基因两端的保守序列设计引物,经PCR方法扩增得到CpTI基因,将其克隆到pMD-18T载体上,酶切并测序鉴定,将该基因登陆到GeneBank(NO.EU088405)并进行同源性鉴定,证明该基因为丝氨酸蛋白酶抑制剂基因家族中的一员。在此基础上,将CpTI基因用限制性内切酶BamHⅠ/SacⅠ切下后,克隆到pCUbi1303的UBI启动子和NOS终止子之间。经PCR和酶切鉴定,得到了该基因的真核表达载体pCUbiCpTI1303,为下一步的转基因做好了准备。
- 罗娟王秀敏韩烈保刘君曾会明吴云锋
- 关键词:克隆植物表达载体
- 豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(cpti)及其在抗虫转基因作物中的应用被引量:27
- 2008年
- 豇豆胰蛋白酶抑制剂(cowpea trypsin inhibitor,CpTI)来自豇豆的可食用部分,由于其具有抗虫谱广且昆虫不易对其产生耐受性的特点,cpti基因被作为抗虫植物基因工程一个重要的候选基因。目前,cpti基因已经被转到烟草、水稻、棉花和番茄等多种作物中。本文介绍了CpTI的特性、抗虫机理、基因工程研究进展,以及转cpti基因水稻的安全性研究,并对蛋白酶抑制剂的分类和安全性问题做了相关介绍。CpTI在分类上属于Bowmun-Birk家族,大量医学研究表明,该家族蛋白质对于癌症的预防和辅助治疗都有积极作用,对人体不存在任何危害。
- 徐鸿林翟红利王锋朴建华杨晓光朱祯
- 关键词:转基因作物水稻生物安全性
- 豇豆胰蛋白酶抑制剂基因在毕赤酵母中的高效表达及其蛋白纯化
- 本研究从原核表达载体pGEX4T-CpTI上亚克隆得到豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因,通过SnaBI和NotⅠ双酶切作用,将CpTI基因按照载体阅读框转译方向插入到表达质粒PpIC9K的多克隆位点中,构建重组表达质粒...
- 周可
- 关键词:转基因水稻胰蛋白酶抑制剂毕赤酵母重组菌株外源蛋白
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- 豇豆胰蛋白酶抑制剂基因及几丁质酶基因转化欧美杨的研究
- 杨树是世界主要的造林和经济树种之一,在世界各地特别是中国均有广泛的栽培。欧美107杨是从欧洲黑杨与美洲黑杨的杂交后代中选育出的一个无性系,具有抗逆能力强、材质好和速生等优点,它既可作为绿化树种,又可作为优质的纸浆原料,在...
- 赵强
- 关键词:欧美107杨豇豆胰蛋白酶抑制剂基因几丁质酶基因抗虫
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- 豇豆胰蛋白酶抑制剂基因转化花椰菜的研究被引量:8
- 2004年
- 通过根癌农杆菌 Agrobacterium tumefaciens介导,将豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因导入花椰菜无菌苗的下胚轴和子叶中,卡那霉素(Kan)的筛选质量浓度为15 mg/L,抑制农杆菌生长的抗生素选用羧苄青霉素(carbencillin),质量浓度为500mg/L.对所获得的转基因植株进行PCR扩增,结果显示大多数为阳;PCR-Southern及Southern分子检测分析,结果证明CpTI基因已被整合到花椰菜植株的基因组中.转基因植株叶片的离体饲虫初步试验结果表明,对鳞翅目害虫菜青虫的生长发育有一定的抑制作用.
- 吕玲玲雷建军宋明曹必好陈国菊曾国平
- 关键词:豇豆胰蛋白酶抑制剂基因转化花椰菜农杆菌介导
- 根癌农杆菌介导的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因转化芥菜的研究被引量:2
- 2004年
- 为得到具有较强抗虫性的新的芥菜种质资源,用农杆菌介导将豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因导入芥菜,获得了Kan抗性植株。经PCR扩增、PCR Southernblot和Northernblot分析,转化再生植株大部分呈阳性,而非转化的再生植株均为阴性,证明CpTI基因已存在于芥菜基因组中。在室内进行了喂虫试验,结果表明转基因芥菜抗虫性明显高于对照,转基因植株之间存在抗虫性差异。
- 杨朝辉何凤田宋明江渝彭家和李蓉芬黄刚
- 关键词:豇豆胰蛋白酶抑制剂基因芥菜抗虫
- 农杆菌介导豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(cpti)在玉米中的遗传转化被引量:13
- 2004年
- 伍晓丽朱祯李晚忱潘光堂曹墨菊荣廷昭
- 关键词:农杆菌介导豇豆胰蛋白酶抑制剂基因玉米抗虫性
- 转豇豆胰蛋白酶抑制剂基因水稻的食用安全性研究及其标记蛋白潮霉素磷酸转移酶的表达、纯化
- 用表达抗虫基因cpti水稻制备的大米进行亚慢毒性实验及致畸性实验,研究其安全性及非期望效应,建立该水稻筛选标记基因hpt的原核表达体系,并进行HPT蛋白的表达、纯化,为深入评价其食用安全性提供基础.1 本研究建立了配制转...
- 卓勤
- 关键词:转基因水稻豇豆胰蛋白酶抑制剂标记蛋白包涵体纯化
- 文献传递