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绵羊腺瘤病毒致病机制研究进展被引量:1
2024年
绵羊腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)是绵羊腺瘤(Ovine pulmonary adenomatosis,OPA)的病原,属于反转录病毒科,正反转录病毒亚科,β反转录病毒属,作为致癌性反转录病毒可引起绵羊发生不可逆的慢性传染性肿瘤疾病。JSRV的癌基因env所编码的囊膜蛋白(Envelope,Env)诱导多种类型的细胞发生恶性转化及体内肿瘤生成。OPA常被视为人鳞屑样生长型腺癌(Lepidic predominant adenocarcinoma,LPA)研究的理想模型。本文针对JSRV相关致病机制的最新热点研究展开综述。
段续接张培刘淑英
关键词:绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白肿瘤生成致病机制
绵羊腺瘤病毒CA、SU蛋白多克隆抗体制备及初步应用
绵羊腺瘤病(Ovine pulmonary adenomatosis,OPA)是由绵羊腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)引起的一种慢性、接触传染性肿瘤疾病。JSRV的结构基...
苗佳佳
关键词:绵羊肺腺瘤病毒多克隆抗体制备原核表达衣壳蛋白表面蛋白
自然感染绵羊腺瘤病毒组织线粒体自噬分子表达分析被引量:3
2024年
为分析自然感染绵羊腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)羊组织中线粒体的质量及自噬相关蛋白表达的变化,本研究将自然感染JSRV羊的组织作为研究对象,利用病理组织学、PCR和免疫组化法对自然感染JSRV羊组织进行鉴定。利用透射电镜技术观察病羊组织中线粒体形态结构变化,分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法(WB)检测感染组羊组织中线粒体相关因子线粒体外膜蛋白20(Outer membrane translocase 20,TOMM20)、线粒体内膜蛋白(Inner membrane translocase 23,TIMM2(3)、热休克蛋白60(Heat shock proteins 60,HSP60)的mRNA和蛋白水平的相对表达量,利用WB检测病羊组织线粒体蛋白中自噬相关因子Beclin1、LC3和选择性自噬受体p62蛋白水平的相对表达量。结果表明:(1)PCR扩增的目的条带与JSRV env预期扩增片段大小一致。光镜下可见组织中泡Ⅱ型上皮细胞呈乳头状生长,且伸入泡中,同时免疫组化结果显示在增生的泡Ⅱ型细胞中检测到JSRV Env大量表达,而阴性对照组未检出。(2)与健康对照组相比,透射电镜观察到感染组羊组线粒体大量损伤,并且出现双层膜结构的线粒体自噬体包裹损伤的线粒体,TOMM20、TIMM23和HSP60的mRNA相对表达水平和蛋白相对表达水平(P<0.01)均极显著下降。(3)自噬因子Beclin1(P<0.05)和LC3(P<0.01)蛋白相对表达水平显著升高,p62相对表达显著下降(P<0.001)。综上,本研究发现自然感染JSRV羊组织中线粒体损伤严重并出现线粒体自噬现象,为JSRV的致病机制提供新的研究方向。
梁浚哲段续接杜晓悦张良李慧萍刘淑英
关键词:绵羊肺腺瘤病毒线粒体损伤
自然感染绵羊腺瘤病毒绵羊组织线粒体损伤及自噬情况分析
绵羊腺瘤(Ovine pulmonary adenocarcinoma,OPA)是一种慢性传染性病毒肿瘤疾病,其病原为绵羊腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)。在本实验室前...
梁浚哲
关键词:绵羊肺腺瘤病毒线粒体损伤
一种用于检测绵羊腺瘤病毒和梅迪-维斯纳病毒的双重实时荧光RPA引物组合物、试剂盒和检测方法
本发明公开一种用于检测绵羊腺瘤病毒和梅迪‑维斯纳病毒的双重实时荧光RPA引物组合物、试剂盒和检测方法,涉及病毒检测技术领域。本发明提供了用于检测绵羊腺瘤病毒和梅迪‑维斯纳病毒的双重实时荧光RPA引物组合物,所述双重实...
