公共文化服务平台

搜索到4970篇“ 融合表达载体“的相关文章

融合蛋白酶、融合表达载体和工程菌以及N-乙酰神经氨酸的生产方法: 本申请涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种融合蛋白酶、融合表达载体和工程菌以及N‑乙酰神经氨酸的生产方法。本申请的融合蛋白酶包括N‑乙酰‑D‑葡萄糖胺‑2‑差向异构酶、N‑乙酰神经氨酸醛缩酶以及将N‑乙酰‑D‑葡萄糖胺‑2...; 陈峰劳永民

copGFP和Puro^(R)双标记基因慢病毒融合表达载体的构建及应用: 2022年; 目的:构建具有绿色荧光蛋白(copGFP)和嘌呤霉素抗性基因(PuroR)融合表达双筛选标记的慢病毒过表达载体,检测其嘌呤霉素抗性和绿色荧光蛋白表达的特性。方法:从pCDH-CMV-MCS-copGFP载体中扩增copGFP编码区DNA序列,从pLKO.1载体中扩增Puro^(R)编码区DNA序列,运用重组PCR方法,扩增copGFP与Puro^(R)基因融合编码序列并克隆至经BamHⅠ+SalⅠ双酶切的pCDH-CMV-MCS-copGFP载体片段中,构建含copGFP和Puro^(R)融合表达双筛选标记的慢病毒过表达载体;载体的融合标签序列进行测序确证;将该载体用辅助包装质粒PLP1、PLP2、VSVG在293T细胞中包装成慢病毒后感染肝癌细胞MHCC97H,检测感染细胞对嘌呤霉素的抵抗作用以及绿色荧光蛋白的表达情况;为验证该载体表达外源目的基因的有效性,将Sp1编码区DNA序列插入该载体中包装成慢病毒,用对照及表达Sp1的慢病毒感染肝癌细胞MHCC97H,感染细胞经1 mg/ml嘌呤霉素筛选7 d后获得稳定感染细胞株,提取稳定感染细胞的总RNA及总蛋白,分别运用RT-qPCR和Western blot方法检测Sp1在对照及表达Sp1的慢病毒感染的肝癌MHCC97H细胞中的mRNA和蛋白表达水平的差异。结果:成功构建含copGFP和Puro^(R)融合表达双筛选标记的慢病毒过表达载体;该载体与辅助质粒包装出的慢病毒感染肝癌细胞后,感染细胞同时具有嘌呤霉素抗性和表达绿色荧光蛋白特性;将Sp1编码序列插入该载体,包装慢病毒并肝癌细胞,Sp1的mRNA水平对照细胞相比分别升高3.3倍,蛋白水平升高2.2倍(P<0.01)。结论:成功构建含copGFP和Puro^(R)融合表达双筛选标记的慢病毒过表达载体,该载体编码的融合双标记基因具有嘌呤霉素抗性和绿色荧光蛋白表达的特性,可高水平表达长片段的目的基因。; 张浩朱文琦赵思捷李永利侯俊卞成蓉鲍春梅卫桢孙杰李波李伯安; 关键词：慢病毒载体

一种MYC标签融合表达载体的制备方法及其应用: 本发明提供了一种MYC标签融合表达载体的制备方法，该方法为：用KpnI/XhoI双酶切pGL3 Basic载体，得到KpnI/XhoI双酶切pGL3 Basic载体的回收产物，以pRGEB32Bar‑Cas9质粒为模板，...; 姚文李涛徐玉芳张会勇贾利华宋颂李阳曹健生; 文献传递

一种HA标签融合表达载体的制备方法及其应用: 本发明提供了一种HA标签融合表达载体的制备方法，该方法为：用KpnI/XhoI双酶切pGL3 Basic载体，得到KpnI/XhoI双酶切pGL3 Basic载体的回收产物，以pRGEB32Bar‑Cas9质粒为模板，得...; 李涛徐玉芳岳岩磊李阳张会勇马培培贾利华姚文

