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GGTA1基因敲除猪去细胞神经移植物制备及其异种移植免疫排斥反应初步研究
2025年
目的制备α-1,3-半乳糖转移酶(alpha-1,3-galactosyltransferase,GGTA1)基因敲除猪去细胞神经移植物,初步探讨其用于异种移植的生物相容性。方法无菌条件下获取野生猪、GGTA1基因敲除猪坐骨神经行去细胞处理。采用IB4荧光染色以及ELISA法检测α-半乳糖抗原(alpha-galactosidase,α-gal)含量,以鉴定基因敲除猪坐骨神经GGTA1基因敲除情况,以人坐骨神经作对照;HE染色及扫描电镜观察神经结构;免疫荧光染色和DNA含量测定评价神经去细胞程度。于14只裸鼠脊柱两侧制备皮下囊,各取7只分别植入野生猪、基因敲除猪去细胞神经,1、3、5、7 d后抽血行中性粒细胞计数。结果基因敲除猪神经IB4荧光染色及ELISA检测示GGTA1基因已基本成功敲除。基因敲除猪去细胞神经HE染色示神经结构保存良好,扫描电镜下可见神经内膜管状结构,免疫荧光染色示未见细胞核且保留了天然神经细胞外基质成分,DNA含量较正常神经显著降低(P<0.05)。体内实验示术后1、3、7 d两组中性粒细胞数相似,差异无统计学意义(P>0.05);术后5 d时,基因敲除猪去细胞神经中性粒细胞数低于野生猪,差异有统计学意义(P<0.05)。结论研究制备的GGTA1基因敲除猪去细胞神经移植物,其神经结构保存良好、去细胞完全、保留了天然神经内膜管状结构和成分,体外实验初步验证异种移植后免疫排斥反应低。
刘宇立赵金娟宋翔宇贾志博李超超张铁元李香玲闫石何瑞超彭江
关键词:周围神经去细胞基质异种移植
具有导电能力的脱细胞组织神经移植物支架的制备方法
本发明公开了一种具有导电能力的脱细胞组织神经移植物支架的制备方法,属于生物材料领域。该方法包括以下步骤:分离胚胎期脐带组织,并去除细胞和脂质,随后进行冷冻干燥;采用化学蚀刻法制备碳化钛单层纳米片溶液,采用光引发剂的磷酸缓...
柴人杰张彬胡扬楠程红
一种组织工程化周围神经移植物的培养方法及系统
本发明公开了一种组织工程化周围神经移植物的培养方法和系统。本发明根据获取培养组织工程化周围神经移植物过程中未与需要进行神经移植的培养组织工程化周围神经移植物匹配的切片图像。将所有图像中的特征向量组合成一个特征三维矩阵。根...
张阳李静张晓峰肖晓珍张超李倩雯陈灿杨越雄
角膜神经移植神经营养性角膜病治疗中的应用
2024年
神经营养性角膜病变(NK)是一种退行性疾病,其中角膜神经受损导致角膜感觉减退,严重者可致失明。传统的NK治疗旨在支持角膜愈合和防止角膜损伤的进展。近年来,角膜神经移植在NK中取得了一些进展。与传统治疗相比,角膜神经移植不仅能解决角膜神经缺损的问题,从而避免后续发生的角膜病变;还能显著恢复角膜敏感性、角膜上皮和视力等。角膜神经移植手术主要分为直接角膜神经移植和间接角膜神经移植两大类。如今,该手术方法已逐渐用于临床,并在疱疹病毒和神经瘤引起的单侧NK以及双侧NK上取得了令人满意的临床疗效。然而,对于干眼、糖尿病和慢性青光眼等引起的NK的手术治疗知之甚少。未来可通过多中心前瞻性随机研究来进一步完善针对NK的病因治疗。本文将从角膜神经移植手术的具体术式、手术方式的选择以及手术的时机三个方面介绍这一新型外科技术。
徐三华(综述)吴洁丽邵毅
关键词:神经再生
一种组织工程化周围神经移植物的培养方法及系统
本发明公开了一种组织工程化周围神经移植物的培养方法和系统。本发明根据获取培养组织工程化周围神经移植物过程中未与需要进行神经移植的培养组织工程化周围神经移植物匹配的切片图像。将所有图像中的特征向量组合成一个特征三维矩阵。根...
