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基于荧光反转录聚合酶链反应检测的诺如病毒暴发疫情调查
2025年
使用荧光反转录聚合酶链反应检测方法,对采集标本进行诺如病毒检测。首先对某局部人群按照病例定义开展诺如病毒暴发疫情病例搜索,用描述性流行病学和病例对照研究进行分析,然后采用χ^(2)检验对不同组别罹患率进行分析。本次疫情累计病例28例,罹患率11.2%(28/250),主要临床症状为腹泻和腹痛,疫情历时6 d,男性罹患率高于女性罹患率(χ^(2)=7.47,P<0.01),病例对照研究表明靠近患者呕吐物(≦1 m)增加发病风险(OR=7.50,95%CI:2.181~25.795),使用洗手液或者肥皂洗手降低发病风险(OR=0.28,95%CI:0.090~0.893)。实验室检测结果显示7份病例肛拭子诺如病毒GⅡ阳性。本次局部疫情为GⅡ型诺如病毒感染引起的暴发疫情,近距离暴露于患者呕吐物是引起本次疫情扩散的可能原因。
黄彬彬张栗昝望程思宇
关键词:诺如病毒聚合酶链反应暴发疫情
荧光定量聚合酶链反应检测脑脊液中结核分枝杆菌DNA对鉴别诊断结核性脑膜炎的应用价值分析
2024年
目的 探究荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测脑脊液中结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)DNA对鉴别诊断结核性脑膜炎(tuberculous meningitis,TBM)的应用价值。方法 选择2019年7月—2021年6月于安陆市普爱医院就诊的存在脑膜刺激征的80例患者作为研究对象,所有患者均经MTB培养后明确诊断,将确诊为TBM的37例患者分入脑膜炎组,疑似TBM的18例患者分入疑似组,非TBM的25例患者分入非TBM组,对3组患者行腰椎穿刺,留取5 m L脑脊液及时送检,分别行MTB培养法、抗酸染色涂片法、荧光定量PCR检测。对比3种检测方法在MTB中的阳性检出率,对比脑膜炎组与疑似组患者MTB的DNA检测数值。结果 脑膜炎组应用荧光定量PCR检测MTB的阳性检出率高于疑似组,差异有统计学意义(P<0.05);脑膜炎组与疑似组采用MTB培养法、抗酸染色涂片法的MTB阳性检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。脑膜炎组患者MTB的DNA检测数值为(4.71±0.97),疑似组患者MTB的DNA检测数值为(4.35±0.83),2组患者MTB的DNA检测值比较,差异无统计学意义(t=1.351,P=0.183)。结论 应用荧光定量PCR检测脑脊液中MTB的DNA,有助于判断TBM患者病情严重程度,在鉴别诊断TBM中具有较高的临床应用价值,为临床诊疗提供新思路及方向,值得临床推广应用。
周冬梅王洲
关键词:结核性脑膜炎脑脊液结核分枝杆菌荧光定量聚合酶链反应
急性腹泻患儿粪便诺如病毒GⅠ/GⅡ型时荧光反转录-聚合酶链反应检测结果的分析
2024年
目的分析急性腹泻患儿粪便诺如病毒GⅠ/GⅡ型实时荧光反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测结果。方法选择2023年1月至2024年1月南昌大学第一附属医院赣江新区医院急性腹泻患儿150例,均采用实时荧光RT-PCR技术检测粪便样本诺如病毒GⅠ/GⅡ型,并对检测结果进行统计分析。比较不同特征急性腹泻患儿诺如病毒阳性率、不同年龄段诺如病毒阳性与阴性病例症状、不同年龄段及发病季节诺如病毒阳性患儿基因型分布情况。结果150例急性腹泻患儿的150份粪便样本中共检出诺如病毒阳性42份(28.00%);不同性别、户籍患儿诺如病毒阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);春、冬季诺如病毒阳性率高于夏、秋季,差异有统计学意义(P<0.05);<1岁急性腹泻患儿诺如病毒阳性率高于1~5岁、6~12岁患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。<1岁急性腹泻患儿中,诺如病毒阳性病例呕吐、腹泻<5次/d占比高于阴性,差异有统计学意义(P<0.05);1~5岁、6~12岁急性腹泻患儿中,诺如病毒阳性与阴性病例发热、呕吐、腹泻症状比较,差异无统计学意义(P>0.05);急性腹泻诺如病毒阳性患儿中,包括GⅠ型3例(7.14%)、GⅡ型38例(90.48%)、GⅠ/GⅡ混合型1例(2.38%);与其他年龄段比较,6~12岁GⅠ型占比(25.00%)较高;与春、冬季比较,夏、秋季GⅠ型占比(16.67%、20.00%)较高,春、冬季GⅡ型占比(100.00%、91.30%)较高。结论南昌市西湖区急性腹泻患儿诺如病毒阳性率较高,以GⅡ型为主,且好发于<1岁患儿及春季与冬季。
余希甘燕霞刘珂
关键词:粪便诺如病毒反转录-聚合酶链反应
脑脊液多重聚合酶链反应检测对社区获得性细菌性脑膜炎病原诊断价值Meta分析被引量:1
2024年
