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人血管内皮生长因子165和人组织基质金属蛋白抑制剂1基因过表达对心肌梗死大鼠的作用
2021年
目的探讨携带人血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor 165, VEGF165)的重组腺病毒(Ad-hVEGF165)和携带人组织基质金属蛋白抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1, TIMP-1)的重组腺病毒(Ad-hTIMP-1)对心肌梗死大鼠的作用及可能机制。方法健康雄性清洁级8周龄Wistar大鼠30只,采用随机数字表法随机分为5组,假手术组(Sham),空载病毒对照组(Ad-Track),Ad-hVEGF165组,Ad-hTIMP-1和双基因组(hVEGF165+hTIMP-1),每组6只。除Sham组外,各组大鼠均结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,以心电图出现ST段弓背抬高,Q波或T波倒置,局部心肌变白为模型成功。分别在心肌梗死区域四点注射相应重组腺病毒病毒生理盐水稀释液100 μL(1×1010 VP/100 μL);Sham组未予任何处理。4周后实验动物完成超声心动图检测后处死取心脏组织。免疫组织化学检测大鼠心肌组织hVEGF165和hTIMP-1基因表达;实时荧光定量PCR检测各组大鼠心肌组织凋亡相关因子mRNA表达;免疫组织化学检测各组大鼠心肌组织凋亡相关因子蛋白表达。正态分布计量资料多组间均数比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果超声心动图检测结果显示:Ad-Track组心率(heart rate,HR)(480.83±24.09)次/min、左室舒张末径(left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD)(6.88±0.44)mm、左室收缩末径(left ventricular end-systolic dimension,LVESD)(4.85±0.42)mm均较Sham组(433.16±17.86)次/min、(6.20±0.45)mm、(4.06±0.70),增加(P<0.05),左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)(62.70±3.17)、左室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS)(29.52±1.88)%均较Sham组(72.78±5.44)%、(37.20±4.71)%显著降低(P<0.01);hVEGF165-hTIMP-1组LVEF(71.50±6.23)%、LVFS(36.17±5.27)%均显著高于Ad-Track组(P<0.01),LVEDD(6.22±0.39)mm、LVESD(4.13±0.23)mm均低于Ad-Track组(P<0.05);hVEGF165-hTIMP-1组LVEF、LVFS均高于Ad-hVEGF165组(64.65±4.00)%�
宋衍秋毛用敏耿华张莹师莹任珉徐美林郭志刚
关键词:血管内皮生长因子165基因治疗
组织基质金属蛋白抑制剂-2的表达纯化及活性鉴定被引量:6
2020年
