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Rho激酶抑制剂Y27632促进人诱导多能干细胞来源原始神经上皮细胞向多巴胺能神经前体细胞的转化
2024年
目的提高人诱导多能干细胞来源原始神经上皮细胞(hiPSCs-NECs)定向诱导中脑多巴胺能神经前体细胞(DAPs)的效率。方法将人iPSCs在含有小分子组合[DMH1(10μmol/L)、SB431542(10μmol/L)、音猬因子(SHH 200 ng/mL)、成纤维细胞生长因8(FGF8100 ng/mL)、嘌吗啡胺(2μmol/L)、CHIR99021(3μmol/L)、N2(1%)]的mTeSRTM培养基中诱导至12 d,细胞分化为原始神经上皮细胞(NECs)。特异性诱导DAPs,将诱导的hiPSCs-NECs用胶原酶IV消化后,在神经分化培养基[添加1%N2、2%B27-A、BDNF(10 ng/mL)、GDNF(10 ng/mL)、AA、TGF-β、cAMP、1%GlutaMax]中加入不同浓度的Rho激酶抑制剂Y27632重新接种,并于次日更换培养基去除Y27632,持续诱导至第28天获得DAPs。结果人iPSCs可在基质胶上稳定传代,表达多潜能性标记物OCT4、SOX2、Nanog和SSEA1,且碱性磷酸酶染色呈阳性。诱导分化至第13天获得hiPSCs-NECs,形成玫瑰花结样结构,能够表达特征性标记物(SOX2、Nestin和PAX6)。将hiPSCs-NECs消化后,添加5μmol/LY27632的hiPSCs-NECs相比较未加Y27632的对照组,细胞解离后贴壁存活率明显增加,处于S期的细胞(P<0.01)与细胞活力显著提高(P<0.01),且凋亡率显著降低(P<0.05),持续诱导至第28天,细胞高表达DAPs特异性的标记物(TH、FOXA2、NURR1和Tuj1)。结论添加Y27632(5μmol/L)24 h可显著提高人iPSCs-NECs细胞向iPSCs-DA神经前体转化时的细胞存活率,并且Y27632去除后,不会影响后续向DA神经前体细胞分化,间接的提高了细胞的分化效率.
李洋洋徐佳佳姜诚诚陈子龙陈颖应梦娇王澳马彩云王春景郭俣刘长青
神经上皮细胞转化因子1在肾细胞癌中的表达及临床意义
2024年
目的 探讨神经上皮细胞转化因子1(NET1)在肾细胞癌(RCC)中的表达及临床意义。方法 收集RCC组织60例、癌旁组织60例、正常肾组织20例。采用免疫组化法检测各组织中NET1表达情况,分析其表达情况与RCC患者临床特征的相关性。结果 60例RCC组织中NET1阳性表达率明显高于癌旁组织和正常肾组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同临床分期、分化程度、淋巴结转移情况、远处转移情况RCC患者RCC组织中NET1表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。RCC组织中NET1阳性表达与临床分期、淋巴结转移、远处转移均呈正相关,与分化程度呈负相关(P﹤0.01)。结论 RCC组织中NET1阳性表达率较高,其阳性表达与RCC患者分化程度、淋巴结转移、远处转移、临床分期相关。
汪建焜何立方亮
关键词:肾细胞癌免疫组化法
新型冠状病毒(SARS-COV-2)感染后人嗅觉神经上皮细胞的基因组调控网络研究
2022年
