公共文化服务平台

搜索到10693篇“ 荧光定量逆转录“的相关文章

布莱克韦尔虫草实时荧光定量逆转录PCR内参基因的筛选: 2025年; 【背景】实时荧光定量逆转录PCR(real-time quantitative reverse transcription PCR,RT-qPCR)常用于分析基因表达,但选择合适的内参基因,对分析结果的稳定性非常重要。布莱克韦尔虫草是一种具有开发价值的虫草,研究其功能基因表达具有重要意义。【目的】筛选获得布莱克韦尔虫草不同生长阶段(液体发酵菌丝体、小麦粒培养基菌丝体及子实体)最稳定的内参基因。【方法】选取8个候选内参基因(18S rRNA、gapdh、β-tubulin、cyclophilin A、γ-actin、rpl10、tef1α和ubiquitin),采用RT-qPCR技术进行扩增,结合geNorm、NormFinder、BestKeeper、ΔC_(t)等算法,评估这些基因在布莱克韦尔虫草不同生长发育阶段的表达稳定性。【结果】相比其他基因,γ-actin和18S rRNA在不同生长发育阶段的表达稳定性最好,可作为布莱克韦尔虫草基因表达分析的内参基因。【结论】本研究筛选出了布莱克韦尔虫草RT-qPCR的内参基因,为深入研究生长发育过程中的基因表达规律奠定了基础。; 李佳妮张姝张永杰; 关键词：内参基因 RT-QPCR

荧光定量逆转录聚合酶链式反应法在病原微生物检验中的应用研究: 2024年; 目的对荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法在病原微生物检验中的应用结果进行分析。方法回顾性分析我院检验科于2023年1月14日—2023年12月14日期间检验的7502份微生物检验资料,分别实施了常规RT-PCR法及荧光定量RT-PCR法检验,金标准为特殊染色镜检结果,分析两种检验结果的诊断效能等指标差异。结果(1)金标准检测出阴性、阳性占比为490∶7012,常规RT-PCR法检验结果为阴性、阳性为:479∶6358,荧光定量RT-PCR法检验阴性、阳性比为:488∶7010。(2)荧光定量RT-PCR法的灵敏度为99.97%、特异度为99.59%、准确度为99.95%,均高于常规RT-PCR法,有统计学意义(P<0.05)。(3)荧光定量RT-PCR法检验各类微生物检出率依次为99.91%、100.00%、100.00%、99.91%、100.00%、100.00%、99.97%,高于常规RT-PCR法,有统计学意义(P<0.05)。结论荧光定量RT-PCR法在病原微生物检验中诊断效能及各类微生物检出率高,能够为医生诊疗提供科学依据,可推行。; 郭金芳; 关键词：病原微生物支原体

猫杯状病毒实时荧光定量逆转录PCR检测方法的建立: 2024年; 为了建立可快速检测猫杯状病毒(FCV)的方法,本试验采用肽核酸(PNA)设计分子信标荧光探针,优化反应体系和条件,建立了FCV实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测方法,对该方法的敏感性、特异性和重复性进行验证,并进行临床样本检测。结果显示,建立的RT-qPCR检测FCV参考株具有良好的线性关系(R^(2)=0.9995),最低检测限为1×10^(2)TCID_(50)/mL,对其他相关病毒无有效响应,组内变异系数和组间变异系数均小于1%。应用该方法检测33份临床样本,阳性率为51.5%。由此可见,本试验建立的RT-qPCR敏感性、特异性和重复性均良好,可为FCV的早期快速诊断和疫病防控等提供检测手段。; 李静怡熊雷黄莉璎刘晓鹏杨盛奋金京勋王弋

加热灭活对荧光定量逆转录PCR检测新型冠状病毒RNA影响分析被引量：5: 2020年; 56℃处理30min能有效灭活新型冠状病毒(SARS-CoV-2)。但加热处理对后继的荧光定量RT-PCR检测有无影响尚未见报道。本研究使用已知SARS-CoV-2核酸检测阳性的5个咽拭子标本,各自分为4份:对照组、56℃30min、56℃45min和56℃60min处理组。热处理后提取核酸并使用荧光定量RT-PCR检测病毒RNA相对含量。结果显示,56℃处理30~60min会导致荧光定量RT-PCR检测病毒核酸降低40%左右。56℃30min、56℃45min和56℃60min处理组间检测结果无统计学差异(P>0.05)。本研究提示,SARS-CoV-2标本56℃30min灭活后,再进行核酸提取和荧光定量RT-PCR检测,能更好地保护实验操作过程中人员和环境的安全。加热灭活对荧光定量RT-PCR检测结果的影响有限,但对于结果在临界值附近的标本应慎重使用。; 叶慧叶恒平马肖秦义组李涛柴瑜

一步法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测人miR-1290的试剂盒: 本发明为一种实时荧光定量RT‑PCR检测人miR‑1290试剂盒，该试剂盒以总mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人miR‑1...; 程媛

一步法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测人上皮细胞粘附分子的试剂盒: 本发明为一种实时荧光定量RT‑PCR检测人上皮细胞粘附分子试剂盒，该试剂盒以mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人上皮细胞粘附...; 不公告发明人

一步法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测人基质金属蛋白酶11的试剂盒: 本发明为一种实时荧光定量RT‑PCR检测人基质金属蛋白酶11的试剂盒，该试剂盒以mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人基质金属...; 邓结飞杨培浩其他发明人请求不公开姓名

一步法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测人基质金属蛋白酶1的试剂盒: 本发明为一种实时荧光定量RT‑PCR检测人基质金属蛋白酶1的试剂盒，该试剂盒以mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人基质金属蛋...; 邓结飞杨培浩其他发明人请求不公开姓名

一步法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测人细胞角蛋白7的试剂盒: 本发明为一种一步法实时荧光定量RT‑PCR检测人细胞角蛋白7 试剂盒，该试剂盒以mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人细胞角蛋...; 不公告发明人

应用荧光定量逆转录PCR检测HAV在2BS细胞中的增殖动态: 2017年; 目的利用荧光定量逆转录PCR（fluorescent quantitative reverse transcriptase PCR，qPCR）技术，从病毒基因组RNA复制水平研究HAV在2BS细胞中的增殖动态。方法根据HAV基因组保守区序列设计引物和探针，构建重组HAV质粒作为工作标准品，建立检测HAV的qPCR法，并验证该法的灵敏度、特异性和重复性。同时用HAV病毒液感染2BS细胞，于感染后不同时间收病毒液，应用该法检测HAV cDNA。结果该法在重组HAV质粒标准品为2.6×（10^1～10^7）拷贝/μl时具有良好的扩增曲线，检测灵敏度为2.6×10^1 拷贝/μl DNA质粒。该法可特异性检测HAV cDNA，且重复性良好，实验内和实验间对不同浓度的重组HAV质粒各检测3次获得的域值循环的变异系数分别为0.23%-1.41%和0.34%-4.82%。应用该法检测HAV在2BS细胞中的增殖显示，感染后6 d HAV开始增殖，感染后14-21 d HAV含量达到最高峰，并一直持续到第28天。结论建立的方法具有良好的灵敏度、特异性和重复性，可用于实时监测甲型肝炎疫苗生产过程中的HAV增殖动态。; 夏青娟周延彬徐艳玲张晶李树生徐国亮李海燕邵燕于海龙侯丽娟; 关键词：逆转录聚合酶链反应病毒培养

相关作者