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小地老虎精氨酸激酶基因的分子特征与生物学功能分析
小地老虎Agrotis ipsilon 属鳞翅目夜蛾科,是一种重要的农业害虫。精氨酸激酶(arginine kinase,AK)参与昆虫能量代谢,在昆虫生长发育中发挥重要作用,被认为是可用于害虫防治的RNA干扰(RNAi...
朱卫星
关键词:小地老虎精氨酸激酶RNA干扰
蜕皮激素和保幼激素对淡色库蚊精氨酸激酶基因CpAK1和CpAK2表达的影响
2024年
目的了解淡色库蚊精氨酸激酶基因CpAK1和CpAK2的表达是否受蜕皮激素和保幼激素及其信号通路的影响。方法采用反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法,分别检测蜕皮激素20-羟基蜕皮酮(20E)和保幼激素类似物(烯虫酯)处理不同时间后淡色库蚊CpAK1和CpAK2的mRNA和蛋白表达水平。RNA干扰蜕皮激素信号通路相关基因CpBR-C、CpECR以及蜕皮激素信号通路相关基因CpMet、CpKr-h1后,分别检测CpAK1和CpAK2的mRNA表达水平。结果用20E蛹期注射处理,24 h后CpAK1的mRNA表达水平显著下调至19.77%,而CpAK2的mRNA表达水平在处理后6 h和12 h分别上调5.70和2.77倍。20E处理6 h后CpAK1的蛋白表达水平显著下调而CpAK2的蛋白表达水平无明显变化。用烯虫酯蛹期注射处理,CpAK1的mRNA表达水平24 h后显著上调3.36倍,而CpAK2的mRNA表达水平在6 h和12 h分别下降至46.81%、39.34%。烯虫酯处理6 h和12 h后CpAK1蛋白表达水平显著上调,而CpAK2的蛋白表达水平显著下调。干扰CpBR-C导致CpAK1的mRNA表达水平上调2.35倍,而CpAK2的mRNA表达水平下调,仅为对照的2.80%。干扰CpECR后CpAK1表达水平显著上调8.13倍,而CpAK2表达水平显著下调42.79%。CpMet的沉默导致CpAK1表达水平下调至43.87%,而CpAK2表达水平显著上调3.05倍。干扰CpKr-h1基因导致CpAK1表达水平显著下调至13.59%,而CpAK2表达水平显著上调4.35倍。结论20E对CpAK1的表达负调控,对CpAK2正调控。烯虫酯对CpAK1的表达正调控,对CpAK2负调控。干扰CpBR-C和CpECR导致CpAK1显著上调,CpAK2显著下调。干扰CpMet和CpKr-h1基因后CpAK1显著下调,而CpAK2显著上调。淡色库蚊化蛹到羽化阶段,2种精氨酸激酶的表达水平受蜕皮激素和保幼激素调节,总体保持相对恒定,这种调节机制对于维持三磷酸腺苷(ATP)的稳态具有重要意义。
钱坤关晴晴覃盛锋王扬
关键词:淡色库蚊精氨酸激酶蜕皮激素保幼激素
精氨酸激酶基因AK作为靶点在防治朱砂叶螨中的应用
本发明公开了精氨酸激酶基因AK作为靶点在防治朱砂叶螨中的应用。本发明提供了TcAK基因作为靶标在防治朱砂叶螨中的应用。本发明还提供了一种防治朱砂叶螨的方法,包括如下步骤:以TcAK基因为靶标,降低或抑制所述TcAK基因的...
卜春亚王谦稳王佳琛
拟穴青蟹精氨酸激酶的重组表达及致敏性分析
2024年
为比较拟穴青蟹(Scylla paramamosain)重组精氨酸激酶(recombinant arginine kinase,rAK)和天然AK(native AK,nAK)的致敏性,并鉴定AK分子中的致敏优势区域,首先基于AK的抗原表位分布与空间结构,将AK分子分为AK-E1(氨基酸(amino acids,AA)1~92)、AK-E2(AA 87~187)、AK-E3(AA 172~265)和AK-E4(AA 276~357)4个片段,采用大肠杆菌原核表达系统对其进行分段表达,并分别分离纯化nAK、rAK及AK的4个分段表达产物。用BALB/c小鼠模型评价重组蛋白的致敏性,结果显示,rAK致敏小鼠血清中特异性抗体水平、脾脏淋巴细胞的Th2型细胞因子释放水平均显著升高,表明rAK可使机体致敏,但其免疫原性较nAK弱;AK的4个分段表达产物中AK-E2的免疫原性最强。同时,rAK能够刺激RBL-2H3细胞释放β-己糖苷酶,但rAK对效应细胞的刺激作用低于nAK;4个分段表达产物中AK-E2和AK-E4对效应细胞的刺激作用较强。综上,通过原核表达系统获得的rAK免疫原性较nAK弱,而AK分子中免疫原性较强的区域为AA 87~187,免疫反应性较强的区域为AA 276~357。
杨阳杨阳何少贵陈锦莉刘萌费丹霞毛海燕毛海燕
关键词:拟穴青蟹精氨酸激酶重组蛋白致敏性BALB/C小鼠
一种凡纳滨对虾精氨酸激酶基因LvAK1及其应用
本发明属于水产养殖分子生物学领域,具体涉及一种凡纳滨对虾精氨酸激酶基因<I>LvAK1</I>及其应用。本发明通过基因表达分析和生长情况分析,在凡纳滨对虾精氨酸基因<I>LvAK1</I>上设计RT‑qPCR扩增引物Lv...
