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用于制备用于蛋白质分析的液体蛋白质样品的方法、装置和计算机软件
制备用于蛋白质分析的液体蛋白质样品的方法提供了一种制备用于蛋白质分析的液体蛋白质样品的方法。该方法包括:将液体蛋白质样品泵入加热管,其中该液体蛋白质样品包含多个部分;在该加热管中孵育该液体蛋白质样品,其中该样品的第一...
R·佐巴瑞夫孟昭伟
阿萨希毛孢子菌响应氟康唑胁迫的蛋白质分析
2025年
目的探讨氟康唑对阿萨希毛孢子菌(T.asahii)蛋白质学的影响,从蛋白层面揭示T.asahii对氟康唑胁迫的响应过程及唑类耐药机制。方法以T.asahii AS 2.2174作为研究菌株,基于微量液基稀释法测定氟康唑的最低抑菌浓度(MIC)。应用串联质谱标签(TMT)技术结合液相色谱与串联质谱(LC-MS/MS)技术检测氟康唑(1×MIC)处理前后T.asahii蛋白丰度的变化。以差异倍数≥1.20或≤0.83,且P<0.05作为筛选标准,鉴定差异表达蛋白(DEPs)。对DEPs进行Gene Ontlogy(GO)和京都基因与基因百科全书(KEGG)富集分析,以了解DEPs的生物学属性以及DEPs参与的主要生物学通路。最后,使用多反应监测(MRM)技术对目标差异蛋白进行靶向验证。结果氟康唑对T.asahii AS 2.2174的MIC值为8μg/ml。共鉴定到DEPs 196个,其中上调DEPs 93个,下调DEPs 103个。功能富集分析提示DEPs主要参与甾醇合成与代谢、药物代谢、应激反应、能量代谢及翻译等生物学过程。目标差异蛋白在MRM靶向验证和TMT-LC-MS/MS检测中具有一致的表达趋势。结论在氟康唑胁迫下,T.asahii蛋白丰度发生显著改变。生物信息学分析揭示了T.asahii响应氟康唑胁迫的复杂分子机制,这些机制对于了解T.asahii唑类耐药性及挖掘新的药物靶点提供了重要见解。
杨鑫夏志宽敖俊红祝贺李季瑾吴佳敏徐龄智杨蓉娅
关键词:阿萨希毛孢子菌蛋白质组学多反应监测
一种基于AIE光催化剂的高尔基体蛋白质分析方法
本发明涉及一种用于高尔基体蛋白质及其介导分泌蛋白质鉴定的新型化学标记方法——基于聚集诱导发光(AIE)分子的光催化邻近标记。该方法利用具有AIE特性且可高效靶向高尔基体的光敏剂,在可见光激发下催化产生单线态氧或发生单...
张丽华王鹤江波蒋倩倩随志刚赵宝锋杨开广张玉奎
一种基于硫酸软骨素的光催化剂的高尔基体蛋白质分析方法
本发明为一种基于硫酸软骨素的光催化剂的高尔基体蛋白质分析方法,公开了一种基于硫酸软骨素(CS)的光催化剂的制备方法,并同时将该材料用于的高尔基体蛋白质原位分析。在可见光激发下,该材料催化产生单线态氧或发生单电子转移反...
