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假基因AC106872.1参与维持人类胚胎干细胞 自我 更新 能力 2025年 目的探究假基因AC106872.1对维持人类胚胎干细胞 (hESCs)自我 更新 能力的影响。方法在hESCs中敲除假基因AC106872.1,通过PCR及琼脂糖凝胶电泳检测敲除情况;通过集落形成实验及碱性磷酸酶(AP)染色评估hESCs的集落形成能力,qPCR及流式细胞 测量术分析检测hESCs的多能性及分化标志基因表达情况,高通量测序检测敲除假基因对细胞 转录组的影响。结果敲除假基因AC106872.1后,hESCs的集落形成能力得到抑制(P<0.05),多能性标志基因表达水平显著降低(P<0.0001),分化标志基因表达水平显著上升(P<0.0001)。结论假基因AC106872.1通过调控多能性基因的表达,参与人类胚胎干细胞 自我 更新 能力的维持。 蒋正阳 孙梦瑶 何浏 余佳 马艳妮关键词:假基因 人类胚胎干细胞 多能性 AKT三种亚型基因敲除对小鼠胚胎干细胞 自我 更新 和分化的影响 2025年 AKT,又称为蛋白质激酶B(protein kinase B, PKB),在细胞 增殖和代谢过程中发挥关键作用。AKT有3种亚型:AKT1、AKT2和AKT3,这3种亚型对小鼠胚胎干细胞 (mouse embryonic stem cells, mESCs)多能性和分化的影响尚不明确。本研究旨在探讨AKT亚型缺失对小鼠胚胎干细胞 自我 更新 和分化的影响。本文利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立AKT的3种亚型基因敲除的细胞 系,通过蛋白质印迹(Western blot)、流式细胞 术、qRT-PCR、CCK-8、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AP)染色和RNA-seq对其表型和分子变化进行分析。Akt的3种亚型基因敲除的细胞 系构建成功,Akt1和Akt2的缺失会抑制小鼠胚胎干细胞 的增殖,Akt任意一种亚型的缺失不会影响多能性基因在mRNA水平和蛋白质水平的表达,但在拟胚体形成过程中,Akt的3种亚型的缺失均会影响3个胚层基因的mRNA水平表达。转录物组分析结果表明,与野生型mESCs相比,Akt1、Akt2和Akt3缺失后分别有995、547和429个差异表达基因(|log2FC|≧1,P<0.05),这3种亚型调控的差异表达基因存在部分重叠。综上,Akt的3种亚型的独立缺失不影响小鼠胚胎干细胞 干性的维持,但是他们对于分化至关重要。Akt的3种亚型可以共同调控基因的表达,同时也保留了各自的调控特异性。本研究为理解Akt的3种亚型在干细胞 生物学中的独特和重叠作用提供了基础,突显了它们在维持干细胞 功能和分化中的重要性。 杨淇 汤帅 张林林 唐午阳 豆澳祥 张宇航 李丕顺 郑晓峰关键词:小鼠胚胎干细胞 多能性 精原干细胞 自我 更新 及分化的调控机制研究进展 2024年 精原干细胞 (SSC)是睾丸中最原始的生殖细胞 ,通过自我 更新 和连续分化最终成为成熟的精子,SSC对维持高效的精子发生起着至关重要的作用,与生精微环境(niche)之间复杂的分子和细胞 相互作用构成了精子发生的基础。以往认为niche主要由睾丸支持细胞 构成,而新近研究表明,睾丸内多种细胞 、分子信号通路均参与调控SSC的自我 更新 及分化。本文就睾丸生精微环境调控SSC自我 更新 及分化的研究进展进行综述。 潘瑜 李文鑫 张韫超 荆涛关键词:细胞自我更新 细胞分化 精子发生 环状RNA circLRP6在制备促进神经干细胞 自我 更新 的药物中的应用 本发明公开了环状RNA circLRP6在制备促进神经干细胞 自我 更新 的药物中的应用。本发明通过对SD大鼠大脑皮层神经干细胞 成球及分化48 h进行转录组测序,对分析筛选出来的circRNAs进一步通过qRT‑PCR验证其表... 刘炎 郭隆雨 刘梅 巫荣华抗EGFRvⅢCAR-T疗法联合Notch1通路抑制剂对人胶质瘤起始细胞 自我 更新 能力的抑制作用 2024年 目的观察抗表皮生长因子受体vⅢ嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞 (抗EGFRvⅢCAR-T)疗法联合Notch1通路抑制剂DAPT对人胶质瘤起始细胞 (GICs)自我 更新 能力的抑制作用。方法将胶质母细胞 瘤原代细胞 分为DT007和DT008两部分,经干细胞 成球培养后采用免疫磁珠法分选,Western blotting法及免疫荧光法鉴定为GICs,分别命名为PA37S和PA38S。取PA37S、PA38S两种细胞 ,每种细胞 随机分为对照组(加入细胞 培养液)、DAPT组(加入10µmol/L DAPT)、CAR-T组(加入慢病毒转染获得的抑制EGFRvⅢ表达的抗EGFRvⅢCAR-T淋巴细胞 )、CAR-T+DAPT组(加入抗EGFRvⅢCAR-T淋巴细胞 和10µmol/L DAPT),均培养24 h。采用Western blotting法检测细胞 EGFRvⅢ、Notch1活化相关指标Hes1蛋白相对表达量,成球实验检测细胞 球直径和数目,极限稀释实验检测5、10、20、50、100、200、500个/孔细胞 密度下的细胞 球数目。