一种3×FLAG标签融合表达载体的制备方法及其应用: 本发明提供了一种3×FLAG标签融合表达载体的制备方法，该方法为：用KpnI/XhoI双酶切pGL3 Basic载体，得到KpnI/XhoI双酶切pGL3 Basic载体的回收产物，以pRGEB32Bar‑Cas9质粒为...; 徐玉芳姚文李涛张会勇林楠孙玉慧连红梅贾利华李阳

TLN-58和hLYZ基因融合表达载体的构建及其细胞毒性研究: 2021年; 为了评价融合表达抗菌肽TLN-58和人溶菌酶hLYZ双基因重组表达质粒的安全性,试验采用基因重组法将TLN-58和hLYZ基因片段克隆至pEGFP-N1载体,利用转染试剂GeneTwin^(TW)将构建好的重组质粒转染HEK293细胞,RT-PCR验证重组真核质粒在细胞中表达情况;通过DAPI染色、AO/EB染色、CCK-8检测法和流式细胞术测定并分析hLYZ和TLN-58融合基因表达产物的细胞毒性。结果表明:成功构建重组真核质粒pEGFP-N1-hLYZ-TLN-58,当重组质粒DNA用量为1μg且GeneTwin^(TW)转染试剂用量为3μL时,转染HEK293细胞24 h,为最佳转染条件,重组质粒可成功表达目的基因;DAPI染色和AO/EB染色显示,转染pEGFP-N1-hLYZ-TLN-58质粒组细胞凋亡与对照组相比,无显著性差异;CCK-8试验测定细胞相对增殖率(RGR)为50%~74%,显示重组质粒的细胞毒性较小;流式细胞术检测发现重组质粒转染细胞与对照组细胞在G1、G2和S期所占的比例均差异不显著。结果表明,重组质粒的细胞毒性较小且对细胞周期无显著影响,为抗菌肽TLN-58和hLYZ的安全性及抗菌应用奠定了研究基础。; 王小月李丹蓝肇煜武静桥范真玮姚景丽何敬文赵微陈婷金天明; 关键词：细胞毒性

寨卡病毒衣壳蛋白刚性融合表达载体及构建及应用: 本发明公开了一种寨卡病毒衣壳蛋白刚性融合表达载体及构建及应用，寨卡病毒衣壳蛋白刚性融合表达载体MBP‑ZIKV_capcid_pET22b中所述MBP‑ZIKV_capcid的核苷酸序列用SEQ ID NO.1所示。本发...; 杨海涛李婷杨霄云王泽方陈成李瑞; 文献传递

一种可增强目的基因表达的非融合表达载体及其制备方法: 本发明公开了一种可增强目的基因表达的非融合表达载体及其制备方法，属于生物工程技术领域。所述的可增强目的基因表达的非融合表达载体，以pETduet‑1质粒为骨架载体，插入pETduet‑1质粒克隆位点1的氨基酸序列如SEQ...; 王华倩何华锋林丹敏林卫萍王甜甜潘春杏杜志云赵肃清张焜; 文献传递

TLN-58和hLYZ基因融合表达载体的构建及其抗菌活性研究: 抗菌肽(antimicrobial peptides)是一种生物体免疫系统自身分泌的一种可以有效抵御外来病原体侵害的肽类化学物质,可以有效的抑制和预防各种有害物质侵入机体,抗菌肽TLN-58是存在于人皮肤病变小泡中具有5...; 王小月; 关键词：抗体制备细胞毒性; 文献传递

可视化的离子通道蛋白bR可溶性融合表达载体及其构建方法: 本发明公开了一种可视化的离子通道蛋白bR可溶性融合表达载体及其构建方法。所述载体通过分别构建细菌视紫红质的可溶化表达载体pET28a‑ΔspMBP‑bR‑ApoAI*‑His和高度折叠的绿色荧光蛋白表达载体pET28a(...; 宁金凤周敏冯昕妍王犇; 文献传递

加载更多 ∨

相关作者

用户反馈

相关作者

用户登录

用户反馈