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假基因AC106872.1参与维持人类胚胎干细胞自我更新能力
2025年
目的探究假基因AC106872.1对维持人类胚胎干细胞(hESCs)自我更新能力的影响。方法在hESCs中敲除假基因AC106872.1,通过PCR及琼脂糖凝胶电泳检测敲除情况;通过集落形成实验及碱性磷酸酶(AP)染色评估hESCs的集落形成能力,qPCR及流式细胞测量术分析检测hESCs的多能性及分化标志基因表达情况,高通量测序检测敲除假基因对细胞转录组的影响。结果敲除假基因AC106872.1后,hESCs的集落形成能力得到抑制(P<0.05),多能性标志基因表达水平显著降低(P<0.0001),分化标志基因表达水平显著上升(P<0.0001)。结论假基因AC106872.1通过调控多能性基因的表达,参与人类胚胎干细胞自我更新能力的维持。
蒋正阳孙梦瑶何浏余佳马艳妮
关键词:假基因人类胚胎干细胞多能性
AKT三种亚型基因敲除对小鼠胚胎干细胞自我更新和分化的影响
2025年
AKT,又称为蛋白质激酶B(protein kinase B, PKB),在细胞增殖和代谢过程中发挥关键作用。AKT有3种亚型:AKT1、AKT2和AKT3,这3种亚型对小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells, mESCs)多能性和分化的影响尚不明确。本研究旨在探讨AKT亚型缺失对小鼠胚胎干细胞自我更新和分化的影响。本文利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立AKT的3种亚型基因敲除的细胞系,通过蛋白质印迹(Western blot)、流式细胞术、qRT-PCR、CCK-8、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AP)染色和RNA-seq对其表型和分子变化进行分析。Akt的3种亚型基因敲除的细胞系构建成功,Akt1和Akt2的缺失会抑制小鼠胚胎干细胞的增殖,Akt任意一种亚型的缺失不会影响多能性基因在mRNA水平和蛋白质水平的表达,但在拟胚体形成过程中,Akt的3种亚型的缺失均会影响3个胚层基因的mRNA水平表达。转录物组分析结果表明,与野生型mESCs相比,Akt1、Akt2和Akt3缺失后分别有995、547和429个差异表达基因(|log2FC|≧1,P<0.05),这3种亚型调控的差异表达基因存在部分重叠。综上,Akt的3种亚型的独立缺失不影响小鼠胚胎干细胞干性的维持,但是他们对于分化至关重要。Akt的3种亚型可以共同调控基因的表达,同时也保留了各自的调控特异性。本研究为理解Akt的3种亚型在干细胞生物学中的独特和重叠作用提供了基础,突显了它们在维持干细胞功能和分化中的重要性。
杨淇汤帅张林林唐午阳豆澳祥张宇航李丕顺郑晓峰
关键词:小鼠胚胎干细胞多能性
精原干细胞自我更新及分化的调控机制研究进展
2024年
精原干细胞(SSC)是睾丸中最原始的生殖细胞,通过自我更新和连续分化最终成为成熟的精子,SSC对维持高效的精子发生起着至关重要的作用,与生精微环境(niche)之间复杂的分子和细胞相互作用构成了精子发生的基础。以往认为niche主要由睾丸支持细胞构成,而新近研究表明,睾丸内多种细胞、分子信号通路均参与调控SSC的自我更新及分化。本文就睾丸生精微环境调控SSC自我更新及分化的研究进展进行综述。
潘瑜李文鑫张韫超荆涛
关键词:细胞自我更新细胞分化精子发生
环状RNA circLRP6在制备促进神经干细胞自我更新的药物中的应用
本发明公开了环状RNA circLRP6在制备促进神经干细胞自我更新的药物中的应用。本发明通过对SD大鼠大脑皮层神经干细胞成球及分化48 h进行转录组测序,对分析筛选出来的circRNAs进一步通过qRT‑PCR验证其表...
刘炎郭隆雨刘梅巫荣华
抗EGFRvⅢCAR-T疗法联合Notch1通路抑制剂对人胶质瘤起始细胞自我更新能力的抑制作用
2024年
目的观察抗表皮生长因子受体vⅢ嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞(抗EGFRvⅢCAR-T)疗法联合Notch1通路抑制剂DAPT对人胶质瘤起始细胞(GICs)自我更新能力的抑制作用。方法将胶质母细胞瘤原代细胞分为DT007和DT008两部分,经干细胞成球培养后采用免疫磁珠法分选,Western blotting法及免疫荧光法鉴定为GICs,分别命名为PA37S和PA38S。取PA37S、PA38S两种细胞,每种细胞随机分为对照组(加入细胞培养液)、DAPT组(加入10µmol/L DAPT)、CAR-T组(加入慢病毒转染获得的抑制EGFRvⅢ表达的抗EGFRvⅢCAR-T淋巴细胞)、CAR-T+DAPT组(加入抗EGFRvⅢCAR-T淋巴细胞和10µmol/L DAPT),均培养24 h。采用Western blotting法检测细胞EGFRvⅢ、Notch1活化相关指标Hes1蛋白相对表达量,成球实验检测细胞球直径和数目,极限稀释实验检测5、10、20、50、100、200、500个/孔细胞密度下的细胞球数目。结果在PA37S、PA38S细胞中,CAR-T组、CAR-T+DAPT组EGFRvⅢ蛋白相对表达量均低于对照组、DAPT组,DAPT组、CAR-T+DAPT组Hes1蛋白相对表达量均低于对照组、CAR-T组(P均<0.05)。成球实验结果显示,在PA37S、PA38S细胞中,DAPT组、CAR-T组、CAR-T+DAPT组细胞球数量和直径均低于对照组,以CAR-T+DAPT组降低更明显(P均<0.05)。极限稀释实验结果显示,在PA37S细胞和PA38S细胞中,5、10个/孔细胞密度下各组细胞球数量比较差异均无统计学意义(P均>0.05);20个/孔细胞密度下CAR-T+DAPT组细胞球数量低于对照组,50、100、200个/孔细胞密度下CAR-T+DAPT组细胞球数量均低于对照组、DAPT组、CAR-T组,500个/孔细胞密度下DAPT组、CAR-T组、CAR-T+DAPT组细胞球数量均低于对照组且CAR-T+DAPT组降低更明显(P均<0.05)。结论抗EGFRvⅢCAR-T疗法联合DAPT可抑制GICs的自我更新能力。
周星辰王大巍赵彪束汉生程哲闵敬亮
关键词:NOTCH1自我更新
三维力学微环境调控肿瘤细胞自我更新与增殖的细胞核转导机制
实体肿瘤所处的复杂三维肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)与肿瘤的发生、发展密切相关。除生化等信号外,微环境中的机械信号也是肿瘤细胞的表型与行为的重要调节因素。细胞核作为机械敏感元件(如内核...
