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NMM抗肿瘤DNA疫苗原液大肠杆菌菌体蛋白质残留量检测方法的建立与验证被引量：1: 2023年; 目的建立并验证检测NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中大肠杆菌菌体蛋白质残留量的双抗体夹心ELISA试验方法。方法使用双抗体夹心ELISA试验方法检测NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中大肠杆菌菌体蛋白残留量,采用四参数logstic曲线进行回归分析,并对该方法的专属性、检测限、定量限、线性与范围、精密度、准确度、耐用性等进行验证,验证通过对5批样品进行检测。结果采用双抗体夹心ELISA试验方法进行大肠杆菌蛋白质残留量检测时,DNA疫苗原液无需进行稀释。NMM抗肿瘤DNA疫苗原液对大肠杆菌菌体蛋白质的检测无干扰及抑制作用,方法的专属性良好;本法检测限为0.41 ng/ml;定量限为0.98 ng/ml;该方法测定宿主菌蛋白质残留量在0~100 ng/ml范围内线性良好,R^(2)≥0.9999;本方法重复性试验中宿主菌蛋白质含量RSD值均低于15%,中间精密度实验中样品吸光值RSD值低于10%,精密度结果良好。在检测线性范围内加入高、中、低3种浓度的大肠杆菌菌体蛋白,回收率均值为100.35%(n=9,RSD=3.58%);本方法检测实验条件发生微小变动时(不同人员、不同批次试剂盒),对测定结果的影响在可接受范围内。应用该方法对5批NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中大肠杆菌蛋白质残留量进行检测,大肠杆菌菌体蛋白残留量均在1 ng/mg左右,远低于相关指导原则中规定的不高于1μg/mg的质量标准。结论该方法可用于NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中宿主菌蛋白质含量的检测。; 郭润姿伊君梅孙澳田园车亦伟邱创钧王宇

重组人脑利钠肽中大肠埃希菌菌体蛋白质残留量与外源性DNA残留量测定法的建立: 梁增伟

冷鲜滩羊肉贮藏中菌体蛋白质的变化对微生物代谢产物的影响被引量：4: 2020年; 冷鲜滩羊肉贮藏过程中,采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术研究微生物菌体蛋白质及变化规律,并结合气相色谱-飞行时间质谱联用仪分析其代谢产物及变化规律,采用主成分分析法及热力图分析法对菌体蛋白质差异与代谢产物进行关联分析。结果表明:当菌体蛋白相对含量随着贮藏时间的延长而增加时,与之呈正相关的代谢产物相对含量增加,与之呈负相关的代谢产物相对含量减少;当菌体蛋白质的相对含量随着贮藏时间的延长而减少时,与之呈正相关的代谢产物相对含量减少,与之呈负相关的代谢产物相对含量增加;说明冷鲜滩羊肉在贮藏过程中微生物的菌体蛋白质变化对其代谢产物有影响,推测是因为菌体蛋白含量在贮藏期间有差异,对代谢通路产生了不同程度的影响。; 赵晓策姬琛罗瑞明胡倩倩尤丽琴苑昱东; 关键词：蛋白质组学代谢组学菌体蛋白质代谢产物代谢通路

冷鲜滩羊肉贮藏中菌体蛋白质与微生物群落演替的关联性分析被引量：1: 2019年; 在冷鲜滩羊肉贮藏过程中,采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术研究其微生物菌体蛋白质,并结合宏基因组测序法分析出微生物群落演替过程中的优势菌,得出二者之间的相关性:随着假单胞菌从最初的9.98%上升到33.70%,热死环丝菌从0%上升到23.98%,与坏死诱导疫霉蛋白质、NADH-泛醌氧化还原酶链4L、生长抑制素-28、ATP合酶F(0)复合体亚基C1、朊蛋白质类呈正相关,与角蛋白质关联蛋白质3-1呈负相关;埃希氏菌从4.35%上升到11.40%,乳酸杆菌从4.02%上升到7.54%,与角蛋白质关联蛋白质8-1、抗菌肽及磷载脂蛋白质C-II呈正相关,与GRF/GHRH生长激素释放素、ATP合成蛋白质、载脂蛋白质E呈负相关;说明随着优势菌的含量增多,呈正相关的菌体蛋白质含量上升且与相对应的优势菌息息相关,而呈负相关的菌体蛋白质会逐渐被优势菌降解,亦导致了优势菌的增长趋势缓慢。; 赵晓策胡倩倩罗瑞明张赫宇; 关键词：菌体蛋白质蛋白质组学宏基因组学优势菌

ELISA法测定生物制品中大肠杆菌菌体蛋白质残留量的研究被引量：1: 2018年; 目的对ELISA法测定生物制品中的大肠杆菌菌体蛋白质残留量进行方法学验证,确定该方法用于大肠杆菌菌体蛋白质残留量质量控制的可行性。方法依据《中国药典》2010年版三部附录ⅨC《大肠杆菌菌体蛋白质残留量测定法》。结果与结论该方法的线性、检测限、专属性和耐用性均符合方法学验证要求,具有简洁、快速、灵敏等优点,可基本满足生物制品行业对大肠杆菌制品中菌体蛋白质残留量质量控制的要求。; 王秋红; 关键词：ELISA法

ELISA法测定生物制品中大肠杆菌菌体蛋白质残留量的研究: 目的:对ELISA法测定生物制品中的大肠杆菌菌体蛋白质残留量进行方法学验证,确定该方法用于大肠杆菌菌体蛋白质残留量质量控制的可行性。方法:依据《中国药典》2010年版三部附录ⅨC《大肠杆菌菌体蛋白质残留量测定法》。结果与...; 王秋红; 关键词：ELISA法; 文献传递