组织基质金属蛋白抑制剂-2(TIMP-2)抑制肿瘤迁移及侵袭。文中以人TIMP-2为研究对象,探索人TIMP-2蛋白的原核表达特征,并进行纯化及活性鉴定。以人肺癌A549细胞的总RNA反转录得到的cDNA为模板,克隆人TIMP-2基因,构建pET28a重组表达载体;经切检测和测序分析的重组表达载体pET28a-TIMP-2转入大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并对表达条件进行优化。经镍亲和柱纯化后,用Western blotting法鉴定融合蛋白His-TIMP-2,并用明胶谱法检测融合蛋白的活性。研究发现融合蛋白His-TIMP-2在E.coli BL21(DE3)中以包涵体的形式存在;在一定范围内,IPTG浓度对His-TIMP-2的表达量没有显著影响;而在该表达系统中,诱导温度和时间是关键参数,His-TIMP-2的表达量随诱导温度升高而增加;纯化并复性后的融合蛋白His-TIMP-2能有效抑制人肺癌A549细胞表达的基质金属蛋白的活性。具有活性的融合蛋白的获得为后续深入研究人TIMP-2的功能及机制奠定基础,并对肿瘤治疗具有重要意义。
薛爱英冯国兴朱长春樊赛军
关键词:基质金属蛋白酶抑制剂-2重组表达载体包涵体基质金属蛋白酶
组织基质金属蛋白抑制剂-1表达与卵巢癌卡铂耐药相关性临床研究被引量:2
2018年
目的讨论组织基质金属蛋白抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1(TIMP1))与卵巢癌卡铂化疗耐药的关系及临床意义。方法收集北京市三甲医院2013年3月至10月卵巢上皮性癌组织共计54例,根据三磷酸腺苷肿瘤体外药物敏感性检测(ATP-TCA)结果将其分为卡铂敏感组(14例)、轻度敏感组(23例)和耐药组(17例)。采用免疫印迹法检测各组TIMP1蛋白的表达并用RT-q PCR检测TIMP1的m RNA的表达。结果 (1)耐药组TIMP1的蛋白表达(2.036±0.697,n=17)显著高于敏感组(0.548±0.328,n=14)及轻度敏感组(0.794±0.342,n=23),三组比较,差异有统计学意义(P=0.000);TIMP1耐药组m RNA耐药组表达(1.725±0.167,n=17)显著高于敏感组(0.396±0.228,n=14)及轻度敏感组(0.672±0.441,n=23),差异有统计学意义(P=0.000)(2)TIMP1蛋白在原发、复发及不同病理类型等组织中,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TIMP1表达上调与卵巢癌卡铂化疗耐药有一定相关性,为研究其可能的耐药机制提出新的方向。
沈博强李红霞
关键词:组织基质金属蛋白酶抑制剂-1卵巢癌化疗耐药免疫印迹分析
急性脑梗死患者血清同型半胱氨酸和组织基质金属蛋白抑制剂水平检测及临床意义被引量:5
2018年
急性脑梗死(ACI)是临床常见的中老年疾病,是中老年人群死亡和致残的重要原因。随着人口老龄化的到来,ACI的发病人数也日趋增加。ACI发病率和致残率高,预后差,给家庭和社会造成了极大的经济负担。同型半胱氨酸是体内蛋氨酸经脱甲基等系列生化代谢反应所形成的代谢中间产物,血清同型半胱氨酸水平增高与动脉粥样硬化的发生密切相关^([1]),而动脉粥样硬化是脑梗死的常见诱因。多项研究表明,高同型半胱氨酸血症是初发ACI的独立危险因素^([1,2])。
梁鹏飞雷青梅
关键词:血清同型半胱氨酸急性脑梗死患者组织基质金属蛋白酶抑制剂高同型半胱氨酸血症动脉粥样硬化
烟雾病患者血清基质金属蛋白-9和组织基质金属蛋白抑制剂-1的表达以及与颅内出血的关系被引量:8
2013年
目的探讨烟雾病(MMD)患者血清基质金属蛋白-9(MMP-9)和组织基质金属蛋白抑制剂-1(TIMP-1)的表达以及与颅内出血的关系。方法检测26例有颅内出血的MMD的患者(出血组)、21例无出血的MMD患者(无出血组)及25名健康对照者(正常对照组)的血清MMP-9、TIMP-1水平,并进行比较。结果与正常对照组比较,出血组与无出血组患者血清MMP-9及TIMP-1水平显著升高(均P<0.01)。与无出血组比较,出血组MMP-9/TIMP-1显著增高(P<0.05),MMP-9与TIMP-1水平差异无统计学意义。出血组及无出血组血清TIMP-1与MMP-9水平均呈正相关(r=0.626,r=0.645;均P<0.01)。结论 MMP-9及TIMP-1在MMD患者血清中表达显著升高。MMP-9与TIMP-1比例失衡可能是引起MMD患者颅内出血的重要机制。
