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布鲁氏菌分泌蛋白BPE043的功能及其对细胞凋亡基因表达的影响
2025年
本研究旨在分析布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统(T4SS)效应蛋白BPE043在布鲁氏菌感染过程和调控细胞凋亡基因表达中的作用。以流产布鲁氏菌2308(S2308)为亲本株,通过同源重组的方法构建布鲁氏菌BPE 043基因缺失株(2308ΔBPE 043)和回补株(2308ΔBPE 043-C)。将亲本株、缺失株和回补株在相同起始浓度下培养,观察它们的生长变化。亲本株、缺失株和回补株感染小鼠,测定小鼠脾脏的荷菌量。亲本株、缺失株和回补株侵染小鼠巨噬细胞RAW 264.7,检测细菌的胞内存活能力。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot技术检测布鲁氏菌侵染后细胞凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Bax和Bcl-2的表达水平。结果显示,亲本株、缺失株和回补株在体外培养的生长趋势基本相同。2308ΔBPE 043感染小鼠脾脏的荷菌量显著低于S2303感染组,且在感染2周后,缺失株感染组脾脏荷菌量的下降趋势较亲本株感染组明显。布鲁氏菌侵染宿主细胞8 h后,2308ΔBPE 043的胞内存活能力显著低于S2308。布鲁氏菌侵染宿主细胞24 h后,2308ΔBPE 043侵染组凋亡基因Caspase-3、Caspase-8和Bax表达水平显著高于S2308侵染组,Bcl-2表达水平显著低于S2308侵染组。2308ΔBPE 043侵染组Caspase-3和Caspase-8的蛋白表达水平,以及Caspase-3和Caspase-8的活性显著高于S2308侵染组。本研究发现,T4SS效应蛋白BPE043在布鲁氏菌感染和胞内存活过程中发挥重要作用,是布鲁氏菌重要的毒力因子,为进一步探究BPE043在布鲁氏菌持续性感染中的作用奠定了基础。
王书利李梦含高萌萌王倩郑好张荷婷李志强李启峰
关键词:布鲁氏菌毒力凋亡
降低灰飞虱产卵量的细胞凋亡基因及其应用
本发明公开了一种降低灰飞虱产卵量的细胞凋亡基因及其应用,所述降低灰飞虱产卵量的基因片段序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明筛选出能导致灰飞虱产卵量显著性降低的细胞凋亡基因,通过...
郭燕
降低灰飞虱产卵量的细胞凋亡基因片段及其用途
本发明公开了一种降低灰飞虱产卵量的细胞凋亡基因片段及其用途,基因序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明,通过分子生物学技术合成灰飞虱细胞凋亡基因片段的dsRNA,利用饲喂法可以显...
郭燕
冷应激对黑鲷组织损伤及细胞凋亡基因表达的影响被引量:1
2022年
为探究黑鲷(Acanthopagrus schlegelii)在低温下的生理适应机制,设计了3个温度梯度(15、10和5℃),以15℃为对照,低温胁迫24 h,分别研究了冷应激前后黑鲷的组织结构变化、生理生化反应及凋亡基因的表达。结果显示,随着温度的降低,黑鲷呈现出肝脏空泡化、腮小片收缩、肌纤维断裂等组织损伤现象;肝脏中的甘油三酯(TG)含量显著降低(P<0.05),谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性和总胆固醇(T-CHO)含量显著升高(P<0.05),表明黑鲷遭受冷应激,肝脏功能紊乱、结构遭到破坏。q-PCR结果显示,10℃时黑鲷通过降低apaf-1、bax、caspase-1基因表达量,促进caspase-3、diablo基因表达,从而减少肝脏细胞丢失来降低冷应激的损伤;胁迫至5℃时,温度超过黑鲷自身生理调节阈值,肝脏细胞受损程度加重,黑鲷促进apaf-1、bcl-2和diablo基因表达,抑制caspase-3基因表达,最大限度维持了肝脏细胞的稳态。结果表明,随着温度的降低,黑鲷的肝脏、腮、肌肉损伤加重,其中肝脏通过调节AST、ALT、T-CHO、TG以及凋亡基因表达,以减少组织损伤带来的危害。
卫明亮张志伟张志勇林志杰祝斐贾超峰孟乾徐大凤张曹进
关键词:黑鲷冷应激组织切片细胞凋亡
RNAi抑制小菜蛾Br-Z2/3基因对下游细胞凋亡基因表达及化蛹的影响被引量:1
2021年