刘淑英李慧萍张良刘然
基于转录组学分析自然感染绵羊腺瘤病毒患羊肿瘤组织中转录差异基因及病毒致瘤机制的研究被引量:1
2024年
绵羊腺瘤病(OPA)是由绵羊腺瘤病毒(JSRV)引起的绵羊传染性肿瘤疾病。为探究JSRV对绵羊脏的致瘤机制,本研究从自然感染JSRV的羊(OPA患羊)肿瘤组织和健康羊组织中提取总RNA,构建二者的cDNA文库后采用Illumina Hi Seq 4000高通量测序平台进行转录组学测序(RNA-Seq),采用DESeqR筛选健康绵羊与患病绵羊组织中的转录差异基因,并以P<0.05和log2(Fold change)≥1筛选转录显著差异基因。通过GO和KEGG数据库对转录显著差异基因进行GO功能和KEGG信号通路的富集分析,并采用RT-qPCR对随机选择的10个转录显著差异基因进行验证。结果显示,与对照组相比,OPA羊肿瘤组织中共筛选到1 360个转录上调基因和783个转录下调基因,其中154个转录显著上调基因,212个转录显著下调基因。GO功能分析显示,转录显著差异基因显著富集在178个GO条目中,包括114个生物过程(BP)、19个细胞成分(CC)和45个分子功能(MF),主要涉及生长因子活性、复制后修复、NAD^(+)二磷酸酶活性、核苷代谢过程和鸟苷核苷酸交换因子活性等生物学功能。KEGG分析显示转录显著差异基因主要富集在细胞增殖、分化和肿瘤生成,如PI3K/Akt、MAPK和Hippo等信号通路。RT-qPCR结果显示,10个转录显著差异基因与RNA-Seq筛选结果均一致。本研究进一步通过RT-qPCR、western blot检测Hippo信号通路核心蛋白哺乳动物STE20样蛋白激酶1/2 (MST1/2)、大肿瘤抑制因子1/2 (LATS1/2)、YES相关蛋白1/2 (YAP1)在两组绵羊组织样品中的转录及表达水平和YAP1的磷酸化水平(p-YAP1);采用免疫组化试验(IHC)检测Hippo信号通路中上述核心蛋白在两组绵羊组织中的表达及定位。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,OPA羊组织中MST1和YAP1 mRNA的转录水平均极显著上调(P<0.01、P<0.001),LATS1 mRNA的转录水平显著上调(P<0.05)。Western blot结果显示,MST1/2蛋白在59 ku、YAP1和p-YAP1蛋白在65 ku、L
段续接杨惠孙志伟杜晓悦张培梁浚哲刘淑英
关键词:绵羊肺腺瘤病绵羊肺腺瘤病毒
外源性绵羊腺瘤病毒实时荧光RPA检测方法的建立被引量:2
2023年
为实现对外源性绵羊腺瘤病毒(exJSRV)的快速检测,根据基因组中序列保守的env基因设计特异性引物和探针,通过优化反应条件和反应体系,建立了exJSRV的实时荧光RPA检测方法,并通过灵敏度、特异性、重复性及样品检测进行评价。结果显示,该方法最佳反应温度为40℃,用时短,仅需20 min即可完成扩增;灵敏度高,最低可检测到10^(6)ng/L的cDNA模板,纯化后的cDNA模板最低可检测到10 ng/L,与PCR结果一致;特异性强,能准确检测到exJSRV,与小反刍兽疫病毒(PPRV)、羊败血性链球菌(OSS)、牛肠道病毒(BEV)、传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛副流感病毒3型(BPIV3)、炎支原体(MO)等继发呼吸道症状的病原无交叉反应;重复性好,对于相同质量浓度的模板cDNA检测结果一致;可有效检测出病羊组织、鼻液及外周血白细胞内的exJSRV,与PCR结果一致。结果表明,该方法可实现exJSRV的快速检测,为绵羊腺瘤病(OPA)的诊断及防控提供可靠依据。
刘然张琳刘淑英
关键词:绵羊肺腺瘤病毒
自然感染绵羊腺瘤病毒组织中凋亡相关因子的表达分析被引量:3
2023年