张皆德程道宾吕芳李宁虎卢非
关键词:烟雾病基质金属蛋白酶-9组织基质金属蛋白酶抑制剂-1颅内出血
脑出血大鼠血肿周围脑组织含水量与基质金属蛋白-9、组织基质金属蛋白抑制剂-1及谷氨酸表达水平的关系被引量:6
2012年
目的探讨脑出血大鼠血肿周围脑组织含水量与基质金属蛋白-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白抑制剂-1(TIMP-1)及谷氨酸表达水平的关系。方法雄性Wistar大鼠48只,随机分为正常对照组(n=8)、假手术组(n=8)、脑出血组(n=32),脑出血组又分为脑出血后12 h、24 h、72 h、7 d 4个亚组,每亚组8只大鼠。采用自体血尾状核注入法制备脑出血模型。采用干湿重法测定脑含水量,免疫组化法检测血肿周围脑组织MMP-9、TIMP-1及谷氨酸的表达。结果脑出血组各时间点亚组大鼠血肿周围脑组织含水量与MMP-9、TIMP-1及谷氨酸表达水平均显著高于正常对照组和假手术组(均P<0.01)。脑出血组中,72 h亚组大鼠脑组织含水量及MMP-9、TIMP-1表达水平最高(P<0.01);24 h亚组大鼠脑组织谷氨酸表达水平最高(P<0.01)。多重线性回归分析结果显示,脑组织含水量(Y)与脑组织MMP-9(X1)及谷氨酸(X3)表达水平呈直线关系,多元回归方程为Y=68.894+0.281X1-0.052X3。结论脑出血后血肿周围组织含水量及MMP-9、TIMP-1、谷氨酸的表达水平明显增高,MMP-9、谷氨酸在脑出血后血肿周围组织水肿的发生发展中具有重要作用。
贺燕戴宏伟姬林蔡敏王兴臣
关键词:脑出血脑组织含水量基质金属蛋白酶-9组织基质金属蛋白酶抑制剂-1谷氨酸
中青年脑梗死患者颈动脉粥样硬化及其血清基质金属蛋白-9、组织基质金属蛋白抑制剂-1、超敏C反应蛋白水平的改变被引量:21
2012年
目的研究中青年脑梗死患者颈动脉粥样硬化及其血清基质金属蛋白-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白抑制剂-1(TIMP-1)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平的改变。方法应用彩色多普勒超声仪探测42例急性脑梗死患者(ACI组)、29例无症状颈动脉硬化患者(ACA组)及17名健康体检者(NC组)的双侧颈动脉粥样硬化的情况。采用联免疫吸附法检测各组血清MMP-9和TIMP-1水平,免疫散射比浊法检测血清hs-CRP水平。结果 NC组均未检出颈动脉粥样硬化斑块。ACI组易损斑块的比例(69.2%)及检出率(47.6%)均明显高于ACA组(46.4%,20.7%)(均P<0.05)。ACI组血清MMP-9、TIMP-1、hs-CRP水平及MMP-9/TIMP-1比值均明显高于ACA组(均P<0.05);ACA组血清MMP-9、TIMP-1、hs-CRP水平均明显高于NC组(均P<0.05)。ACI组中,易损斑块亚组血清MMP-9、TIMP-1、hs-CRP水平及MMP-9/TIMP-1比值均明显高于稳定斑块亚组(均P<0.05);稳定斑块亚组血清MMP-9、TIMP-1、hs-CRP水平均明显高于无斑块亚组(均P<0.05)。结论血清MMP-9、TIMP-1、hs-CRP可作为反映颈动脉粥样硬化及斑块稳定性的血清学指标。MMP-9/TIMP-1比值增高及颈动脉易损斑块可能提示中青年脑梗死的风险。
徐梦怡周俊山刘宇恺张利贞
