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脂多糖受体复合体在急性前葡萄膜炎虹膜色素上皮细胞中作用的研究进展
2023年
近年来,有研究结果表明人葡萄膜中的虹膜色素上皮细胞具有对脂多糖(LPS)反应的固有模式识别受体,包括Toll样受体(TLR)4、髓样分化蛋白(MD)2及分化簇(CD)14。这一发现扩展了微生物触发因子和葡萄膜固有免疫在急性前葡萄膜炎发病机制中的解释。提示LPS受体复合物成分可能成为该病的治疗靶点。本文中笔者对LPS受体复合体在人虹膜色素上皮细胞和葡萄膜炎动物模型中的研究现状进行综述。
张紫薇卢弘
关键词:急性前葡萄膜炎虹膜色素上皮细胞
枸杞子促进虹膜色素上皮细胞定向分化治疗视网膜色素变性的分子网络调控机制研究被引量:3
2019年
目的:基于生物信息学和网络药理学方法探究枸杞子(LF)促进虹膜色素上皮细胞定向分化治疗视网膜色素变性(RP)的分子网络调控机制。方法:在中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)检索LF的主要活性成分及其可能的作用靶点;从GEO数据库下载GSE81058基因表达谱数据,采用R软件构建虹膜色素上皮细胞(IPE)和视网膜色素上皮细胞(RPE)差异表达基因火山图和聚类热图;采用STRING数据库构建LF成分-靶点和IPE-RPE差异表达基因的蛋白质-蛋白质交互网络(PPI),运用Cytoscape提取交集网络基因;通过DAVID数据库对交集基因进行基因本体和信号通路分析;采用cytoHubba分析LF作用于IPE的关键靶点。结果:共获得LF的化学成分188个,其中主要的入血活性成分36个,这些活性成分可能作用的靶点201个;IPE与RPE主要的差异表达基因有142个,其中上、下调基因各71个;发掘得到105个与LF促进IPE分化以治疗RP的相关基因靶点;LF作用于这些靶点涉及的生物学过程包括调节细胞分化、调节视网膜层形成等,相关的分子功能主要涉及转录共激活剂活性、离子通道活性等,主要富集于细胞质、高尔基体、细胞核等区域;LF作用于IPE涉及的分子机制包括调控PI3K-Akt信号通路、神经活性配体-受体相互作用通路等;LF促进IPE分化主要作用于SPP1、MMP9等十个关键靶点。结论:IPE与RPE具有明显差异的基因表达谱,LF的有效活性成分可作用于这些差异表达基因,促进IPE细胞分化为RPE,从而治疗RP。本研究可为细胞移植与中医药联合的中西医结合疗法应用于RP的临床治疗提供科学依据。
宋厚盼曾梅艳陈小娟陈新怡彭俊周亚莎杨毅敬杨焘蔡雄蔡雄
关键词:视网膜色素变性虹膜色素上皮细胞视网膜色素上皮细胞枸杞子
基因转染的虹膜色素上皮细胞移植后RCS鼠视网膜BDNF表达观察
2011年
目的探讨脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因转染的虹膜色素上皮细胞(AAV-BDNF-IPE)移植入皇家外科学院(royal college of surgeons,RCS)大鼠视网膜下腔后,不同时期视网膜组织BDNF表达变化。方法通过外路途径将BDNF基因转染的虹膜色素上皮细胞移植到RCS大鼠视网膜下腔,术后3、5、7、9、11周分别取RCS大鼠手术眼及对照组动物眼视网膜组织,用酶联免疫吸附法(Elisa)检测视网膜组织中BDNF的表达水平,比较分析这些数据。结果对照组RCS大鼠出生后3周龄时视网膜组织中BDNF仍保持较高水平,其后迅速降低,其中3周龄组与其它周龄组比较,P<0.01;手术组RCS大鼠术时、术后3、5、7、9、11周各组间两两比较,BDNF表达无显著差异(P>0.05);出生后6周龄直到14周龄的不同时期,AAV-BDNF-IPE移植手术组RCS大鼠视网膜BDNF表达水平均明显高于对照组(其中6周龄组P<0.05,其它各周龄组P<0.01)。结论 BDNF基因转染的虹膜色素上皮细胞在RCS大鼠视网膜下腔移植后,视网膜组织中BDNF可以持续稳定高水平表达,这为临床开发新的神经营养因子给药方式提供了实验依据。
