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一种补体结合试验的辅助观察装置
本实用新型提供了在生物技术领域的一种补体结合试验的辅助观察装置,通过设置光源灯、卡槽板和反光板,通过光的反射原理对96孔板进行读板,其数字、字母均是正向的,反射的为正向的96孔板,可直接进行读数,可以方便的找到阳性孔,解...
王科珂蒋刚强龙志新胡都斯·艾尔肯白梅花徐新峰王建昌王振宝肖媛媛陈凯云
布鲁氏菌病微量补体结合试验的方法改进和应用被引量:8
2022年
【目的】补体结合试验是布鲁氏菌病(简称“布病”)血清学确诊方法。现行国家标准《动物布鲁氏菌病诊断技术》(GB/T 18646-2018)中收录的补体结合试验分为常量法补体结合试验(CFT)和微量法补体结合试验(mCFT),但两者之间的相关技术参数和结果判定标准均存在差异,导致常量法CFT和mCFT检测结果不一致。笔者通过对mCFT参数的改进优化,使现行标准中mCFT的检测结果等效于常量法CFT,实现布病CFT的高通量准确诊断,对现有布病检测方法进行了补充。【方法】参照布病常量法CFT反应条件和诊断标准,对现行国标中mCFT的反应时间、稀释液、效价测定方法、结果判定等相关参数进行改进优化。改进后的mCFT方法与原mCFT方法相比,效价测定中受检血清的稀释度由1﹕2-1﹕64稀释改为1﹕10稀释,稀释方法与常量法CFT相同,确保微量法的检测临界值与常量法一致;采用酶标仪读取OD600值判定溶血强度,降低了试验人员肉眼判定的误差,提升了结果判定的效率和准确性;反应时间由37℃水浴30 min缩短为20 min,提高了检测效率又不影响检测结果;稀释液由巴比妥缓冲液改为生理盐水,与常量法使用相同稀释液并可获得理想结果。用改进的mCFT与国标的mCFT、常量法CFT分别对来自内蒙古、山东、北京、江苏等地区的409份临床牛、羊血清样品(牛血清163份、羊血清246份)进行检测,分析比较其符合率。【结果】采用改进的mCFT与常量法CFT对409份临床样品进行比对检测,改进的mCFT方法检出53份阳性、11份可疑、345份阴性;常量法CFT检出53份阳性、9份可疑、347份阴性。比较两者检测结果,只有2份牛血清样品用改进的mCFT方法检测为可疑,而常量法CFT检测为阴性,其余407份样品检测结果均一致。其中牛血清样品的符合率98.77%,羊血清样品的符合率100%,总符合率99.51%。而国标mCFT方法因阳性判定标准低于常量�
蒋卉冯宇秦玉明朱良全范学政丁家波
关键词:布鲁氏菌病
动物布鲁氏菌病抗体补体结合试验与cELISA检测结果比较被引量:6
2021年
依据GB/T18646-2018建立布鲁氏菌病补体结合试验(CFT)方法,对43份牛、羊血清样本进行检测,并以同一批血清样品的竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)结果为参照进行比较。结果表明:CFT与cELISA结果一致性Kappa值为0.3499,CFT敏感性(M)为65.22%,特异性(T)为70.00%,准确性(Z)为67.44%。
沈红霞倪柏锋王彬虞一聪周炜周芷锦穆琳桂平雄赵灵燕
关键词:布鲁氏菌病CELISA补体结合试验
补体结合试验方法的改良被引量:1
2017年
目的摸索一套具有灵敏度、准确度高,成本低廉,反应时间快速,可在基层实验教学推广的补体结合试验(CFT)改良方法 ,为临床本科生实验教学的应用提供方法学指导。方法采用十二孔可拆卸酶标条和100μL移液器进行加样的CFT微量法与采用洁净小试管和1 m L吸管进行加样的半量法进行比较。结果微量法和半量法CFT出现溶血结果的孔数一致,且均为补体对照(即第4孔)先出现溶血,接着依次为抗原对照(即第3孔)和血清对照(即第2孔)出现溶血;微量法第4、3、2孔出现溶血结果的时间分别为10、20、20 min,半量法第4、3、2孔出现溶血结果的时间分别为20、30、30 min。结论微量法CFT所获结果与半量法结果一致,但微量法反应灵敏度、准确度优于半量法,且大大节约了成本,出现溶血结果时间也快于半量法。
贺亚玲刘欢唐慧刘振忠侯隽王仙
关键词:补体结合试验抗原抗体微量法
动物布鲁菌病补体结合试验诊断方法比较研究被引量:12
2016年