杨稀
关键词:细胞增殖自我更新
肿瘤相关巨噬细胞分泌FGL2促进胶质瘤干细胞自我更新的机制研究
马晓雨
mTOR通路在调控造血干细胞自我更新和分化中的研究进展
2024年
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,在调节细胞的生长、增殖中起着重要的作用。mTOR复合体通过磷酸化激活下游底物S6K1、4E-BP等调节细胞生长、增殖、蛋白质代谢等等,同样mTOR信号通路在造血系统中也发挥重要作用,其整合多种信号对造血干细胞的静止、自我更新和多向分化三个过程起调节作用,本文系统介绍相关信号分子及蛋白如何通过影响mTOR信号通路并进一步影响造血干细胞发挥功能。
王嘉琪肖军李翠莹
关键词:造血干细胞MTOR信号通路造血分化自我更新
BMI1分子调控肿瘤干细胞自我更新及免疫逃逸的作用机制
2024年
B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(BMI1)分子属于多梳家族(PcG)成员,作为重要的干细胞标志物之一,通过转录调控基因的表达维持机体的正常生理功能。研究报道,BMI1也是影响恶性肿瘤发生发展的关键分子,在肿瘤干细胞(CSCs)的自我更新、迁移侵袭、耐药及免疫逃逸中发挥重要的调控作用,参与肿瘤的复发、转移等过程。本文总结近年的研究进展,阐述BMI1的分子结构和生物学功能,分析BMI1分子对CSCs自我更新、迁移侵袭、耐药及免疫逃逸的调控作用,探讨BMI1作为新型靶点在肿瘤免疫治疗中的潜在价值。
余华丁桂清程晓东
关键词:BMI1肿瘤干细胞自我更新耐药免疫逃逸
剪接因子hnRNPA1通过调控糖代谢促进肝癌干细胞自我更新的机制研究
2024年
目的探究剪切因子异质性核糖核蛋白A1(hnRNPA1)通过糖酵解作用对肝癌干细胞(liver cancer stem cells,LCSCs)的自我更新能力的调控作用。方法将未转染的HCCLM3和LCSCs细胞分别记为HCCLM3组和LCSCs组;将si-hnRNPA1转染至LCSCs中,记为si-hnRNPA1-LCSCs组;将LCSCs与WZB117抑制剂共孵育,记为WZB117抑制剂-LCSCs组;使用荧光定量-聚合酶链式反应(Q-PCR)检测HCCLM3组与LCSCs组中hnRNPA1的mRNA表达水平,以及LCSCs组、si-hnRNPA1-LCSCs组和WZB117抑制剂-LCSCs组糖酵解标志物(HK2与PFKM)与细胞干性标志物(FBP1与PCK1)的mRNA的表达水平;流式细胞术检测HCCLM3组、LCSCs组、si-hnRNPA1-LCSCs组和WZB117抑制剂-LCSCs组干性标志因子CD133与CD14的表达水平;使用细胞迁移与细胞克隆实验评价hnRNPA1与糖酵解抑制后对LCSCs组、si-hnRNPA1-LCSCs组和WZB117抑制剂-LCSCs组细胞干性的影响。结果hnRNPA1在LCSCs中相对HCCLM3细胞高表达,差异有统计学意义(P<0.05);hnRNPA1基因敲减之后,其细胞糖酵解与细胞干性标志物均降低,差异有统计学意义(P<0.05);细胞糖酵解被抑制后,其细胞糖酵解与细胞干性标志物均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论hnRNPA1通过抑制细胞的糖酵解介导对肝癌干细胞细胞干性的调控。
林树文梁洪玻洪晓城佘展鹏叶伟杰
关键词:肝癌干细胞糖酵解

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曹建国
作品数:253被引量:897H指数:15
供职机构:湖南师范大学
研究主题:白杨素 细胞凋亡 凋亡 甲基莲心碱 卵巢癌
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作品数:76被引量:376H指数:10
供职机构:赣南医学院第一附属医院
研究主题:丙泊酚 NARCOTREND 地佐辛 颅内动脉瘤 教学
昌薇
作品数:2被引量:11H指数:2
供职机构:武汉大学人民医院
研究主题:分子伴侣 心脏疾病 细胞自我更新 细胞器 细胞内
刘俊
作品数:106被引量:553H指数:12
供职机构:上海市第一人民医院
研究主题:胰腺癌 急性重症胰腺炎 乳腺癌 预后 早期肠内营养
薛波新
作品数:376被引量:827H指数:15
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