搜索到19713篇“ 脂质体转染法“的相关文章
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- 王辰
- 文献传递
- 电穿孔与脂质体转染法对悬浮与贴壁细胞转染效率的影响
- 2018年
- 目的比较电穿孔与脂质体转染法对悬浮细胞株K562与贴壁细胞株Hep G2转染率的检测效果。方法选取人髓系白血病细胞株K562及人肝癌细胞株Hep G2进行研究,分别应用电穿孔与脂质体转染法进行绿色荧光质粒(p EGFP-C1)基因转染,采用荧光显微镜对PEGFP-C1转染情况进行观察,并对不同方法的转染率及细胞转染后存活率进行计算和比较。结果电穿孔转染法转染率与细胞转染后存活率优于脂质体转染法(P<0.05)。结论相比脂质体转染法,电穿孔转染法的基因转染率更高,因此该种方式值得在科研实验中进行推广。
- 张妍乐顾玲
- 关键词:脂质体转染法HEP
- 脂质体转染法与电转染法在丙型肝炎病毒RNA转染人肝癌细胞中的应用效果比较被引量:11
- 2016年
- 目的:比较脂质体转染法与电转染法在丙型肝炎病毒( HCV ) RNA转染人肝癌细胞中的应用效果。方法培养人肝癌细胞Huh7.5-CD81并分为A、B组及对照组。 A组采用电转染质粒pHebei(E1E2)/JFH1来源的HCV RNA;B组采用脂质体转染质粒pHebei(E1E2)/JFH1来源的HCV RNA;对照组采用脂质体转染复制缺陷质粒pJFH1/GND转录获得的HCV RNA。光学显微镜下观察各组转染后细胞形态,采用免疫荧光法( IFA)检测三组转染效率,real-time PCR法检测三组细胞培养液上清中的HCV RNA,采用TCID50法检测A、B组细胞培养液上清中的丙型肝炎病毒(HCVcc)感染滴度。结果 A组转染使用细胞数为1×106,转染后第2天细胞损伤过半,边缘毛糙;B组转染使用细胞数为2×105,转染后第2天细胞基本无损伤。 A组转染效率为9.98%±0.83%,B组转染效率为2.58%±0.39%,两组转染效率相比,P<0.01;对照组未检出荧光阳性细胞。 A、B组转染后细胞培养液上清中HCV RNA拷贝数均呈现先下降后升高的趋势,最终稳定于106 copies/mL。 A组转染后21 d、B组转染后31 d方能检测到HCV感染滴度,A、B组收获HCV最高感染滴度均为104 ffu/mL。结论脂质体转染和电转染两种方法均可建立嵌合HCV的人肝癌细胞培养体系,脂质体转染法对细胞的损伤较小,电转染法转染效率较高、收获HCVcc的时间较短,但两种方法收获的HCVcc感染滴度无明显差异。
- 卢莎谭文杰张玲邓瑶陶格斯蔡敏李恋沈晓玲
- 关键词:丙型肝炎病毒电穿孔脂质体RNA转染
- 电穿孔转染法与脂质体转染法对K562和HepG2细胞转染效率的影响被引量:8
- 2015年
- 目的通过对电穿孔转染法和脂质体转染法在K562、HepG2细胞中的转染效率比较,探索最佳的细胞转染方法和条件。方法以K562、Hep G2细胞为研究对象,采用电穿孔转染法和脂质体转染法分别转染带有绿色荧光的质粒PEGFP-N1和无荧光的质粒p CDNA3.1、p CDNA3.1-EOS基因,荧光显微镜下观察PEGFP-N1转染效果,计算转染效率;收集各培养组细胞,裂解后提取蛋白,采用Western blot方法检测基因转染后的蛋白表达。结果当脉冲20 ms、电阻90Ω、电压150 V时进行电穿孔,转染质粒PEGFP-N1,K562细胞可以得到较高的转染率;当脉冲20 ms、电阻90Ω、电压250 V时,转染质粒PEGFP-N1,Hep G2细胞可以得到较高的转染效率。在K562细胞和Hep G2细胞中,电穿孔转染法的转染效率均显著高于脂质体转染法(P<0.05)。电穿孔转染法转染PEGFP-N1后K562细胞和Hep G2细胞的存活率显著低于脂质体法(P<0.05)。Western blot结果显示电穿孔转染法蛋白表达量高于脂质体转染法(P<0.05)。结论最佳条件下电穿孔转染法是一种高效的基因转染方法,对比较难转染的悬浮细胞效果更佳。