杨铭张晓军黄永强游小艇杨小强马鸿媚翁蓁洲王伟
绵羊痒螨重组精氨酸激酶诱导兔皮肤嗜酸性粒细胞的聚集
2023年
本研究旨在探究绵羊痒螨精氨酸激酶(arginine kinase of Psoroptes ovi s,Pso AK)对兔皮肤嗜酸性粒细胞聚集的影响。以永生化角质形成细胞(HaCaT)和痒螨致敏兔分别为体外模型和体内模型,重组Pso AK(r Pso AK)分别刺激HaCaT细胞和皮内注射痒螨致敏兔后,采用RT-qPCR检测重组蛋白处理后HaCaT细胞和注射部位兔皮肤组织中与嗜酸性粒细胞聚集相关因子(IL-4、IL-5、IL-13、TSLP、IL-25、IL-33、CCL5、CCL11、IL-4R)转录水平,以及通过变色酸2R特殊染色观察,并统计兔皮肤组织中聚集的嗜酸性粒细胞数量。结果表明,与空白和载体蛋白对照组相比,0.1μg·mL^(-1)r Pso AK可显著促进HaCaT细胞中IL-13、IL-33、CCL5和CCL11转录水平的增加(P<0.05),以及兔皮肤内IL-4R和CCL5转录水平的增加(P<0.01),其他因子无显著变化(P>0.05);同时,与PBS和载体蛋白对照组相比,r Pso AK可诱导皮肤中嗜酸性粒细胞的数量极显著增加(P<0.001)。综上所述,Pso AK能够促进部分嗜酸性粒细胞聚集相关细胞因子和趋化因子转录水平的增加,且诱导兔皮肤内嗜酸性粒细胞的聚集,表明Pso AK是引发痒螨病皮损区嗜酸性粒细胞聚集的抗原分子,其参与了绵羊痒螨感染的致病过程。
黄翠锐郝桂英周宇田焱杨富升唐丽杨光友谢跃何冉徐璟古小彬
关键词:绵羊痒螨皮肤
表位定向突变影响口虾蛄精氨酸激酶免疫反应性和结构的研究
食物过敏是由免疫球蛋白E(Immunoglobulin E,IgE)介导的Ⅰ型超敏反应,往往伴随着一系列不良反应。中国过敏人群主要对虾蟹为代表的甲壳类水产食物过敏。本研究以口虾蛄(Oratosquilla oratori...
陈业欣
关键词:口虾蛄抗原表位精氨酸激酶
重组疥螨精氨酸激酶对宿主外周血单个核细胞(PBMCs)免疫功能的调节
疥螨病是一种分布广泛的体外寄生虫病,其地理分布和寄生的宿主种类数量均呈持续增长趋势,该病影响经济动物生长发育,严重时会导致动物死亡。同时,疥螨病也是重要的人兽共患寄生虫病,并于2017年被列入易被忽视的热带病名单,每年全...
徐燕婷
关键词:疥螨精氨酸激酶外周血单个核细胞TH1/TH2
一种中肠细菌介导的小菜蛾精氨酸激酶基因PxAK的RNAi方法及其应用
本发明属于基因工程领域,具体涉及一种中肠细菌介导的小菜蛾精氨酸激酶基因PxAK的RNAi方法。所述RNAi方法为:构建表达小菜蛾精氨酸激酶基因PxAK的dsRNA的质粒,转入中肠细菌的RNaseIII缺陷突变体中,得到表...
杨广于佳靖陈金芝
三疣梭子蟹精氨酸激酶的纯化鉴定、生物信息学预测和致敏性分析
食物过敏是过敏性流行病之一,仅次于哮喘病,影响着全球2%~4%的成人和儿童的健康和生命。八大类常见食物过敏原有大豆、花生、小麦、坚果、牛奶、鸡蛋、甲壳类、鱼类,其中水产品占据两类。作为广受青睐的甲壳类水产品,三疣梭子蟹与...
李婉贞
关键词:液质联用

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傅玲琳
作品数:261被引量:408H指数:12
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研究主题:食物过敏 原肌球蛋白 试剂盒 生物胺 过敏
周瑾茹
作品数:70被引量:4H指数:1
供职机构:浙江工商大学
研究主题:甲壳类 试剂盒 核酸适配体 小干扰核糖核酸 原肌球蛋白
郭淑元
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研究主题:精氨酸激酶 激酶 亚基 晶体结构 偶联
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作品数:365被引量:1,134H指数:16
供职机构:浙江工商大学
研究主题:食物过敏 原肌球蛋白 凝结芽孢杆菌 生物胺 益生菌
谷瑞增
作品数:173被引量:506H指数:13
供职机构:中国食品发酵工业研究院
研究主题:肠膜明串珠菌 低聚肽 发酵制品 培养基成分 免疫调节