目的·探索新型冠状病毒(SARS-COV-2)感染人体后,人嗅觉神经上皮细胞的基因组学变化,建立差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)的蛋白互作(protein-protein interactions,PPI)网络等,了解SARS-COV-2感染对人嗅觉神经上皮细胞的影响,为新型冠状病毒肺炎的防治提供参考依据。方法·采用NetworkAnalyst分析公共数据集GSE151973,挑选DEGs,进行基因本体(Gene Ontology, GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)信号通路分析,创建PPI网络、DEGs-microRNA调控网络、转录因子-DEGs调控网络、环境化学物-DEGs调控网络以及药物-DEGs调控网络,使用Cytoscape 3.7.2进行图视化。结果·SAR-COV-2侵袭人嗅觉神经上皮细胞后,基因表达谱部分发生明显上调或下调,共发现了568个DEGs,其中上调基因550个(96.8%),下调基因18个(3.2%);通过富集分析,DEGs主要参与鼻呼吸和嗅觉上皮的内皮发育、血管生成等生物学过程,N端肉豆蔻酰化结构域结合等分子功能表达。PPI网络提示RTP1和RTP2为核心蛋白;MAZ为最具有影响效应的转录因子;Hsa-mir-26b-5p对DEGs的调控作用最明显;环境化学物丙戊酸钠对DEG最具影响;药物乙醇对DEGs的调控最具有影响。结论·感染SAR-COV-2后嗅觉神经上皮细胞基因表达明显改变,SARS-CoV-2可能通过抑制PAX7功能来抑制肌肉卫星细胞的增殖分化。RTP1、RTP2可能通过促嗅觉受体上膜的能力以及其对气味配体反应性抵抗SARS-CoV-2,MAZ可能通过影响细胞的生长、增殖调控DEGs;microRNA、环境化学物和药物在人嗅觉神经上皮细胞抗SAR-COV-2感染过程中也发挥着不可忽视的作用。
解昕轶杨钰萌王少薇孙娜史传道刘启玲张荣强李俊杰
锌指蛋白Broad调节果蝇大脑视叶神经上皮细胞转化的研究
Broad蛋白是BTB转录因子家族的成员,包括Br-Z1,Br-Z2,Br-Z3和Br-Z4四种蛋白质亚型。Broad作为蜕皮激素受体Ec R下游的早期响应因子,被Ec R通路激活表达,从而促进果蝇变态发生过程。在果蝇大...
王慧
关键词:神经上皮细胞
神经上皮细胞转化基因1在肝细胞癌发生发展中的功能和机制研究
研究背景及目的:  原发性肝细胞癌(简称肝癌)是目前最常见的恶性肿瘤之一,其发病率在所有恶性肿瘤中位居全球第六位,病死率高达全球第三位。肝癌的发生发展受多种肿瘤相关基因的调控,包括癌基因的激活及抑癌基因的失活,但确切机制...
陈振华
关键词:肝细胞癌发病机制基因表达
Crb2a结构域在斑马鱼视网膜神经上皮细胞和晶状体上皮细胞顶端黏附连接装配中的调控机制研究
研究背景与目的:  Crumbshomologue1(CRB1)基因突变是导致遗传性视网膜疾病视网膜色素变性(retinitis pigmentosa,RP)的原因之一。CRB1编码的CRBI包含可变的细胞外结构域和保守...
林羽晨
关键词:视网膜色素变性
神经管畸形小鼠胚胎神经上皮细胞的黏弹性特性被引量:1
2018年
目的探索胚胎神经上皮细胞力学特性与神经管闭合之间的关系。方法用全反式维甲酸对胚胎发育第7.5天的小鼠进行灌胃处理,制备小鼠神经管畸形(NTDs)模型。分别于胚胎发育第9.5天与11.5天处死孕鼠,提取正常及神经管畸形原代神经上皮细胞,采用微管吸吮技术结合标准固体黏弹性力学模型分析神经上皮细胞的力学特性。结果小鼠胚胎神经上皮细胞力学特征表现为典型的黏弹性固体特征。与对照组比较,NTDs组的神经上皮细胞的3个黏弹性参数(平衡模量、瞬态模量和表观黏性系数)均明显升高,差异有统计学意义(均P〈0.05),但同一组细胞的黏弹性参数在不同时间点的差异无统计学意义(均P〉0.05)。结论胚胎神经上皮细胞变形能力下降可能是神经管闭合障碍产生的因素之一。