- 隋娟张高丽李平法于海川
- 关键词:电穿孔脂质体转染K562细胞
- 基因导入的脂质体转染法和磷酸钙转染法之比较被引量:19
- 2000年
- 将外源基因导入真核细胞的方法很多。我们通过对绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因在真核细胞中表达的研究 ,比较了较常用的两种方法—脂质体转染法和磷酸钙转染法。研究结果表明 :脂质体转染法的转染效率较磷酸钙转染法高 ,且简单易行 ,是外源基因导入体外培养细胞内较理想的方法。
- 李华刘维全王太一殷震
- 关键词:脂质体转染法体外培养细胞转染效率报告基因
- 一种永生化山羊胎盘滋养层细胞系及其构建方法
- 本发明公开了一种永生化山羊胎盘滋养层细胞系及其构建方法,涉及细胞工程技术领域。该构建方法包括以下步骤:用组织块培养法分离培养得到原代山羊胎盘滋养层细胞;将真核表达质粒pCI‑neo‑hTERT导入该原代山羊胎盘滋养层细胞...
- 刘菲李婷杜锐李健明向文韬向梅梅于佳宇张一凡姜秋池
- 针对LPA基因的sgRNA、重组表达载体及方法
- 本申请提供了针对LPA基因的sgRNA、重组表达载体及方法,属于基因工程技术领域。本申请提供的靶向编辑LPA基因的sgRNA,其核苷酸序列选自如SEQ ID No.5、SEQ ID No.6、SEQ ID No.7、SE...
- 董建增方光明郑诗悦高诗娟杜杰李玉琳杜昕马长生
- 靶向敲除LPA基因的sgRNA、重组表达载体及敲除LPA基因的方法
- 本申请提供了靶向敲除LPA基因的sgRNA、重组表达载体及敲除LPA基因的方法,涉及基因工程技术领域。本申请提供的靶向敲除LPA基因的sgRNA,其核苷酸序列选自如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ...
- 董建增郑诗悦方光明杜昕杜杰高诗娟李玉琳马长生
- 弓形虫ROP9基因和MIC3基因重组腺病毒构建的方法及重组腺病毒和应用
- 本发明公开了一种弓形虫ROP9(棒状体蛋白9)基因和MIC3(微线体蛋白3)基因重组腺病毒构建的方法及重组腺病毒和应用。从Toxoplasma gondii RH株中分别扩增出ROP9基因和MIC3基因,将获得的目的基因...
- 陈启军张东超姜宁
- 文献传递
- 弓形虫SAG2基因和MIC3基因重组腺病毒构建的方法及重组腺病毒和应用
- 本发明公开了一种弓形虫SAG2(表面抗原2)基因和MIC3(微线体蛋白3)基因重组腺病毒构建的方法及重组腺病毒和应用。从Toxoplasma gondii RH株中分别扩增出SAG2基因和MIC3基因,将获得的目的基因克...
- 陈启军张东超姜宁
- 文献传递
相关作者
- 姜宁

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- 陈启军

- 作品数:63被引量:87H指数:5
- 供职机构:沈阳农业大学
- 研究主题:弓形虫 穿梭质粒 穿梭载体 细粒棘球蚴病 重组腺病毒
- 林静

- 作品数:24被引量:39H指数:3
- 供职机构:天津农学院
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- 李小慧

- 作品数:29被引量:46H指数:4
- 供职机构:天津农学院
- 研究主题:重组腺病毒 穿梭载体 穿梭质粒 脂质体转染法 药敏试验
- 金天明

- 作品数:162被引量:246H指数:8
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