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橡胶树热垦525胚性悬浮细胞系的建立及其胚性能力的维持: 2024年; 易碎胚性愈伤组织和胚性悬浮细胞系都是基因工程和细胞工程的理想受体材料。然而橡胶树(Hevea brasil-iensis)易碎胚性愈伤组织诱导频率低、耗时长,且其胚性能力通常随继代次数的增加而下降甚至完全丧失,限制了相关研究的持续开展。因此,快速获得易碎胚性愈伤组织,建立具有高效体胚发生能力的胚性悬浮细胞系,并尽可能较长时间维持其胚性能力是当前橡胶树基因工程和细胞工程研究的重要内容。本研究以橡胶树热垦525未成熟花药为外植体进行愈伤组织的诱导和胚性悬浮细胞系的建立,分析比较固液2种长期继代方式对维持其胚性能力的影响。结果表明:花药外植体在愈伤诱导培养基中获得的黄色致密初代愈伤组织体胚发生能力低,分散性差,不适合进行悬浮培养。将初代愈伤组织转移至胚性愈伤组织诱导培养基中培养70~80 d后,可观察到有胚性结构的形成和早期体细胞胚发生,同时周围长出鲜黄色小颗粒状易碎胚性愈伤组织。通过常规方法建立的Ⅰ型胚性悬浮细胞系具备胚性细胞的典型特征,体胚发生能力显著高于胚性愈伤组织,但在体胚发生过程中容易重新愈伤化;而通过筛选特定形态的胚性愈伤组织低密度启动悬浮培养建立的Ⅱ型胚性悬浮细胞系,在显微镜下可观察到细胞处在有序的胚性结构中,其体胚发生频率可达100%。在含2 mg/L2,4-D的液体培养中持续继代2 a后细胞明显老化且增殖缓慢,体胚发生能力几近丧失;而在去除2,4-D并添加低浓度脱落酸(0.1 mg/L)和水解酪蛋白(0.5 g/L)的固体培养基上持续继代2 a后,体胚发生能力仍能维持在较高水平。所建立的Ⅱ型胚性悬浮细胞系可为橡胶树遗传转化及原生质体培养等相关研究长期提供优质充足且状态相对稳定的材料来源。; 戴雪梅彭素娜成镜顾晓川黄天带; 关键词：橡胶树胚性悬浮细胞系体胚发生

模式籼稻品种Kasalath转基因胚性悬浮细胞系的建立: 2019年; Kasalath是一种公认的组培再生性优异的模式籼稻品种。为建立具有G418抗性的Kasalath悬浮细胞系,通过农杆菌转化法获得转入G418抗性基因和GUS报告基因的Kasalath愈伤组织,然后利用获得的胚性转基因愈伤在NBL培养基中进行初步悬浮培养,后转至AA培养基进行终培养,在继代过程中通过持续的小颗粒愈伤筛选最终建立了Kasalath转基因悬浮细胞系;本研究获得的悬浮细胞系分散性良好,增值快(10 d可增殖约3.8倍),而且可从悬浮细胞中分离到高活性的原生质体,分离效率可达6.3×107个原生质体每毫升自然沉降细胞。本研究展示了Kasalath是一种建立悬浮细胞系的优良材料,为进一步进行栽培稻和野生稻的原生质体融合提供依据,建立的悬浮细胞系亦可用于生理生化研究或供分离原生质体以进行蛋白质亚细胞定位等试验。; 龙起樟黄永兰唐秀英王会民芦明袁林峰蔡耀辉万建林; 关键词：籼稻悬浮细胞系原生质体转基因

郑麦9023胚性悬浮细胞系的建立和植株再生被引量：2: 2018年; 为建立高效稳定的小麦遗传转化体系,以小麦郑麦9023的幼胚为外植体诱导愈伤组织,研究了培养基中不同质量浓度2,4-D、KT对愈伤组织诱导和愈伤组织继代培养的影响,进而完成整个植株再生的进程。结果表明:以小麦郑麦9023的幼胚作为外植体来诱导愈伤组织,诱导效果最好的培养基是含有3.0 mg/L 2,4-D的MS培养基,出愈率最高达92.5%;愈伤组织进行继代培养的最佳培养基是含有1.0 mg/L 2,4-D和0.1 mg/L KT的MS培养基;最佳的悬浮培养基是含有1.0 mg/L 2,4-D和0.1 mg/L KT的MS培养基;最佳的悬浮系继代时间为16 d;悬浮系中的成熟胚在基本培养基上可以发育成正常的植株。所建立的悬浮系可以用来进行小麦基因工程遗传改良和体细胞无性系突变体的筛选。; 李冬兵吕桂珍牛洪斌尹钧; 关键词：小麦郑麦9023 胚性悬浮细胞系植株再生

香蕉胚性悬浮细胞系建立过程中非胚性成分的去除: 2013年; [目的]研究香蕉胚性悬浮细胞系建立过程中非胚性成分的去除方法.[方法]以巴西蕉的花蕾进行诱导培养后,运用孔径在250～ 500 μm的不锈铜筛网进行过滤,并用倒置显微镜对培养物进行实时观测.[结果]运用孔径在250～500 μm的不锈钢筛网能够有效去除悬浮细胞系中的褐化坏死组织和分生组织小球,但如果在悬浮细胞系诱导后3d立即进行去除,则易使之后胚性细胞的增殖变得困难;如果在悬浮细胞系诱导后14 d左右去除,则褐化坏死组织释放的酚类物质很容易损伤并杀死正在增殖的胚性细胞.悬浮细胞系诱发后7d是一个比较恰当的过滤去除时间点.[结论]在培养的过程中,将悬浮细胞系定期放置在倒置显微镜下进行观察,用移液器能将液泡化的细胞和胚去除.在操作前,需将倒置显微镜放置在超净工作台内,用紫外线长时间照射进行表面灭菌.这样即可以将悬浮细胞系中的非胚性成分过滤去除,又能预防感染.; 常胜合徐立李敬阳孙威王甲水许桂莺孙佩光吴琼金志强舒海燕; 关键词：香蕉胚性悬浮细胞系

