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葡萄扇叶病毒的RT-LAMP检测方法
本发明提供了葡萄扇叶病毒的实时环介导等温扩增(RT‑LAMP)检测方法,所述方法是以葡萄扇叶病毒的外壳蛋白基因为目标基因设计引物,利用引物进行实时环介导等温扩增检测技术检测鉴定葡萄扇叶病毒。本发明提供的检测方法特异性强,...
谈静惠陈林谢婷张博文
葡萄扇叶病毒RT-LAMP检测方法的建立被引量:3
2023年
葡萄扇叶病毒(grapevine fanleaf virus,GFLV)是侵染葡萄的主要病毒之一,严重影响葡萄的产量和品质。该病毒的传统检测方法操作复杂、耗时长,本研究利用反转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)技术,建立葡萄扇叶病毒的RT-LAMP荧光快速检测方法。研究结果显示,新建的GFLV RT-LAMP检测方法最适检测温度为64℃,在60 min内可完成反应,灵敏度为普通RT-PCR方法的10倍,且特异性良好。用GFLV的RT-LAMP方法对葡萄基地采集的90份葡萄叶片样品进行检测,结果与普通RT-PCR方法检出一致。说明建立的葡萄扇叶病毒RT-LAMP检测方法有快速、便捷、特异性强、灵敏度高的特点,可供海关检疫、植保站、实验室及其他机构使用。
谈静惠谢婷张博文陈林
关键词:葡萄扇叶病毒反转录-聚合酶链式反应
葡萄扇叶病毒的定性检测 实时荧光PCR法
本标准规定了葡萄植株和离体繁殖材料中葡萄扇叶病毒的实时荧光PCR检测方法。本标准适用于葡萄植株和离体繁殖材料中葡萄扇叶病毒的定性检测。
葡萄扇叶病毒基因变异分析及分子检测技术研究
葡萄扇叶病毒(GFLV)引起的葡萄扇叶病是全世界范围内最严重的葡萄病毒病害之一。GFLV可导致葡萄产量降低、品质下降,并且缩短葡萄园的使用寿命。我国对葡萄扇叶病的研究较晚,1980年首次在新疆发现,至今未获得中国GFLV...
周俊
关键词:葡萄扇叶病毒实时荧光定量基因变异分子检测
文献传递
葡萄扇叶病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用被引量:13
2016年
根据葡萄扇叶病毒(Grapevine fanleaf virus,GFLV)RNA2序列设计4对特异性引物,通过引物筛选、体系优化,建立了以FL-HP1-F/R为引物的GFLV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法。该方法标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为100%,相关性系数为0.998,灵敏性分别是常规RT-PCR和巢式RT-PCR的100倍和10倍。重复性试验表明组内和组间变异系数均小于2.59%,显示该方法具有较好的检测稳定性。内参基因的稳定性测试结果表明葡萄EF1和GAPDH基因具有较好的试验稳定性。利用建立的荧光定量方法测定12个葡萄样品中GFLV含量,并检测58个葡萄样品,结果表明不同葡萄样品中GFLV含量差异较大,最高含量是最低含量的81 245.5倍,与ELISA和巢式RT-PCR相比,实时荧光定量方法能检测出更多的GFLV分离物。
周俊范旭东董雅凤张尊平胡国君任芳李正男
关键词:葡萄葡萄扇叶病毒实时荧光定量RT-PCR
免疫磁珠RT-PCR法检测葡萄扇叶病毒被引量:3
2014年
葡萄扇叶病毒引起的葡萄扇叶病是葡萄生产上的主要病害之一,建立简便、灵敏、准确的检测方法是葡萄健康生产的基础。将葡萄扇叶病毒抗体和0.5μm大小的超顺磁性磁珠SiMAG-PGL偶联,制备出特异性免疫磁珠,用于分离和富集检测样品中的病毒。富集的病毒可直接用于RT-PCR检测,本文所建立的检测方法可有效地检测到葡萄扇叶病毒的3个分离物,而检测烟草环斑病毒、南芥菜花叶病毒的结果为阴性,检测的特异性较强。此法检测提纯的葡萄扇叶病毒灵敏度可到0.01 ng/mL,检测葡萄扇叶病毒感染的苋色藜叶片可稀释到10-6,该方法适用于植株体内低浓度病毒的检测。
魏梅生尤佳马洁李桂芬张永江
关键词:葡萄扇叶病毒免疫磁珠RT-PCR
葡萄扇叶病毒脱除与检测技术研究
本研究用热处理、热处理+茎尖培养、热处理+茎尖培养+板蓝根、超低温+茎尖培养四种方法对葡萄扇叶病毒进行了脱除,并对葡萄扇叶病毒的Dot-ELISA、dsRNA、RT-PCR和IC-RT-PCR检测技术进行了比较研究,从而...
尚志华
关键词:葡萄扇叶病毒茎尖培养脱毒病毒检测
文献传递
葡萄扇叶病毒的脱除与检测技术研究
1.Dot-ELISA对大田37株魏可葡萄进行病毒检测,有29株带毒,检测率为78.4%2.用dsRNA检测了同时感染卷叶病毒扇叶病毒的植株,电泳结果显示有两条带,一条大小为17000bp左右,初步认为是卷叶病毒;另一...
尚志华著
甘肃葡萄扇叶病毒和卷叶病毒的检测被引量:3
2005年
采用 DAS-ELISA 检测方法对甘肃地区的葡萄主要品种进行扇叶病毒和卷叶病毒的调查和测定。结果表明,这两种病毒病在甘肃地区的主要葡萄产区均有发生。兰州地区和一些老的葡萄产区葡萄病毒病较严重。通过对比植株下部枝条的幼叶、幼茎、老叶和老茎病原的检测结果,说明植株下部幼嫩组织是卷叶病毒最适的检测部位。
谭雪莲马静芳曹孜义
关键词:葡萄扇叶病毒卷叶病毒
中国葡萄扇叶病毒研究进展
葡萄扇叶病毒葡萄上的重要病毒之一,世界各葡萄栽培区均有发生,也是我国葡萄上的主要病毒,对葡萄产业造成严重威胁。鉴于该病毒的经济重要性,各国对该病毒开展了研究,本文综述了我国针对该病毒的相关研究进展。
张永江王长义李丹
关键词:葡萄扇叶病毒
文献传递

相关作者

李红叶
作品数:147被引量:778H指数:17
供职机构:浙江大学
研究主题:柑橘 柑橘黑点病 杀菌剂 抑霉唑 病原鉴定
谷洪仓
作品数:12被引量:41H指数:4
供职机构:山东农业大学
研究主题:葡萄扇叶病毒 苹果 病毒病 无病毒苗木 苹果病毒病
周雪平
作品数:492被引量:2,030H指数:26
供职机构:中国农业科学院植物保护研究所
研究主题:单抗 杂交瘤细胞株 分泌 双生病毒 病毒
鲁晓燕
作品数:88被引量:609H指数:14
供职机构:石河子大学农学院
研究主题:NACL胁迫 酸枣 幼苗 库尔勒香梨 CACL2
陈力耕
作品数:107被引量:1,236H指数:19
供职机构:浙江大学
研究主题:柑桔 杨梅 银杏 香榧 刺梨