张阳李静张晓峰肖晓珍张超李倩雯陈灿杨越雄
角膜神经移植术治疗神经营养性角膜病变的研究进展
2024年
神经营养性角膜病变是一种与角膜神经退行性改变有关的疾病,表现为角膜神经的知觉和营养功能受损,导致角膜上皮缺损、角膜溃疡和角膜穿孔。目前对神经营养性角膜病变的主要治疗方式有药物治疗、非手术干预治疗和手术治疗,但是对于重度病变患者行药物治疗、非手术干预治疗通常效果不佳。对未恢复角膜神经营养功能的患者行角膜移植术,可能导致角膜移植术后上皮持续不愈合,因此恢复角膜神经营养功能是该类患者复明的重要前提。角膜神经移植术是重度神经营养性角膜病变患者恢复角膜神经营养功能,提高角膜知觉,改善角膜透明度的重要和有效的治疗方法。角膜神经移植术通过将具有正常功能的供体神经移植到麻痹眼角膜缘周围,使神经末梢重新长入角膜基质,恢复角膜知觉功能。随着角膜神经移植术的术式的不断改进,其良好的术后效果和优点已经渐渐凸显。文章基于作者结合团队在角膜神经移植术方面经验结合近年研究进展阐述了神经营养性角膜病变的治疗手段和不同术式在角膜神经移植术中的应用,并进行展望。
林丽霞田东岳林珣珣许扬滨顾建军
关键词:神经移植
他克莫司不同给药方式在同种异体神经移植中对神经再生的影响
2024年
周围神经损伤(Peripheral nerve injury,PNI)是临床的常见疾病,损伤后的神经功能恢复是临床医生的比较棘手的问题。去细胞同种异体神经移植(Acellular nerve allograft, ANA)是目前较好的修复受损神经的方式,已在临床完成较多PNI患者的修复,但术后功能恢复不够理想。透明质酸(Hyaluronic acid, HA)和他克莫司(FK-506)以及二者联用已被证明可以促进神经修复,但FK-506给药方式多样,不同给药方式达到的修复效果存在不同,本实验比较FK-506不同给药方式联合在同种异体神经移植中达到的恢复效果。方法 取健康成年雄性SD大鼠20只,取双侧坐骨神经作为异体神经移植供体。取36只SD大鼠按随机数字表法分为3组,每组12只。皮下注射组(A组)ANA吻合口应用HA凝胶并在术后给予FK-506皮下注射7天,灌胃组(B组)ANA吻合口应用HA凝胶并在术后给予FK-506灌胃7天,术中给药组(C组)ANA吻合口应用载有FK-506的HA凝胶。术后3月对3组实验动物行大体观察、坐骨神经功能指数检测、移植神经神经电生理检测、甲苯胺蓝染色后光镜检查。通过SPSS26.0软件对实验所得的数据进行分析检验,对三组实验动物术后神经功能恢复情况进行分析比对。结果 实验共计选取36只SD大鼠,所有实验用鼠均未死亡,部分大鼠因足趾溃疡、神经吻合失败等原因被剔除,3组各剩余10只进入结果分析,结果 分析的每只实验动物术后切口均无感染且愈合良好。通过坐骨神经功能指数、神经电生理检测、组织学染色检测表明A组与B组在促进神经再生和功能恢复的作用上均较C组要好,而A组与B组之间差异无统计学意义。结论 对于FK-506应用于PNI修复,皮下注射与口服这两种给药方式获得的恢复效果无显著性差异,且均优于术中直接给药。
张一楠张琳芦徳智王栋张万里
关键词:周围神经损伤神经移植神经再生
脱细胞异体神经移植物联合电针对坐骨神经损伤大鼠脊神经节的保护作用及机制
2024年
目的探讨脱细胞异体神经移植物(ANA)联合电针对坐骨神经损伤(SNI)大鼠脊神经节的保护作用及机制。方法选取50只雄性SD大鼠,10只制备ANA;40只随机分为正常组、模型组、ANA组和联合组,每组10只。分离右侧坐骨神经,于梨状肌下缘5 mm处去除10 mm制备SNI模型。ANA组将制备好的ANA连接在损伤神经的两断端处。联合组于ANA连接术后2 d采用电子针疗仪电针“环跳穴”和“阳陵泉穴”,15 min/d,7 d为1个疗程,共4个疗程。电生理检测各组大鼠坐骨神经传导速度,评估受损轴突再生情况;尼氏染色观察脊神经节中神经元的形态结构;Western blotting和免疫荧光法检测脊神经节中神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经传导速度明显降低(P<0.01);神经神经元中的尼氏体因肿胀、溶解导致结构不完整,数量显著减少(P<0.01);NGF和BDNF蛋白表达量明显降低(P<0.01)。与模型组比较,ANA组和联合组大鼠坐骨神经传导速度明显增加(P<0.01);神经神经元中尼氏体损伤减弱,数量明显增加(P<0.01);NGF和BDNF蛋白表达量显著升高(P<0.01)。与ANA组比较,联合组大鼠坐骨神经传导速度显著增加(P<0.01);神经神经元中尼氏体形态较规则,数量明显增加(P<0.01);NGF蛋白表达量显著升高(P<0.01)。结论ANA联合电针可提高大鼠坐骨神经传导速度,改善神经节中神经元的形态结构,发挥对脊神经神经元的保护作用,其机制可能与提高神经元中NGF和BDNF蛋白的表达,尤其是NGF蛋白的表达相关。
周泽宇马蕴涵李佳瑞胡余梦袁博张银娟于晓敏付秀美
关键词:脊神经节神经生长因子脑源性神经营养因子坐骨神经损伤免疫印迹法
一种可个性化定制的差异化界面“内芯外鞘”神经移植物的制备方法
本发明涉及一种可个性化定制的差异化界面“内芯外鞘”神经移植物的制备方法,包括:基于荧光标记三维建模获得神经参数后,通过3D打印得到蔗糖模板;该模板置于聚己内酯和脱细胞基质混合溶液中,多次浸没、取出挥发溶剂后,在去离子水中...
孙巍钱运高欣孔令驰范存义游正伟
异种周围神经移植的固有免疫应答及NKG2D在移植排斥中的作用
梁治权

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顾玉东
作品数:841被引量:6,523H指数:42
供职机构:复旦大学
研究主题:臂丛 周围神经 臂丛神经损伤 神经移位 周围神经损伤
蒋电明
作品数:531被引量:2,207H指数:22
供职机构:重庆医科大学附属第一医院
研究主题:纳米羟基磷灰石 纳米羟基磷灰石/聚酰胺66 聚酰胺66 PA66 内固定
卢世璧
作品数:705被引量:4,579H指数:31
供职机构:中国人民解放军总医院
研究主题:软骨 软骨细胞 细胞外基质 关节软骨 生物力学
孟庆刚
作品数:148被引量:246H指数:9
供职机构:哈尔滨工业大学
研究主题:胸腺内注射 皮瓣 皮瓣修复 神经移植 免疫耐受
黄英如
作品数:86被引量:327H指数:10
供职机构:重庆医科大学中医药学院
研究主题:神经再生 异体神经移植 大鼠坐骨神经 中医治疗 异体