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雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q59基因及其应用
本发明涉及一种雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q59基因及其应用,属于生物技术领域。本发明雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q59基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q5...
杨生超刘勤勤张广辉郝冰冯孝林陈庚舒彦宇李志远马迪娜叶喆和四梅卢迎春马骁王飞飞郭振宇尹正豪朱竞奇孟林飞
夏枯草细胞色素氧化酶CYP蛋白及其编码基因与应用
本发明公开了夏枯草细胞色素氧化酶CYP蛋白及其编码基因与应用,属于植物生物学技术领域。本发明公开的本发明公开的夏枯草细胞色素氧化酶CYP蛋白,为氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的CYP716‑4蛋白,或氨基酸序列如...
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一种可特异性识别细胞色素氧化酶CYP3A4的近红外荧光分子探针及其制备方法
一种可特异性识别细胞色素氧化酶CYP3A4的近红外荧光分子探针及其制备与应用,所述荧光分子探针具有式Ⅰ所示结构式:<IMG width="732" orientation="portrait" inline="yes" ...
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一种检测细胞色素氧化酶CYP2D6的荧光探针及其应用
一种检测细胞色素氧化酶CYP2D6的荧光探针及其应用,其属于生物医药技术领域。该特异性探针底物可用于测定生物体系中CYP2D6的活性。CYP2D6活性测定的流程如下:选择Bodipy类化合物meso‑位吡啶季铵盐中的...
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雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q58转基因酵母工程菌及其应用
本发明提供了一种雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q58基因,所述基因的序列如SEQ NO:1所示。本发明构建了雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q58转基因酵母工程菌,该菌能够高产多种葫芦素中间体,包括11‑Carbony...
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雪胆细胞色素氧化酶转基因酵母工程菌在制备葫芦素中间体中的应用
本发明提供了一种雪胆细胞色素氧化酶HcCYP87D19基因,所述基因的序列如SEQNO:1所示。本发明构建了共转染雪胆细胞色素氧化酶HcCYP87D19和HcCYP81Q58的转基因酵母工程菌,该菌能够高产多种葫芦素中间...
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雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q58转基因酵母工程菌及其应用
本发明提供了一种雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q58基因,所述基因的序列如SEQ NO:1所示。本发明构建了雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q58转基因酵母工程菌,该菌能够高产多种葫芦素中间体,包括11‑Carbony...
张广辉李志远杨生超郝冰陈庚舒彦宇冯孝林马迪娜和四梅卢迎春马骁马飞飞郭振宇黄春丽贺雪颖张建丽
丝状真菌细胞色素氧化酶CYP-cl3的原核表达
2023年
真菌细胞色素P450是一种可催化甾体化合物选择性氧化的膜蛋白.为实现丝状真菌亚麻刺盘孢ST-1(Colletotrichum lini)来源的细胞色素氧化酶CYP-cl3在大肠杆菌中的可溶性表达,通过ProtScale和TMHMM软件预测CYP-cl3的N端膜锚定区,并对其进行不同长度的沉默,分别评估其对CYP-cl3原核表达的影响.筛选获得适宜沉默长度的CYP-cl3重组菌,进一步通过融合增溶标签提高CYP-cl3的溶解性.分别在大肠杆菌BL21(DE3)和C43(DE3)中进行表达.结果表明,CYP-cl3的N端含有一段40个氨基酸残基组成的膜锚定区,可将细胞色素P450锚定于生物膜.当N端被沉默40个氨基酸残基后,CYP-cl3在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达量较未沉默形式显著提高.通过融合MBP标签提高了重组蛋白的溶解性,实现了CYP-cl3在大肠杆菌中的完全可溶性表达.此外,经CYP17A1 N端替换的重组CYP-cl3也在大肠杆菌C43(DE3)实现了可溶性表达.本研究采用N端沉默和N端替换策略实现了CYP-cl3在大肠杆菌系统中的表达,可作为真菌细胞色素P450原核表达的改进策略.(图6表1参23)
何鹏李会伏家强邓庆博史劲松许正宏
关键词:原核表达融合标签
雪胆细胞色素氧化酶基因及其转基因工程菌在制备葫芦素中间体中的应用
本发明公开了一种雪胆细胞色素氧化酶HcCYP87D20和HcCYP81Q59基因及其转基因工程菌在制备葫芦素中间体中的应用。鉴别获得雪胆细胞色素氧化酶HcCYP87D20和HcCYP81Q59基因,极大地推进了雪胆素(葫...
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