结果在PA37S、PA38S细胞 中,CAR-T组、CAR-T+DAPT组EGFRvⅢ蛋白相对表达量均低于对照组、DAPT组,DAPT组、CAR-T+DAPT组Hes1蛋白相对表达量均低于对照组、CAR-T组(P均<0.05)。成球实验结果显示,在PA37S、PA38S细胞 中,DAPT组、CAR-T组、CAR-T+DAPT组细胞 球数量和直径均低于对照组,以CAR-T+DAPT组降低更明显(P均<0.05)。极限稀释实验结果显示,在PA37S细胞 和PA38S细胞 中,5、10个/孔细胞 密度下各组细胞 球数量比较差异均无统计学意义(P均>0.05);20个/孔细胞 密度下CAR-T+DAPT组细胞 球数量低于对照组,50、100、200个/孔细胞 密度下CAR-T+DAPT组细胞 球数量均低于对照组、DAPT组、CAR-T组,500个/孔细胞 密度下DAPT组、CAR-T组、CAR-T+DAPT组细胞 球数量均低于对照组且CAR-T+DAPT组降低更明显(P均<0.05)。结论抗EGFRvⅢCAR-T疗法联合DAPT可抑制GICs的自我 更新 能力。 周星辰 王大巍 赵彪 束汉生 程哲 闵敬亮关键词:NOTCH1 自我更新 三维力学微环境调控肿瘤细胞 自我 更新 与增殖的细胞 核转导机制 实体肿瘤所处的复杂三维肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)与肿瘤的发生、发展密切相关。除生化等信号外,微环境中的机械信号也是肿瘤细胞 的表型与行为的重要调节因素。细胞 核作为机械敏感元件(如内核... 杨稀关键词:细胞增殖 自我更新 肿瘤相关巨噬细胞 分泌FGL2促进胶质瘤干细胞 自我 更新 的机制研究 马晓雨mTOR通路在调控造血干细胞 自我 更新 和分化中的研究进展 2024年 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,在调节细胞 的生长、增殖中起着重要的作用。mTOR复合体通过磷酸化激活下游底物S6K1、4E-BP等调节细胞 生长、增殖、蛋白质代谢等等,同样mTOR信号通路在造血系统中也发挥重要作用,其整合多种信号对造血干细胞 的静止、自我 更新 和多向分化三个过程起调节作用,本文系统介绍相关信号分子及蛋白如何通过影响mTOR信号通路并进一步影响造血干细胞 发挥功能。 王嘉琪 肖军 李翠莹关键词:造血干细胞 MTOR信号通路 造血分化 自我更新 BMI1分子调控肿瘤干细胞 自我 更新 及免疫逃逸的作用机制 2024年 B细胞 特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(BMI1)分子属于多梳家族(PcG)成员,作为重要的干细胞 标志物之一,通过转录调控基因的表达维持机体的正常生理功能。研究报道,BMI1也是影响恶性肿瘤发生发展的关键分子,在肿瘤干细胞 (CSCs)的自我 更新 、迁移侵袭、耐药及免疫逃逸中发挥重要的调控作用,参与肿瘤的复发、转移等过程。本文总结近年的研究进展,阐述BMI1的分子结构和生物学功能,分析BMI1分子对CSCs自我 更新 、迁移侵袭、耐药及免疫逃逸的调控作用,探讨BMI1作为新型靶点在肿瘤免疫治疗中的潜在价值。 余华 丁桂清 程晓东关键词:BMI1 肿瘤干细胞 自我更新 耐药 免疫逃逸 剪接因子hnRNPA1通过调控糖代谢促进肝癌干细胞 自我 更新 的机制研究 2024年 目的探究剪切因子异质性核糖核蛋白A1(hnRNPA1)通过糖酵解作用对肝癌干细胞 (liver cancer stem cells,LCSCs)的自我 更新 能力的调控作用。方法将未转染的HCCLM3和LCSCs细胞 分别记为HCCLM3组和LCSCs组;将si-hnRNPA1转染至LCSCs中,记为si-hnRNPA1-LCSCs组;将LCSCs与WZB117抑制剂共孵育,记为WZB117抑制剂-LCSCs组;使用荧光定量-聚合酶链式反应(Q-PCR)检测HCCLM3组与LCSCs组中hnRNPA1的mRNA表达水平,以及LCSCs组、si-hnRNPA1-LCSCs组和WZB117抑制剂-LCSCs组糖酵解标志物(HK2与PFKM)与细胞 干性标志物(FBP1与PCK1)的mRNA的表达水平;流式细胞 术检测HCCLM3组、LCSCs组、si-hnRNPA1-LCSCs组和WZB117抑制剂-LCSCs组干性标志因子CD133与CD14的表达水平;使用细胞 迁移与细胞 克隆实验评价hnRNPA1与糖酵解抑制后对LCSCs组、si-hnRNPA1-LCSCs组和WZB117抑制剂-LCSCs组细胞 干性的影响。结果hnRNPA1在LCSCs中相对HCCLM3细胞 高表达,差异有统计学意义(P<0.05);hnRNPA1基因敲减之后,其细胞 糖酵解与细胞 干性标志物均降低,差异有统计学意义(P<0.05);细胞 糖酵解被抑制后,其细胞 糖酵解与细胞 干性标志物均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论hnRNPA1通过抑制细胞 的糖酵解介导对肝癌干细胞 的细胞 干性的调控。 林树文 梁洪玻 洪晓城 佘展鹏 叶伟杰关键词:肝癌干细胞 糖酵解
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