张丽华魏淑娴江波王鹤蒋倩倩杨开广张玉奎
非细胞毒性浓度AFB_(1)暴露下H1N1型猪流感病毒感染3D4/21细胞的蛋白质分析
2025年
世界范围内普遍存在黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))污染,严重危害畜禽健康。目前,全世界超过34个国家和地区对畜禽饲料中AFB_(1)的含量制定了限量标准。然而,即使低于限量标准的AFB_(1)暴露仍具有促进某些病原微生物感染的风险。因此,本研究以3D4/21细胞为模型,首先筛选对细胞无毒性的AFB_(1)浓度,然后使用蛋白转印和TCID50法分别检测猪流感病毒(swine influenza virus, SIV)的NP蛋白相对表达量和滴度,确定非毒性浓度AFB_(1)暴露对SIV复制的影响。接下来,应用蛋白质学平台下的TMT技术检测SIV感染和SIV+AFB_(1)共同处理细胞之间的差异表达蛋白和富集通路,探索AFB_(1)促进SIV复制的可能机制。结果显示,0.01μg·mL^(-1)AFB_(1)对3D4/21细胞无细胞毒性,且能够显著促进SIV复制;TMT检测显示,与SIV感染相比SIV+AFB_(1)共同处理细胞中242个蛋白表达上调,327个蛋白表达下调;进一步通路富集分析筛选出影响AFB_(1)促进SIV复制的差异通路137条,前5名分别为蛋白酶体通路、坏死性凋亡通路、多物种细胞凋亡通路、军团杆菌病通路和药物代谢-其他酶通路。其中细胞凋亡相关通路可能是调控AFB_(1)促进SIV复制的关键性通路,随后的DAPI染色试验也证实了这一点。本研究将为早期预防和控制因AFB_(1)污染而加剧的SIV感染奠定基础,并为探讨其他感染性疾病增加的原因提供参考。
庞思瑶张金龙孙雨航
关键词:H1N1猪流感病毒差异表达蛋白
基于转录蛋白质分析筛选五龙鹅产蛋相关候选基因
2025年
旨在通过转录蛋白联合分析来挖掘五龙鹅产蛋量相关候选基因,为其产蛋性能遗传机制研究提供理论基础。本研究选取200只体重相近的36周龄健康五龙鹅种鹅,记录其36~54周龄产蛋情况。在产蛋后期(54周龄)时,根据产蛋水平,将产蛋量最高的30只鹅定为高产,产蛋量最低的30只鹅定为低产,从高产(H)和低产(L)鹅中各采集3个卵巢织,提取RNA和蛋白质,通过转录测序(RNA-Seq)和4D-DIA蛋白定量分析筛选差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)和差异表达蛋白(differentially expressed proteins, DEPs)。之后对筛选的差异基因和蛋白进行RT-qPCR验证、功能富集分析蛋白互作(PPI)网络的构建与分析,筛选鹅产蛋性能相关的候选基因。结果:共鉴定到450个DEGs和333个DEPs,其中,AFAP1、INHA、FNDC1、INHBB在基因和蛋白水平上表达出相同的差异趋势。富集分析显示,DEGs和DEPs显著富集到364个GO条目和75个KEGG通路,涉及生殖结构发育(gland development)、性别分化(sex differentiation)、性激素活性(hormone activity)、TGF-β通路(TGF-β signaling pathway)、卵母细胞减数分裂(oocyte meiosis)、GnRH信号通路(GnRH signaling pathway)、孕激素介导的卵母细胞成熟(progesterone-mediated oocyte maturation)等多个与产蛋相关的通路和关键生物过程。选取9个潜在候选基因,对高产和低产(包含转录测序样品)各8个卵巢织进行RT-qPCR验证,表达趋势与测序结果一致。基于上述研究结果,本研究最终筛选到6个与五龙鹅产蛋性能密切相关的候选基因(PTTG1、LRP2、TNFSF10、INHA、INHBB、FST),丰富了五龙鹅产蛋性能的相关分子机制。
鲁秀张名爱孔敏张晶王秉翰侯中一滕兴怡姜雅静凡文磊王宝维
关键词:五龙鹅转录组蛋白组产蛋量候选基因
以肽的C末端酰胺衍生物为内标的靶向蛋白质分析方法
本发明适用于生物化学技术领域,提供了以肽的C末端酰胺衍生物为内标的靶向蛋白质分析方法,步骤为:将等量的内标肽段和目标肽段混合,溶解于甲酸水溶液;倍比稀释为一系列浓度梯度的混合溶液,液相色谱质谱联用仪对各个浓度的混合溶液...