关键词:中青年基质金属蛋白酶-9组织基质金属蛋白酶抑制剂-1颈动脉粥样硬化
结直肠癌患者血清组织基质金属蛋白抑制剂-1水平及其临床意义
2011年
目的检测结直肠癌患者血清组织基质金属蛋白抑制剂-1(TIMP-1)水平并探讨其临床意义。方法采用联免疫吸附分析法(ELISA)对64例经病理证实的术前结直肠癌患者、40例结直肠良性病患者和40例健康体检者血清TIMP-1水平进行检测。结果结直肠癌患者血清TIMP-1水平明显高于结直肠良性病患者和健康体检者(P〈0.001);结直肠癌患者血清TIMP-1水平与性别、年龄、肿瘤大小及淋巴结转移不相关(P〉0.05),与肿瘤分期、远处转移有关(P〈0.05),肿瘤细胞分化程度低的患者血清TIMP-1水平高于细胞分化程度高的患者(P〈0.05)。结论血清TIMP-1水平与结直肠癌的肿瘤分期、远处转移及分化程度有关,可能是一个判断结直肠癌预后的生物学指标。
刘斌骆红黄世锋
关键词:结直肠癌组织基质金属蛋白酶抑制剂-1血清
血清基质金属蛋白9和组织基质金属蛋白抑制剂1与急性脑梗死的临床关系被引量:2
2009年
目的探讨脑梗死患者血清基质金属蛋白9(MMP-9)和组织基质金属蛋白抑制剂1(TIMP-1)的动态变化及对临床预后的影响。方法选择急性脑梗死患者60例,按照TOAST分型方法将脑梗死患者分为3组,心源性脑栓塞(CE)组,大动脉粥样硬化性卒中(LAA)组,腔隙性脑梗死(SA)组,每组20例;另选健康体检者20例作为对照组,分别测定急性脑梗死患者发病24 h内,第5、10天的血清MMP-9、TIMP-1含量,记录患者入院时的美国国立卫生研究所脑卒中量表(NIHSS)评分;记录发病1、6个月时的Barthal指数(BI)来评价顸后。结果发病后24 h内,脑梗死各组患者血清MMP-9、TIMP-1含量较对照组均明显升高(P<0.05),其中,CE组和LAA组MMP-9、TIMP-1含量持续至第5天仍未下降.而SA组已逐渐降至正常水平。发病后24 h内血清MMP-9含量与相应时间段NIHSS评分呈正相关。近期预后较好患者发病24 h内血清MMP-9含量明显低于预后较差患者(P<0.05)。结论MMP-9与病情的严重程度有关。脑梗死后24 h内的血清MMIP-9含量是预后的独立预测因素。
陶定波姜秀丽雷阳洪晓军孙大勇
关键词:基质金属蛋白酶9金属蛋白酶1组织抑制剂脑梗塞预后
胃癌组织基质金属蛋白-2和组织基质金属蛋白抑制剂-2的表达及其与临床病理特征的关系被引量:2
2009年
目的探讨基质金属蛋白-2(MMP-2)和组织基质金属蛋白抑制剂-2(TIMP-2)在人胃癌组织中的表达,及其与胃癌临床病理特征的关系。方法选取100个胃癌手术切除标本中胃癌组织、癌旁组织及正常胃组织,采用免疫组织化学法检测MMP-2和TIMP-2蛋白的表达,并分析两者的表达及其与胃癌临床病理特征之间的相关性。结果胃癌组织中的MMP-2蛋白阳性率为77.0%,显著高于癌旁组织的33.0%和正常胃组织的8.0%(P值均<0.01),癌旁组织又显著高于正常胃组织(P<0.01)。胃癌组织中的TIMP-2蛋白阳性率为29.0%,显著低于癌旁组织的62.0%和正常胃组织的76.0%(P值均<0.01),癌旁组织又显著低于正常胃组织(P<0.01)。随着肿瘤浸润深度的增加(Tis~T4)、周围淋巴结转移的增多(N0~N3)、临床分期的进展(0~Ⅳ期),MMP-2蛋白阳性率逐渐升高,TIMP-2蛋白阳性率逐渐降低,且差异有统计学意义(P值均<0.01)。结论MMP-2和TIMP-2的表达可能与胃癌的发生、侵袭和转移有关,检测MMP-2和TIMP-2的表达有助于预测胃癌转移。
倪元峰罗天航聂明明马立业毕建威华积德
关键词:基质金属蛋白酶-2胃癌临床病理特征

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