水稻类病变突变体spl5胚性悬浮细胞系的构建被引量：1: 2013年; 类病变突变体(lesion mimic mutant)是一类研究细胞死亡与抗病机制的有效工具。试验以水稻类病变突变体spl5为材料,构建了spl5突变体的胚性悬浮细胞系。结果表明诱导spl5突变体愈伤组织的最佳2,4-D浓度为2 mg·L-1,疏松的Ⅱ型胚性愈伤组织经悬浮继代培养3～4个月后可获得理想的胚性悬浮细胞系,FDA-PI染色结果表明该细胞悬浮体系活力高。水稻类病变突变体spl5胚性悬浮细胞系的建立可为进一步研究spl5突变体细胞死亡及其与病原菌互作的机制奠定基础。; 金杨王月于诗莹陈析丰马伯军; 关键词：水稻悬浮细胞系

半夏胚性悬浮细胞系的建立: 目的:以半夏的叶柄和叶片为外植体进行组织培养,寻找适宜诱导胚性愈伤组织的激素配比。方法:采用单因素实验和多因素的正交实验。通过单因素实验,考察单个因素-6-BA、NAA和2,4-D对半夏愈伤的诱导效果;通过4因素3水平的...; 刘鑫欣崔晓星刘金欣孟繁蕴魏英勤; 关键词：半夏激素; 文献传递

高羊茅胚性悬浮细胞系的快速建立及其单细胞培养被引量：1: 2009年; 本研究采用高羊茅(Millennium和Hundog Ⅴ)成熟种子为材料,以MS为基本培养基,通过添加2.5 mg/L Cu-SO4.5H2O,或提高NH4NO3浓度至2.5 g/L等措施均能明显提高愈伤组织的质量,经过3～5个月的筛选获得疏松干燥、颗粒状、生长旺盛、适合悬浮培养的Ⅱ型胚性愈伤组织。悬浮培养初期需用MSⅠ液体培养基进行一个月的启动培养,之后转用MSⅡ继代保持,约2个月左右即建立起来自高羊茅2个品种的3个悬浮细胞系。生长特性测定结果表明,悬浮培养的初始接种量以1.0～3.0 ml/40 ml为宜,生长周期内其pH值不断波动变化,最适范围在5.0～5.7之间。5～8 d为悬浮系的对数生长期,此时细胞分裂旺盛,增殖较快,是分离单细胞的最佳时期。单细胞培养方式以悬浮培养效果最好。; 杨帆杨帆; 关键词：愈伤组织胚性悬浮细胞单细胞培养高羊茅

‘霞多丽’胚性悬浮细胞系和遗传转化体系的初步建立: 我国栽培葡萄大多属于欧洲葡萄(vitis viniferaL.)丰产、优质,对各种自然灾害的抗性较差。利用转基因技术获得抗性品种是葡萄生物技术育种的重要手段之一。目前葡萄基因工程研究进展缓慢,高效再生和遗传; 刘伟李希东高超侯丽霞刘新; 关键词：胚性悬浮细胞农杆菌乙酰丁香酮; 文献传递

水稻香系103成熟胚培养及胚性悬浮细胞系的建立: 2009年; [目的]为优质稻米种苗培育及种质资源保护提供参考。[方法]以曲阜香稻新品系103的成熟种子为材料，取其成熟胚接种在MS1培养基中诱导胚性愈伤组织，选取松脆性胚性愈伤组织建立悬浮细胞系。[结果]初始愈伤组织呈深黄色、瘤状、质地紧密、生长旺盛、易分化出芽，但难以进行细胞悬浮培养；在MS2培养基中继代培养120d后，愈伤组织呈浅黄色、颗粒状、松脆型胚性愈伤组织；松脆型胚性愈伤组织在悬浮培养基中继代培养2～3次后，不断释放出小细胞团和单细胞，用300目不锈钢网对培养液进行过滤，滤液培养120d可建立起浅黄色、澄清、均一的胚性悬浮细胞系。[结论]建立了分散性好、生长快的水稻胚性悬浮细胞系。; 朱道玉王旭英; 关键词：香稻胚性愈伤组织悬浮细胞系

疣粒野生稻胚性悬浮细胞系的建立及其原生质体的培养和植株再生被引量：7: 2008年; 云南疣粒野生稻的成熟种子经55℃温度处理3 d打破休眠后,在诱导培养基上诱导出愈伤组织。挑选胚性愈伤组织置于液体培养基中振荡培养,经3个月的继代培养,建立胚性细胞悬浮系。悬浮细胞经酶解、去壁后获得大量原生质体,固体包埋后添加液体培养基进行原生质体培养。在培养过程中调节培养体系的渗透压,获得小愈伤组织;经增殖后在分化培养基上诱导产生胚状体,成功得到疣粒野生稻的原生质体再生植株。; 蔺忠龙白现广吕广磊李维薇殷富有黄兴奇程在全; 关键词：疣粒野生稻原生质体植株再生

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