目的系统评价脑脊液多重聚合酶链反应(mPCR)检测对社区获得性细菌性脑膜炎(CABM)病原诊断的诊断价值。方法2021年9月首都医科大学附属北京儿童医院感染内科按检索策略通过计算机检索万方、Sinomed、Pubmed、CochraneLibrary、Embase数据库,获得mPCR对CABM的诊断价值的相关文献,检索时间为建库至2021年9月。由2名研究者独立进行文献筛选、质量评价和数据提取。采用Stata11.0软件进行Meta分析,计算合并灵敏度、特异度、阳性似然比、阴性似然比和诊断优势比,绘制综合受试者工作特征(SROC)曲线,并计算曲线下面积(AUC)。根据研究类型、病原菌种类及患者群进行亚组分析,通过逐一剔除法进行敏感性分析,采用Deeks漏斗图法进行发表偏倚的评估。结果共检索出279篇文献,最终纳入19篇文献共计4679例患者。Meta分析结果显示,脑脊液mPCR检测可提升0.89%~49.51%的细菌培养病原阳性率,合并灵敏度和特异度分别为0.91(95%CI0.75~0.97)和0.88(95%CI0.78~0.94),阳性似然比和阴性似然比为7.7(95%CI 3.9~15.2)和0.11(95%CI0.04~0.31),诊断优势比为72(95%CI 18~295),AUC为0.95(95%CI0.93~0.97)。亚组分析结果显示脑脊液mPCR检测对CABM三种常见病原体(肺炎球菌、脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌)及儿童人群均具有较高的诊断效能。敏感性分析表明本研究结果稳定可信。结论脑脊液mPCR检测对CABM病原诊断具有较高的诊断效能,可作为CABM病原诊断的辅助方法。
李奕萱郭凌云高程凤聂晓璐刘钢
关键词:多重聚合酶链反应META分析
实时荧光聚合酶链反应检测新型冠状病毒室内质控方法初探被引量:1
2023年
目的绘制实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)定性室内质控图和基于循环阈值的Levey-Jennings质控图,探究新型冠状病毒RT-PCR检测的室内质控方法。方法使用无菌生理盐水按照1∶5、1∶10、1∶20、1∶30、1∶40对第三方质控物进行倍比稀释,确定室内弱阳性质控的稀释倍数。统计该实验室2022年1-2月新型冠状病毒RT-PCR阴阳性质控原始记录,以自定义数值绘制定性结果散点图。统计2022年1-2月每批次弱阳性质控的靶基因Ct值,分别对N基因和ORF1ab基因两组Ct值进行正态分布检验,根据前20次检测结果分别计算N基因和ORF1ab基因的靶值X和标准差s,绘制Levey-Jennings质控图。结果确定1∶30为每日室内质控的弱阳性质控品的稀释倍数。定性检测散点图可直观发现1次弱阳性质控检出阴性的“假阴性”反应。弱阳性质控N基因、ORF1ab基因Ct值均符合正态分布(P>0.05)。N基因Ct值靶值X为34.13,变异系数为1.91%,所有Ct值均在X±3 s以内,5次出现±2 s警告,符合Westgard质控规则。ORF1ab基因Ct值靶值为35.30,变异系数为2.58%,出现1次+3 s失控,5次±2 s警告,第31~41批次违反了10x规则,第73~80批次违反了R 4s规则。结论应用定性室内质控散点图和Levey-Jennings质控图建立的新型冠状病毒室内质控方法具有可行性,能够有效监测和预警检测过程中的质量问题,保证检测结果准确可靠。
刘晶杜晶辉刘瑞岩鲍志军贺鑫赵岩王俊雷曜荣刘旭
关键词:新型冠状病毒室内质控CT值实时荧光聚合酶链反应
粪便样本溶组织内阿米巴、蓝氏贾第鞭毛虫双重TaqMan实时荧光聚合酶链反应检测方法的建立被引量:1
2023年
目的探讨同时检测溶组织内阿米巴和蓝氏贾第鞭毛虫的双重TaqMan实时荧光聚合酶链反应(real-time fluorescent polymerase chain reaction,RT-PCR)方法。方法设计针对溶组织内阿米巴和蓝氏贾第鞭毛虫的引物对和探针,建立双重TaqMan RT-PCR的扩增体系,将PCR扩增产物序列导入pUC57质粒,测定方法的最低检测限,并通过临床粪便样本对该方法进行初步评价。结果本研究建立的双重TaqMan RT-PCR法对溶组织内阿米巴最低检测限为31.6 copies/μL,蓝氏贾第鞭毛虫最低检测限为32.0 copies/μL。总共纳入212例临床粪便样本,3例溶组织内阿米巴镜检阳性患者样本PCR扩增结果均为阳性,209例溶组织内阿米巴镜检阴性的患者样本1例PCR扩增结果阳性,其余为阴性。8例蓝氏贾第鞭毛虫涂片镜检阳性样本PCR扩增结果均阳性,204例蓝氏贾第鞭毛虫镜检阴性患者样本中1例PCR扩增结果为阳性,其余为阴性。通过扩增产物测序和Blast分析确定了镜检阴性PCR阳性患者样本中扩增序列属于目标病原体,且临床症状以及实验室检查结果也支持该诊断。其他致腹泻病原体PCR扩增结果阴性,不存在交叉反应。结论建立的双重TaqMan RT-PCR方法不仅可以检测出溶组织内阿米巴及蓝氏贾第鞭毛虫镜检阳性样本,还能检出两者镜检漏检的样本,敏感度高于镜检法。并且与其他腹泻病原体包括布氏嗜碘阿米巴、人芽囊原虫、邻单胞菌、气单胞菌、沙门氏菌、痢疾志贺菌菌株、球虫以及哈门氏内阿米巴不存在交叉反应,具有较好的特异性。
敖科萍孟妍明袁余张春莹马莹
关键词:溶组织内阿米巴蓝氏贾第鞭毛虫
聚合酶链反应检测分析装置(全自动)
1.本外观设计产品的名称:聚合酶链反应检测分析装置(全自动)。;2.本外观设计产品的用途:用于对核酸样本进行核酸提取、扩增和检测,并对检测结果进行显示。;3.本外观设计产品的设计要点:在于形状。;4.最能表明设计要点的图...