张英瑜高朋芬杨丽霞
关键词:脑源性神经营养因子虹膜色素上皮细胞视网膜色素变性酶联免疫吸附法
腺相关病毒介导色素上皮衍生因子转染人虹膜色素上皮细胞的体外研究
2011年
目的探讨以腺相关病毒(AAV)为载体,对体外培养的人虹膜色素上皮(IPE)细胞进行色素上皮衍生因子(PEDF)转染,获得高效表达PEDF转基因细胞的可行性。方法构建携带PEDF基因的重组AAV载体AAV-PEDF,体外培养人IPE,用1×106pfu的AAV-PEDF按感染复数(MO I)为0、2、10和20分别感染体外培养的IPE细胞;荧光显微镜下观察细胞绿色荧光蛋白表达情况;流式细胞术检测细胞转染效率;RT-PCR和W estern b lotting法鉴定PEDF在IPE细胞中的表达。结果 AAV-PEDF转染后,IPE细胞生长正常,用荧光显微镜、RT-PCR和W estern b lotting均检测到PEDF表达。在MO I为20时,细胞感染阳性率达64.22%。结论 AAV-PEDF能有效地转染体外培养的IPE细胞并有效表达PEDF。
赵莼王方计菁施沃栋范先群罗敏
关键词:腺相关病毒色素上皮衍生因子虹膜色素上皮细胞转染
基因转染的虹膜色素上皮细胞治疗RCS大鼠视网膜色素变性的实验研究
遗传性视网膜变性是一组以进行性光感受器细胞色素上皮细胞功能丧失为共同表现的疾病。目前为止,这些疾病尚无有效治疗方法/[1, 2/]。全世界有数百万人因此永久致盲,危害性极大。临床上迫切需要有效措施以改善和维护RPE功能...
张英瑜
关键词:虹膜色素上皮细胞视网膜色素变性视网膜电图感光细胞
虹膜色素上皮细胞移植的研究进展
2009年
虹膜色素上皮(IPE)细胞是一种胚胎发育与视网膜色素上皮(RPE)细胞同源的生长细胞,不仅在结构上与RPE细胞有着惊人的相似之处,而且在吞噬视杆细胞外节段和分泌细胞因子等功能方面也有显著一致性。利用基因转染等方法将IPE细胞移植到视网膜下腔不仅可以应用于遗传性视网膜变性,老年性相关变性等眼科疾病的治疗,同时还可以应用于神经退行性疾病的治疗。关注IPE细胞的功能特性及其移植方法的研究现状和应用前景具有重要的临床意义。现就IPE细胞的功能特性及研究进展作一综述。
邵珺樊莹
关键词:细胞移植基因疗法
自体虹膜色素上皮细胞移植治疗视网膜色素上皮细胞变性研究被引量:3
2008年
目的:研究自体虹膜色素上皮细胞(iris pigment epithelium,IPE)移植治疗视网膜色素上皮细胞变性的效果。方法:采用酶-机械分离-酶消化法获取高纯度、高活力的IPE细胞用于移植,采用外路法将IPE细胞悬液移植入视网膜下腔。结果:IPE移植术后患者眼底移植区色素沉着减少,未见渗出,出血,视网膜平,视力入院时的0.15,术后2wk提高至0.2。多焦ERG显示移植区P1波平均反应密度上升。结论:自体虹膜色素上皮细胞移植有望成为视网膜色素上皮细胞变性疾病治疗的一新方法。
徐国兴谢茂松郭健郑卫东何青林鸿高珊
关键词:虹膜色素上皮
腺相关病毒介导bFGF基因对虹膜色素上皮细胞的转染及表达被引量:1
2008年
目的:评价重组腺相关病毒(rAAV)载体介导碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因转染体外培养的虹膜色素上皮细胞(IPE)后,bFGF基因在细胞内转录和翻译水平的表达情况。方法:取IPE细胞,转染含有分泌型bFGF全长cDNA和巨细胞病毒启动子的rAAV-bFGF,以未转染和同样条件下转染rAAV-GFP的细胞作对照。1周后,RT-PCR检测细胞中bFGFmRNA的表达。ELISA法检测细胞中bFGF蛋白的表达。结果:转染rAAV-bFGF的IPE细胞有bFGFmRNA的表达,转染rAAV-GFP和未转染细胞无bFGFmRNA的表达。以105个细胞计算,转染rAAV-bFGF的IPE细胞bFGF蛋白含量为(1.322±0.663)μg/L,高于未转染组的(0.213±0.036)μg/L和转染rAAV-GFP组的(0.243±0.050)μg/L,差异有统计学意义(F=18.294,P=0.000)。结论:IPE细胞能被rAAV-bFGF转染,转染细胞能够在转录和翻译水平表达bFGF基因。