布鲁菌病是造成严重公共卫生安全和经济损失的人畜共患病,目前对该病的血清学诊断方法主要有凝集试验、ELISA、补体结合试验等,其中补体结合试验(CFT)是世界动物卫生组织(OIE)认可的布病血清学确诊的经典标准方法。但在实际布病检验中,由于其原理复杂、操作繁琐、影响因素多、耗时长等原因而未能被广泛应用。为了进一步明晰其原理,提高CFT的可操作性及准确性,本文比较了我国动物布鲁菌病标准和OIE手册中CFT的差异,并结合本实验室应用情况,对CFT在布鲁菌病诊断中常见的问题和注意事项进行了阐述,为布鲁菌病补体结合试验的科学应用及诊断提供了参考。
朱良全王芳蒋卉冯宇张金亚张阁张振皮向成王楠毛开荣丁家波
关键词:布鲁菌病补体结合试验
绵羊红细胞敏感性对补体结合试验的最佳反应时间被引量:2
2016年
补体结合试验(CFT)是一种经典的抗原、抗体检测方法,其敏感性、特异性均较高,不仅可用于诊断各种传染病,也可用于鉴定病原体,是免疫学上一个应用较广泛的重要试验[1]。在布鲁氏菌病(布病)的血清学诊断方法中,CFT被世界动物卫生组织(OIE)认可为布病血清学确诊的经典标准方法[2]。在CFT实际操作中经常发现,使用不同保存时间的绵羊红细胞(SRBC)滴定同一批次溶血素和补体时,结果存在较大差异,
蒋卉彭小薇张阁冯宇张振孙翠丽朱良全丁家波
关键词:绵羊红细胞敏感性布鲁氏菌补体结合试验
支原体肺炎补体结合试验测定及临床意义被引量:1
2014年
目的探讨补体结合试验的原理检测方法及临床意义。方法对支原体肺炎患者30例补体结合试验检测方法及临床意义进行分析。结果补体结合抗体感染后7—9d开始上升,3—4周达高峰,约90%患者阳性,其敏感性与采血时机的早晚有关。结论本法测定的是特异性抗原,反应稳定,敏感性和特异性均好,但较为烦琐。
刘方鹤曹珍珍张海雁张祎
关键词:支原体肺炎补体结合试验
控制好补体活性的理化因素提高“补体结合试验”效果被引量:3
2014年
"补体结合试验"(Complement fixation test,CFT)是免疫学上一个应用较广泛的重要试验。在实验教学中,由于各种因素的影响,实验结果常出现假阳性。经过多次反复试验和摸索总结,得出在各种影响因素中起关键作用的因素主要是补体。通过对影响补体活性的各种理化因素的控制,不仅提高了CFT的实验效果,同时也是学生对CFT结果有一个正确认识的过程,对实验教师也是一个不断总结经验,提高实验技能的过程。
孙向彬贺亚玲袁俐王仙
关键词:补体结合试验
牛布鲁菌病补体结合试验测量不确定度评估被引量:7
2013年
试验应用补体结合试验方法对牛布鲁菌病进行检测,分别从溶血素效价测定、补体效价测定、抗原效价测定及血清效价测定4个方面分析了补体结合试验测量不确定度来源,并计算了合成不确定度、扩展不确定度,最终样品测量结果报告值为:X=(1.06±0.043)mg/mL(95%置信区间),即本试验中判定的可以抑制50%溶血的血清最高效价所对应的溶血素浓度为1.06mg/mL,不确定度U为0.043。
史喜菊马贵平李冰玲郭志红李炎鑫刘全国
关键词:补体结合试验测量不确定度
动物布鲁菌病补体结合试验的影响因素及应注意的问题被引量:4
2010年
补体结合试验是目前血清学试验中最为准确的实验技术之一,被世界动物卫生组织(OIE)认证为布鲁菌病诊断的确诊性试验。对动物布鲁菌病补体结合试验中影响因素及应该注意的问题进行了较全面的分析和总结,以供同行参考。
赵凤菊李井春于学武
关键词:布鲁菌病补体结合试验影响因素

相关作者

丁家波
作品数:371被引量:1,127H指数:17
供职机构:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
研究主题:布鲁氏菌 布鲁氏菌病 疫苗 粗糙型 马立克氏病病毒
蒋卉
作品数:155被引量:177H指数:8
供职机构:中国兽医药品监察所
研究主题:布鲁氏菌 疫苗 粗糙型 阳性血清 布鲁氏菌病
朱良全
作品数:161被引量:300H指数:11
供职机构:中国兽医药品监察所
研究主题:布鲁氏菌 疫苗 布鲁氏菌病 粗糙型 间接ELISA
毛开荣
作品数:130被引量:474H指数:13
供职机构:中国兽医药品监察所
研究主题:布鲁氏菌 布鲁氏菌病 疫苗 粗糙型 感染动物
王楠
作品数:137被引量:321H指数:10
供职机构:中国兽医药品监察所
研究主题:布鲁氏菌 粗糙型 布鲁氏菌病 疫苗 感染动物