刘宁朱耿军田星
蛋白质半胱氨酸及其氧化修饰探针在化学蛋白质分析中的应用
半胱氨酸由于其固有的高亲核性在所有蛋白质编码氨基酸中是独一无二的。蛋白质半胱氨酸的硫原子可以呈现多种不同的氧化还原状态,从而表现出广泛的化学反应活性。它们可以很容易地受到诸多的氧化还原机制影响,从而形成各种氧化翻译后修饰...
姜中尧
关键词:氧化修饰
NaCl胁迫盐芥的转录与氧化还原蛋白质分析及相关基因功能解析
土地盐渍化是影响植物生长和农作物产量的主要限制因素之一,是重要的世界性生态环境问题,探究植物响应盐胁迫调控机制是解决这一问题必要的基础研究工作。盐生植物适生于天然盐渍土中,在与环境协同演化过程中形成高盐耐受性,产生了复杂...
李佳文
关键词:盐芥盐胁迫转录组
茶树应答茶小绿叶蝉为害的蛋白质分析
2024年
【目的】探明都匀毛尖本地种茶树响应茶小绿叶蝉为害相关的蛋白质。【方法】以被茶小绿叶蝉侵染0、12、24、36、48 h的都匀毛尖本地种茶树叶片为材料,利用串联质谱标签(tandem mass tag,TMT)结合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术对茶小绿叶蝉侵染茶树叶片后的蛋白质进行定性定量分析。【结果】共鉴定出2893个蛋白质,0 h与12 h、24 h、36 h、48 h之间分别有0、1、848、849个差异蛋白质,共有2622个蛋白质被注释,其中2360个蛋白注释到GO数据库,1232个注释到KEGG数据库。GO和KEGG分析表明茶小绿叶蝉侵染茶树时可能通过差异蛋白质4-二磷酸胞基-2-c-甲基-d-赤藓糖醇激酶、法尼基二磷酸合成酶、香叶基二磷酸合成酶、香叶基香叶基二磷酸合成酶、过氧化物酶、果胶酯酶、丙二烯氧化环化酶、倍半萜类、三萜类、单萜类、二萜类化合物以及倍半萜和三萜生物合成途径、萜类骨架生物合成途径和单萜生物合成途径来抵御害虫的侵染。【结论】筛选出4个差异蛋白质(4-二磷酸胞基-2-c-甲基-d-赤藓糖醇激酶、法尼基二磷酸合成酶、香叶基二磷酸合成酶和香叶基香叶基二磷酸合成酶)和萜类化合物可能在应答防御小绿叶蝉侵害时具有重要的作用。研究结果可为揭示茶树应答茶小绿叶蝉为害的分子机制提供理论依据。
王芬喻佩翟媛李传刚罗思妤裴会敏
关键词:茶树茶小绿叶蝉蛋白质组TMT差异蛋白

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张丽华
作品数:717被引量:819H指数:13
供职机构:中国科学院大连化学物理研究所
研究主题:蛋白质 蛋白质组 肽段 整体柱 蛋白质组学
张玉奎
作品数:1,071被引量:2,253H指数:22
供职机构:中国科学院大连化学物理研究所
研究主题:蛋白质 蛋白质组 肽段 高效液相色谱 整体柱
李建科
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供职机构:中国农业科学院蜜蜂研究所
研究主题:蜜蜂 蜂王浆 蛋白质组 蜂箱 双向电泳
叶明亮
作品数:289被引量:129H指数:7
供职机构:中国科学院大连化学物理研究所
研究主题:肽段 蛋白质组学 糖肽 磷酸化 糖基化
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作品数:60被引量:100H指数:6
供职机构:中国科学院北京基因组研究所
研究主题:水稻 蛋白质组分析 蛋白质组学 腾冲嗜热厌氧菌 蛋白质组