杨晓慧孙葆忱
关键词:腺相关病毒碱性成纤维细胞生长因子虹膜色素上皮
牛眼视网膜和虹膜色素上皮细胞体外培养的生物学特性比较
2008年
目的分离、培养和纯化牛原代视网膜色素上皮细胞(RPE)和虹膜色素上皮细胞(IPE),比较体外培养的RPE与IPE的生物学特性。方法采用酶辅助显微分离牛眼RPE和IPE,进行体外培养,密度梯度离心法纯化并采用免疫组化法进行鉴定。透射电镜观察体外培养RPE、IPE的超微结构,比较两种细胞体外培养下的生长状况。结果纯化后体外培养牛RPE和IPE的角蛋白表达强阳性,细胞阳性率分别达到94%和88.7%。原代培养的牛RPE和IPE外形类似,为多角形,具有相似的生长曲线。电镜显示两种细胞都具有细胞极性,顶端有大量微绒毛,原代细胞内含有大量色素颗粒和内质网,RPE含有较多与其吞噬功能相适应的溶酶体。结论通过酶辅助显微分离色素上皮细胞,结合密度梯度离心的方法可以获得较纯的牛RPE和IPE,该方法同样适用于周切虹膜材料。两种色素上皮细胞具有相似的形态和生物学性状,但仍然存在与功能相适应的超微结构差异。
汪枫桦顾青孙晓东钱锦张皙许迅
关键词:视网膜色素上皮细胞虹膜色素上皮细胞
碱性成纤维细胞生长因子基因转染对虹膜色素上皮细胞增殖及细胞周期的影响
2008年
目的:了解重组腺相关病毒(rAAV)载体介导碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因转染对体外培养的虹膜色素上皮细胞(IPE)增殖及细胞周期的影响。方法:在体外培养的IPE细胞中加入转染rAAV-bFGF基因细胞和未转染细胞的培养液上清,继续培养4h或1d后分别应用MTT法和流式细胞仪检测IPE细胞的生长状况。结果:MTT法结果显示,加入rAAV-bFGF基因转染组培养液上清的IPE细胞D值为0.338±0.047,对照组为0.277±0.064,2组相比,t=3.745,P<0.05。流式细胞仪检测结果显示:加入rAAV-bFGF基因转染组培养液上清的S期IPE细胞为(21.19±1.93)%,与对照组(16.47±2.37)%相比,t=-3.448,P<0.05。结论:转染rAAV-bFGF的IPE细胞分泌的bFGF具有生物活性,这为rAAV-bFGF转染IPE细胞移植治疗视网膜色素变性提供了理论支持。
杨晓慧孙葆忱
关键词:碱性成纤维细胞生长因子基因转染虹膜色素上皮细胞细胞增殖细胞周期

相关作者

孙葆忱
作品数:113被引量:789H指数:15
供职机构:首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心
研究主题:低视力 康复 视力 助视器 视觉康复
杨晓慧
作品数:9被引量:55H指数:3
供职机构:北京市眼科研究所
研究主题:虹膜色素上皮细胞 腺相关病毒 绿色荧光蛋白基因 转染 体外培养
张皙
作品数:308被引量:1,424H指数:17
供职机构:上海市第一人民医院
研究主题:视网膜脱离 孔源性视网膜脱离 玻璃体后脱离 糖尿病视网膜病变 视网膜
鲍延丽
作品数:3被引量:3H指数:1
供职机构:哈尔滨医科大学附属第二医院
研究主题:虹膜色素上皮细胞 细胞移植 虹膜 自体移植 上皮细胞
汪枫桦
作品数:88被引量:382H指数:9
供职机构:上海市第一人民医院
研究主题:玻璃体后脱离 视网膜脱离 年龄相关性黄斑变性 视网膜 脉络膜厚度