绵羊腺瘤(ovine pulmonary adenocarcinoma,OPA)是一种由绵羊腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)引起的慢性、接触传染性脏肿瘤疾病。为了探究细胞凋亡在OPA发展过程中的作用,本研究利用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹等方法检测了凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3及其对应的凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3在健康和自然感染JSRV绵羊组织中的表达情况。结果显示:与对照组相比,OPA组织中Bcl-2基因和蛋白表达量均显著上调,而Bax和Caspase-3基因和蛋白表达量均显著下调。此外,免疫组织化学显示,Bcl-2、Bax、Caspase-3主要表达于腺瘤灶内增生的Ⅱ型泡上皮细胞中。结果表明,细胞凋亡在OPA组织中的活动受到抑制,提示绵羊腺瘤病毒可能通过调节细胞凋亡活动影响OPA的发生发展。
张良黄家荣孙志伟李慧萍刘淑英
关键词:绵羊绵羊肺腺瘤病毒BCL-2
一种用于检测绵羊腺瘤病毒的荧光RPA引物、试剂盒和检测方法
本发明公开一种用于检测绵羊腺瘤病毒的荧光RPA引物、试剂盒和检测方法,涉及病毒检测技术领域。本发明提供一种新的用于检测绵羊腺瘤病毒的荧光RPA组合物,包括以下引物和与引物配合使用的探针:正向引物为SEQ ID No....
刘淑英齐景伟李慧萍张良安晓萍张琳
绵羊腺瘤病毒Gag蛋白的生物信息学分析及抗原表位预测被引量:4
2021年
目的探讨绵羊腺瘤病毒(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)Gag蛋白的组成结构及生物学功能。方法从NCBI数据库中获取JSRV的gag基因序列及其编码蛋白的氨基酸序列,利用ExPASy,ProtScale,Signal 5.0,TMHMM Server,NetPhos Server,NetNGlyc,SOPMA,Prediction,Swiss-Model和DNAStar等生物信息学软件分析Gag的氨基酸序列组成、理化性质、亲疏水性、信号肽、跨膜区、磷酸化位点、糖基化位点、蛋白功能区域、二、三级结构和B、T细胞抗原表位等。结果Gag蛋白是由611个氨基酸构成富含脯氨酸的亲水蛋白,分子式为C3024H4708N834O898S27,相对分子质量为67.981×103,理论等电点为7.14;二级结构以无规则卷曲居多,占48.77%;无信号肽且无跨膜区,存在33个磷酸化位点,1个糖基化位点,含有2个超级家族保守结构域和1个锌指结构。预测该蛋白含有17个B细胞优势抗原表位和25个优势CTL表位。结论生物信息学分析JSRV Gag蛋白属于亲水蛋白,含有多个抗原表位,可能具有免疫原性,可作为潜在抗原用于诊断方法的建立与疫苗的研制。
王宇李建云武健刘淑英
关键词:绵羊肺腺瘤病绵羊肺腺瘤病毒GAG蛋白抗原表位生物信息学

相关作者

刘淑英
作品数:151被引量:237H指数:9
供职机构:内蒙古农业大学兽医学院
研究主题:绵羊肺腺瘤病毒 绵羊 ENJSRV 内源性绵羊肺腺瘤病毒 褪黑素
马学恩
作品数:167被引量:338H指数:11
供职机构:内蒙古农业大学兽医学院
研究主题:绵羊肺腺瘤病毒 绵羊肺腺瘤病 禽脑脊髓炎 绵羊 鸡病
么宏强
作品数:57被引量:73H指数:5
供职机构:内蒙古农业大学兽医学院
研究主题:绵羊肺腺瘤病毒 绵羊肺腺瘤病 透明质酸酶 羔羊 基因克隆
于立新
作品数:33被引量:32H指数:4
供职机构:内蒙古农业大学兽医学院
研究主题:绵羊肺腺瘤病毒 绵羊肺腺瘤病 羔羊 自然感染 病毒受体
张宇飞
作品数:43被引量:38H指数:5
供职机构:内蒙古农业大学
研究主题:囊膜蛋白 绵羊 ENV 绵羊肺腺瘤病毒 ENJSRV