【目的】本研究旨在构建用于小菜蛾Plutella xylostella蛹期特异表达基因Br-Z2/3 dsRNA合成的体外原核表达系统,研究RNAi抑制Br-Z2/3基因对小菜蛾Br-Z2/3和细胞凋亡基因表达及化蛹的影响。【方法】构建小菜蛾L4440-Br-Z2/3重组载体,转化大肠杆菌Escherichia coli HT115感受态细胞,经IPTG诱导大量获得Br-Z2/3 dsRNA,显微注射Br-Z2/3 dsRNA至小菜蛾4龄幼虫进行RNAi;qPCR检测干扰Br-Z2/3基因12和24 h后小菜蛾4龄幼虫Br-Z2/3及其下游细胞凋亡基因reaper,caspase-9和Gadd45g的表达量;观察并统计Br-Z2/3 RNAi后小菜蛾4龄幼虫的化蛹率、平均化蛹时间、蛹畸形率和幼虫死亡率。【结果】成功实现了Br-Z2/3 dsRNA的原核表达。qPCR结果表明,RNAi干扰Br-Z2/3后,小菜蛾4龄幼虫Br-Z2/3基因和相关联的细胞凋亡基因reaper表达量显著下降,但caspase-9和Gadd45g表达量显著上升。注射Br-Z2/3 dsRNA的处理组,化蛹率显著低于对照组,且化蛹高峰期推迟,幼虫死亡率显著高于对照组且畸形蛹率增加。【结论】本研究成功构建了用于小菜蛾Br-Z2/3基因dsRNA合成的体外原核表达系统,利用显微注射法对Br-Z2/3进行RNA干扰,证明Br-Z2/3是调控小菜蛾化蛹的关键基因
胡晓汉田素芬李亚勍林硕陈艺欣魏辉顾晓军黄劲飞王曦莹李志华
关键词:小菜蛾细胞凋亡基因化蛹
一种牡蛎细胞凋亡基因caspase 3基因及其在制备病理检测诊断试剂中的应用
本发明公开一种牡蛎细胞凋亡基因caspase 3基因及其在制备病理检测诊断试剂中的应用。本发明人发现了一个香港巨牡蛎细胞凋亡的标志性基因‑caspase 3基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其在溶藻弧菌(V...
向志明秦艳平马海涛李军张扬肖述张跃环喻子牛
大气PM_( 2.5)对支气管上皮细胞凋亡基因和DNA损伤修复基因表达的影响被引量:1
2021年
目的探讨深圳地区大气PM_(2.5)对人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBE)凋亡基因和DNA损伤修复基因表达的影响。方法分别以0、10、50μg/ml PM_(2.5)悬液染毒HBE细胞,并设阳性对照组(10μmol/L Cr^(6+)),以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测凋亡相关基因caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax、Bcl-2和DNA损伤修复基因hOGG1、h MTH1的mRNA表达水平变化,以Western blot法检测目的蛋白质的表达变化。结果与对照组比较,10、50μg/ml染毒组及阳性对照组caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax、hOGG1、hMTH1基因表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);Bcl-2基因表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot实验结果显示,与对照组比较,10、50μg/ml染毒组及阳性对照组的caspase-3、caspase-8、caspase-9、hOGG1蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);Bax和hMTH1蛋白在50μg/ml染毒组及阳性对照组表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);Bcl-2蛋白在10、50μg/ml染毒组及阳性对照组则明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PM_(2.5)染毒引起HBE细胞凋亡基因、DNA损伤修复基因表达升高,抑凋亡基因表达降低,提示PM_(2.5)对凋亡基因和DNA损伤基因表达具有明显影响。
王冰玉李闰冰蔡颖蔡颖徐新云秦双建李柏茹
关键词:人支气管上皮细胞凋亡基因DNA损伤
PM_(2.5)经p38 MAPK通路对人支气管上皮细胞凋亡基因表达的影响被引量:1
2021年