褐飞虱类酵母共生菌菌体蛋白质提取方法的比较被引量：2: 2015年; 为了筛选出适合褐飞虱Nilaparvata lugens类酵母共生菌蛋白质提取的细胞破碎方法,选择超声波破碎法、反复冻融法和液氮研磨法等3种细胞破碎方法提取共生菌吡虫啉敏感菌株和抗性菌株蛋白质。结果表明:菌体显微形态观察发现,使用超声波破碎法和液氮研磨法处理类酵母共生菌的细胞破碎效果均优于反复冻融法,处理后菌体分布均匀,破碎彻底;72 h是提取菌体蛋白质的最佳培养时间。定量分析表明:用超声波破碎法提取蛋白质质量浓度最高,液氮研磨法次之,反复冻融法提取蛋白质质量浓度的效果最差,各方法所提蛋白质质量浓度差异显著(P<0.05)。培养72 h后,超声波破碎法、液氮研磨法和反复冻融法提取的蛋白质质量浓度分别为2.82 g·L-1,2.62g·L-1和2.12 g·L-1(敏感菌株)及2.64 g·L-1,2.53 g·L-1和2.05 g·L-1(抗性菌株)。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分析发现:超声波破碎法获得的蛋白质不仅得率高,且条带清晰,丰度好。液氮研磨法虽得率高,但蛋白质部分降解,条带不清晰;而反复冻融法获得的蛋白质得率最低。超声波破碎法更适合于褐飞虱类酵母共生菌的蛋白质提取,该研究为后续蛋白质的双向电泳实验和分离差异蛋白质提供技术支撑。; 张海强陈建明张珏锋; 关键词：植物保护学褐飞虱类酵母共生菌菌体蛋白质

鼠疫菌pYC质粒对菌体蛋白质组影响的初步研究被引量：1: 2011年; 目的了解鼠疫菌pYC质粒对菌体蛋白质组的作用。方法将含有pYC质粒的鼠疫菌与不含该质粒的鼠疫菌通过双向电泳的方法进行蛋白质组比对，并将差异蛋白进行质谱鉴定。结果含有pYC质粒的鼠疫菌与不含该质粒的鼠疫菌的蛋白图谱可识别的蛋白点均在500个以上，两者总体上相似性较高：前者较后者在大小约70×10^3、等电点5．O左右处，明显多一个蛋白点簇，该蛋白簇经质谱鉴定均为伴侣蛋白GroEL，但该蛋白并非是pYC质粒编码蛋白。结论pYC质粒对菌体蛋白质组有影响，其编码蛋白pYC_p10与pYC_p11，可能调控GroEL高表达。; 王鹏赵飞郭英苏鹏韦蝶心张建中董兴齐; 关键词：蛋白质组电泳凝胶

结核分枝杆菌广泛耐药株与耐多药株菌体蛋白质组学比较研究被引量：5: 2011年; 目的比较和分析结核分枝杆菌广泛耐药(XDR)与耐多药(MDR)菌株在菌体蛋白质表达水平上的差异,并寻找与XDR相关的蛋白质点。方法利用双向凝胶电泳分离XDR、MDR菌株以及H37Rv标准菌株菌体蛋白质,通过计算机图像分析软件分析各菌株之间在菌体蛋白质表达水平上的差异性,并进行质谱分析。结果 XDR与MDR以及H37Rv菌株之间在菌体蛋白质表达水平上存在明显差异;与XDR相关的28个差异(新增、缺失、上调、下调)表达的蛋白质点中,质谱分析鉴定出5个相关的蛋白质点。结论结核分枝杆菌XDR与MDR菌株在菌体蛋白质表达水平上存在明显差异,为进一步研究XDR菌株耐药机理奠定了基础。; 王盛兰陈玲张建勇宗兆靖王宝林李娜娜王建华张泓; 关键词：耐多药结核分枝杆菌蛋白质组学双向电泳质谱鉴定

伤寒沙门菌野生型与粗糙型菌体蛋白质的双向电泳分析与研究: 2006年; 了解伤寒沙门菌野生型与粗糙型菌株的菌体蛋白质组成特点，探讨伤寒沙门菌粗糙型变异的遗传学基础。分离提取伤寒沙门菌野生型与粗糙型菌株的菌体蛋白质，聚丙烯酰胺凝胶双向电泳（2D-PAGE）和考马斯亮蓝染色，计算机分析与比较两菌株的蛋白质组成特点及其相关性。伤寒沙门菌野生型与粗糙型具有相似的蛋白质电泳图谱，相似系数为78％。多数蛋白质斑点分布于pH3．0～6．4之间，并且分子量小于30kDa。两菌株的蛋白质电泳图谱之间的主要差异共计36处，多数差异蛋白质的分子量小于20kDa。伤寒沙门菌粗糙型与野生型菌体蛋白质组成的差异显示，粗糙型变异绝不仅仅是O抗原多糖的缺失，也可发生菌体蛋白质组成的改变与缺失。伤寒沙门菌粗糙型保留了同其亲代野生型菌株一致的绝大多数菌体蛋白质组成，在2D-PAGE中形成伤寒沙门菌特征性的基本蛋白质图谱，有助于对粗糙型菌株进行蛋白质分子同源性与变异性的分析与鉴别。; 康颖倩王和; 关键词：2D-PAGE 伤寒沙门菌粗糙型蛋白质图谱

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