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基于人工稀有密码子L-赖氨酸高产菌株筛选研究
L-赖氨酸是人类和哺乳动物的必需氨基酸之一,广泛应用在食品行业、饲料工业、医药行业和化妆品等领域中。目前L-赖氨酸已成为全球需求量第二大氨基酸,因此选育高产、低成本、遗传稳定性好的生产菌株已成为该行业的关键目标,但目前L...
杨翠平
关键词:L-赖氨酸稀有密码子高通量筛选启动子FACS
用于CON-稀有密码子的TREM组合物及相关用途
本发明总体上涉及对应于con‑稀有密码子的基于tRNA的效应分子(TREM)的用途及其制备方法。
C.E.哈杰丁D.A.贝里T.阿纳斯塔西亚迪斯N.B.阿费扬
谷氨酸棒杆菌L-赖氨酸稀有密码子设计及应用研究
L-赖氨酸是可用于蛋白质合成的天冬氨酸家族中唯一一个在ε-碳原子上带有伯氨基侧链的碱性氨基酸。L-赖氨酸参与生物体中的蛋白质合成、能量代谢和脂肪代谢,是参与人体代谢平衡的八大必需氨基酸之一。目前商品化的L-赖氨酸主要以L...
王大涛
关键词:L-赖氨酸稀有密码子全基因组测序谷氨酸棒杆菌
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一种利用稀有密码子在翻译水平调控基因表达的方法
转录水平的基因表达调控需要严谨调控的启动子,同时要求启动子具有可诱导、可放大。现有基因表达调控系统诱导剂价格昂贵且需要特定培养基成分很难用于大规模发酵。将代谢途径基因中的氨基酸密码子替换成其稀有形式,可通过是否补加相应氨...
霍毅欣郑博王宁
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拟南芥SHORT-ROOT基因稀有密码子分析及其在原核细胞中的表达和纯化
2016年
目的:在大肠杆菌中重组表达拟南芥SHORT-ROOT(SHR)蛋白并纯化。方法:将SHR基因编码区克隆至p GEX-4T-2表达载体,构建重组质粒p GEX-4T-2-SHR并转化大肠杆菌Rosetta(DE3),表达产物经谷胱甘肽亲和层析凝胶4B分离纯化,SDS-PAGE分析和Western印迹鉴定。结果:SHR融合蛋白在大肠杆菌Rosetta(DE3)中获得表达,亲和纯化后,SDS-PAGE显示相对分子质量为预期的86×103,且经Western印迹确证。结论:获得了拟南芥SHR融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。
孙验玲郑玲穆春华于倩倩何春梅耿骁渝郑红霞刘霞
关键词:拟南芥稀有密码子原核表达纯化
稀有密码子改造的人ZNF580基因及该基因原核表达的蛋白及多克隆抗体
本发明公开了一种稀有密码子改造的人ZNF580基因及该基因原核表达的蛋白及多克隆抗体,稀有密码子改造的人ZNF580基因,是SEQ ID No.1所示。本发明改造了人ZNF580基因中的稀有密码子,得到稀有密码子改造的人...
张文成李海生牟心红
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稀有密码子影响人RNaseH-Apaf1融合蛋白原核表达被引量:2
2015年
通过限制性内切酶克隆法构建两个pET-28a-TAT-RNaseH-Apaf1重组质粒,其中一个质粒经过稀有密码子的优化。将两个重组质粒分别转化原核表达宿主菌BL21(DE3)和Transetta(DE3),通过SDS-PAGE观察相应融合蛋白诱导表达的情况,并用His标签抗体和Apaf1抗体通过Western Blotting鉴定诱导蛋白。菌液PCR和测序证明经稀有密码子优化和未经稀有密码子优化的人源RNaseH-Apaf1序列成功重组到pET-28a-TAT载体中;经稀有密码子优化的重组质粒成功地在大肠杆菌宿主菌中表达RNaseH-Apaf1融合蛋白,并用Western Blotting检测到该融合蛋白。结果表明,稀有密码子可影响人RNaseH-Apaf1融合蛋白的原核表达。
兰泓孔劭凡李慎涛张玉祥
关键词:稀有密码子原核表达
稻瘟菌MgCYP51B基因稀有密码子和mRNA二级结构分析与表达优化被引量:5
2014年
在大肠杆菌中异源表达稻瘟菌CYP51(P450-14DM,MgCYP51B)基因,通过对MgCYP51B进行跨膜区预测和同源模建分析,并截短稻瘟菌CYP51B基因,构建了9种不同的重组表达质粒以实现蛋白表达.结果表明:只有pET28-MgB-83在3种宿主菌中实现了表达,且在BL21(DE3)pLysS中表达量最大.通过对稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构进行分析,发现稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构稳定性对MgCYP51B蛋白的表达都有影响,适用于稀有密码子表达的Rossetta(DE3)并不适用于MgCYP51B基因的最优表达.同时只有翻译起始区二级结构自由能最低的pET28-MgB-83才能实现表达.本研究实现了稻瘟菌MgCYP51B基因在大肠杆菌中的异源表达,证实密码子的偏爱性和翻译起始区二级结构稳定性影响MgCYP51B蛋白表达.
齐婷刘婧李倩余金辉袁永泽刘德立
关键词:翻译起始区稀有密码子
稀有密码子改造的人ZNF580基因及该基因原核表达的蛋白及多克隆抗体
本发明公开了一种稀有密码子改造的人ZNF580基因及该基因原核表达的蛋白及多克隆抗体,稀有密码子改造的人ZNF580基因,是SEQ ID No.1所示。本发明改造了人ZNF580基因中的稀有密码子,得到稀有密码子改造的人...
张文成李海生牟心红
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稀有密码子对人源Id2基因表达的影响被引量:4
2013年
目的:通过对人Id2基因的稀有密码子进行突变并构建原核表达重组质粒,在大肠杆菌(escherichia coli,E.coli)中表达Id2蛋白,分析稀有密码子对Id2基因表达的影响。方法:PCR扩增突变Id2基因序列,然后转入E.coli BL21中进行表达,利用镍离子亲和层析、离子交换层析及分子筛纯化。结果:正确构建了Id2基因的基因突变表达质粒,基因突变表达的Id2蛋白在E.coli BL21中为可溶性上清表达,成功纯化了目的蛋白,且分子筛结果显示其在溶液中呈现二聚体状态。结论:稀有密码子对Id2蛋白在E.coli BL21中大量可溶性上清表达有重要影响。
杨伟周华赵沙沙金丽郭珍张绍城陈检汪德强
关键词:ID2突变纯化

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黄群
作品数:313被引量:2,053H指数:22
供职机构:福建农林大学食品科学学院
研究主题:卵白蛋白 醋酸发酵 香醋 蛋白 蛋白质
李述刚
作品数:181被引量:378H指数:11
供职机构:塔里木大学
研究主题:红枣 核桃 南疆 烘干机 营养成分
马美湖
作品数:790被引量:3,400H指数:26
供职机构:华中农业大学食品科学技术学院
研究主题:禽蛋 鸡蛋 蛋清 皮蛋 溶菌酶
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作品数:10被引量:13H指数:2
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研究主题:CDNA 大肠杆菌 克隆 稀有密码子 白细胞介素5
李慎涛
作品数:41被引量:94H指数:4
供职机构:首都医科大学基础医学院
研究主题:融合蛋白 原核表达 克隆 蛋白纯化 肌生成抑制素