目的探讨PM_(2.5)经p38 MAPK通路对人支气管上皮细胞(HBE)凋亡基因表达的影响。方法将HBE细胞分为对照组(0μg/L PM_(2.5))、p38MAPK抑制剂组(10μg/ml SB203580)、PM_(2.5)组(50μg/ml PM_(2.5))、PM_(2.5)+抑制剂组(50μg/ml PM_(2.5)+SB203580),以实时荧光定量PCR(q-PCR)检测凋亡基因(caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax、Bcl-2)mRNA表达水平的变化,以Western blot检测凋亡蛋白表达。结果与对照组比较,PM_(2.5)染毒组caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax基因表达水平分别升高75.6%、205.0%、376.0%、82.0%,Bcl-2表达下降50.0%;与PM_(2.5)组比较,PM_(2.5)+抑制剂组caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax基因的表达水平分别下降54.0%、45.9%、38.1%、47.3%,Bcl-2表达升高51.4%。Western blot结果显示,与对照组比较,PM_(2.5)染毒组caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax的蛋白表达水平分别升高97.0%、72.0%、85.0%、75.6%,Bcl-2蛋白表达下降37.0%;与PM_(2.5)组比较,PM_(2.5)+抑制剂组caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax蛋白表达分别下降35.5%、36.0%、42.2%、32.8%,Bcl-2升高23.2%。结论PM_(2.5)染毒引起HBE细胞凋亡基因表达水平升高,p38 MAPK抑制剂SB203580可显著降低PM_(2.5)引起的凋亡基因表达升高,提示p38MAPK信号通路参与PM_(2.5)致HBE细胞凋亡过程。
蒲桔宁王冰玉李闰冰秦逍云黄奕钦张朝晖徐新云
关键词:人支气管上皮细胞P38MAPK抑制剂
超声检测脐血流参数与孕妇胎盘中氧化应激和细胞凋亡基因表达的关系被引量:3
2021年
目的探讨超声检测脐血流参数与孕妇胎盘中氧化应激及细胞凋亡基因表达的关系。方法选取2017年10月-2018年12月间在绍兴市妇幼保健院分娩的存在胎儿宫内缺氧的孕妇80例为观察组;同期健康孕妇80例为对照组。孕期使用彩色多普勒超声评估脐动脉的阻力指数、搏动指数及收缩期最大血流速/舒张末期血流速(S/D);分娩测定脐带血中丙二醛、氧化蛋白产物、谷胱甘肽过氧化物酶及超氧化物歧化酶含量;胎盘组织中氧化应激与细胞凋亡基因表达水平。结果孕31~36周、孕37~41周时,观察组孕妇阻力指数、搏动指数及S/D明显高于同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组孕妇脐带血丙二醛、氧化蛋白产物水平明显高于对照组,谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。观察组孕妇胎盘中KEAP1 mRNA明显低于对照组,Nrf2、Are、NOQ1及HO-1 mRNA明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组孕妇胎盘中KEAP1 mRNA表达水平与脐动脉阻力指数及搏动指数呈负相关,Nrf2、Are、NOQ1、HO-1 mRNA表达水平与脐动脉阻力指数、搏动指数呈正相关。观察组孕妇胎盘中Caspase-3、Beclin-1、LC3-ⅡmRNA明显高于对照组,Survivin、X连锁凋亡抑制蛋白mRNA相对表达量明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组孕妇胎盘中Survivin、X连锁凋亡抑制蛋白mRNA表达水平与脐动脉阻力指数、搏动指数呈负相关,Caspase-3、Beclin-1、LC3-ⅡmRNA表达水平与脐动脉阻力指数及搏动指数呈正相关。结论胎儿宫内缺氧的脐血流超声特征为阻力增加、血流量减少,且与孕妇胎盘中氧化应激损伤和细胞凋亡程度明显相关。
张磊磊陈艳李玲峰
关键词:超声胎儿宫内缺氧氧化应激细胞凋亡
降低灰飞虱产卵量的细胞凋亡基因及其应用
本发明公开了一种降低灰飞虱产卵量的细胞凋亡基因及其应用,所述降低灰飞虱产卵量的基因片段序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明筛选出能导致灰飞虱产卵量显著性降低的细胞凋亡基因,通过...
郭燕

相关作者

郭燕
作品数:12被引量:4H指数:1
供职机构:中山大学
研究主题:灰飞虱 沉默基因 产卵量 细胞凋亡基因 大学生
徐颖
作品数:50被引量:44H指数:4
供职机构:复旦大学
研究主题:结核病疫苗 重组卡介苗 结核分枝杆菌 结核疫苗 穿梭质粒
王洪海
作品数:262被引量:727H指数:15
供职机构:复旦大学
研究主题:结核分枝杆菌 结核杆菌 结核病 结核病疫苗 分枝杆菌
黎强
作品数:26被引量:178H指数:9
供职机构:广西中医药大学基础医学院
研究主题:手法 膝关节软骨 膝关节 逍遥散 细胞凋亡
郑铁牛
作品数:11被引量:74H指数:5
供职机构:广西中医药大学附属瑞康医院
研究主题:膝关节软骨 逍遥散 膝关节 手法 细胞凋亡