韩亚平 顾城玮 徐建栋
抗酸染色和荧光定量聚合酶链反应检测对结核病的诊断价值被引量:6
2022年
目的比较抗酸染色和荧光定量聚合酶链反应(PCR)对结核病的诊断价值。方法选择2019年11月至2020年11月在医院开展检查的100例疑似肺结核患者的痰液样本作为研究样本,对所有痰液样本均分别实施抗酸染色与荧光定量PCR检测,并以结核分枝杆菌培养结果为判断肺结核阳性的主要标准,统计全部患者的结核分枝杆菌培养结果,分析抗酸染色和荧光定量PCR检测的检出情况,比较两种检测方式的阳性检出率及诊断效能。结果结核分枝杆菌培养结果显示,100例疑似肺结核患者中,肺结核阳性90例(90.00%)、阴性10例(10.00%)。抗酸染色检测结果显示,肺结核阳性58例、阴性42例;荧光定量PCR检测结果显示,肺结核阳性86例、阴性14例。抗酸染色检测的阳性检出率为58.00%,低于荧光定量PCR检测的86.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。抗酸染色与荧光定量PCR检测的诊断灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为61.11%、70.00%、94.83%、16.67%、62.00%及94.44%、90.00%、98.84%、64.29%、94.00%;荧光定量PCR检测的诊断灵敏度、阴性预测值及准确度均高于抗酸染色检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论荧光定量PCR检测能够提升对肺结核的阳性检出率及诊断效能,为疾病早期诊断及开展个性化治疗提供参考依据。
黎钰凤
关键词:荧光定量聚合酶链反应抗酸染色阳性检出率
甲醛固定石蜡包埋切片经特殊染色后荧光定量聚合酶链反应检测的再利用被引量:1
2022年
结核病是由结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的特异性炎症,在甲醛固定石蜡包埋组织切片中查见MTB是确诊结核的“金标准”。目前,结核病诊断的主要辅助检测方法是特殊染色和qRT-PCR检测。在临床病理诊断中,部分结核病患者由于获取标本困难,穿刺标本微小,病理组织多被用于HE染色、特殊染色,所剩组织太少无法进行相关分子检测
魏雪叶胜兵章如松夏秋媛饶秋马恒辉吴楠
关键词:特殊染色石蜡包埋切片临床病理诊断荧光定量聚合酶链反应甲醛固定特异性炎症
通过配体靶向聚合酶链反应检测叶酸受体阳性循环肿瘤细胞在鼻咽癌的临床意义
目的  叶酸受体阳性循环肿瘤细胞(FR+CTC)在许多实体瘤的诊断和动态监测中显示出重要作用。然而,FR+CTC在鼻咽癌(NPC)中的应用仍不清楚。本研究旨在探讨配体靶向聚合酶链反应(LT-PCR)这一新型检测技术在NP...
王鼎屹
关键词:鼻咽癌叶酸受体

相关作者

邓君
作品数:159被引量:474H指数:10
供职机构:四川省人民医院
研究主题:乳腺癌诊断 荧光定量聚合酶链反应 乳腺癌 碱性磷酸酶同工酶 CK19
郎振为
作品数:267被引量:972H指数:15
供职机构:北京地坛医院
研究主题:肝组织 免疫组织化学 乙型肝炎病毒 免疫组化 慢性乙型肝炎
董学君
作品数:172被引量:397H指数:10
供职机构:绍兴市人民医院
研究主题:乳腺癌 肝细胞 聚合酶链反应 外周血 肿瘤标志物
张红河
作品数:76被引量:155H指数:7
供职机构:浙江大学
研究主题:聚合酶链反应检测 鲍曼不动杆菌 实时荧光 结直肠癌 寡核苷酸芯片
董晓勤
作品数:80被引量:420H指数:11
供职机构:杭州市第一人民医院
研究主题:耐药性 鲍曼不动杆菌 肺炎链球菌 耐药基因 耐药性分析