目的探究聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术联合抗人球蛋白卡式法在ABO和RhD血型鉴定困难患者中的应用。方法选取118例ABO与RhD血型鉴定困难患者血型标本,分别应用PCR-SSP技术、抗人球蛋白卡式法分析患者血型情况。结果118例血型鉴定困难者采用抗人球蛋白卡式法联合PCR-SSP技术明确检出ABO血型113例,同时应用PCR-SSP可以确定ABO亚型,5例未检出血型的样品经PCR-SSP测序发现,基因分型分别为BO02、A205O01、A102B01、A201B01、B01B01,分别出现第7外显子640A>G杂合突变、第7外显子1009A>G杂合突变、第3外显子150G>C杂合突变、第6外显子240T>C、第7外显子431G>T杂合突变;采用抗人球蛋白卡式法联合PCR-SSP检出RhD血型114例,未检出的4例进行测序,1例显示为RhD weak D 779A/G突变;3例为RhD weak D type 4.0(包括602C/G、667T/G以及819G/A突变)。结论ABO和RhD血型鉴定困难患者应用PCR-SSP技术联合抗人球蛋白卡式法进行鉴定可以准确鉴定血型,并发现血型具体亚型,保证输血安全。
探究将血型基因检测应用于ABO和RhD血型鉴定困难患者输血中的临床价值。方法:选择2020年1月至2021年9月岳阳市临床医疗机构送检在我站开展血型血清学鉴定困难的77例临床样本,20例病人是ABO血型正反不符,52例病人是RhD血型鉴定困难。使用PCR-SSP技术和Sanger测序技术相联合的方法检测上述52例病人,并将其结果用于输血指导,回顾性分析输血效果;结果:(1)20例ABO血型正反定型不符样本经PCR-SSP检测血清学表型AB型2例,B亚或B抗原减弱1例,Bm 1例,B3 1例,O型3例,A亚B或B(A)型2例,Bel型1例,B型5例,A型4例,PCR-SSP检测基因型与血清学表型一致率达到75.00%(15/20),基因测序仅有5例标本血清学表型与基因型表现存在差异;(2)通过与PCR-SSP结果分型比对,52例样本中,RhD阳性、弱D15型、RhD-CE-(2-9)-D型、RhD VI III型分别对应的例数是23、9、9、11;RhD外显子1~10PCR扩增、Sanger测序选择其中的8例开展,未发现存在突变位点;(3)对检测后的77例患者按照结果开展输血,有70例输血有效,7例部分有效,均未出现溶血性输血反应;结论:血型基因检测技术对ABO和RhD血型鉴定困难患者具有较高的鉴定准确度,便于后续输血治疗的开展。