刘成星李敏解军
关键词:神经管畸形微管吸吮黏弹性
DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达变化被引量:2
2017年
目的:探讨RNA解旋酶DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达及与神经管畸形发生之间的关系,为阐明神经管畸形发生的分子机制提供实验依据。方法:选取不同时间点环磷酰胺致神经管畸形模型组和对照组大鼠石蜡切片,应用免疫荧光组织化学显色法检测神经上皮细胞中DDX3和DDX5的表达变化。结果:与对照组相比,模型组大鼠神经神经上皮细胞中DDX3和DDX5阳性表达在环磷酸胺处理后4 h无改变,8、12、24 h均升高,48 h则降低,差异均有统计学意义。结论:环磷酰胺导致大鼠胚胎神经神经上皮细胞中DDX3和DDX5表达异常,提示DDX3和DDX5可能参与了神经管畸形的发生。
王箐王巧真刘永新张雅雯马晓君赵春艳杜红梅陈燕春
关键词:环磷酰胺神经管畸形RNA解旋酶
甘油二酯激酶γ参与大鼠胚胎脑神经上皮细胞的发育被引量:2
2016年
目的探讨甘油二酯激酶γ(DGKγ)在大鼠胚胎脑神经上皮发育中的作用及可能机制。方法 18只胎龄(E)11.5、E12.5、E14.5、E16.5、E18.5大鼠胚胎用于Western blotting方法检测DGKγ在大鼠胚胎脑组织的表达,E9.5~E18.5大鼠胚胎各5只用于免疫组织化学和免疫荧光染色方法检测DGKγ在大鼠胚胎脑的分布以及DGKγ与Ki67、乙酰胆碱转移酶(Ch AT)及酪氨酸羟化酶(TH)的细胞内共定位。结果 DGKγ蛋白含量在E11.5~E14.5表达逐渐增多,E16.5表达较E14.5显著减少,E18.5表达显著增多且高于E14.5水平。E10.5~E12.5,DGKγ在脑泡壁出现表达,并随着脑泡的发育表达在端脑、除大脑脚外的中脑、后脑和末脑;E13.5~E14.5,DGKγ的强阳性表达从海马及周围的新皮质、苍白球、嗅脑和大脑脚阳性延伸到除新皮质外的脑的各区域;E15.5至出生前,DGKγ在新皮质阳性表达增强,但在大脑脚和脑桥表达减弱。免疫荧光染色显示,E14.5,与海马和苍白球相比,嗅脑的DGKγ阳性细胞中Ki67阳性率较高(87%),Ch AT阳性率较低(9%)(均P〈0.05),中脑顶盖的DGKγ阳性细胞中62%为TH阳性;E16.5,新皮质的DGKγ阳性细胞中Ki67阳性率为26%,较E14.5时(49%)显著降低(P〈0.05),Ch AT阳性率为70%,较E14.5时(45%)显著增高(P〈0.05);DGKγ多位于神经上皮细胞的胞质,也可见于胞膜上,或者同时位于胞质和胞核。结论 DGKγ在胚胎脑的表达模式和亚细胞分布,提示其参与了胚胎脑神经上皮的增殖、迁移和分化后神经元的发育。
牛宝贝崔慧林曹锡梅师亮马晋峰乔从进
关键词:神经上皮免疫印迹法免疫荧光
中枢神经系统神经上皮细胞肿瘤的流行病学研究被引量:2
2015年
目的总结神经上皮细胞肿瘤相关流行病学资料,为临床工作奠定基础。方法选取2009‐02‐08—2012‐12‐27于我院神经外科进行神经上皮细胞肿瘤治疗的患者368例。对患者的各项数据进行分析,主要包括性别、年龄、患病时间、职业、原发症状、病发部位、病理诊断、分级及主要症状等资料。结果接受调查的368患者中,男221例,女147例,发病年龄0.5~73岁。肿瘤的病理诊断:星形胶质细胞肿瘤192例,少突胶质细胞肿瘤103例,少突胶质细胞肿瘤33例,其他40例,可见胶质细胞肿瘤最为多见,其中又以星形胶质细胞最多。同时可见神经上皮肿瘤的构成比,好发部位与患者的年龄相关。且首发症状以颅内压增高为主,后期症状主要与不同肿瘤病发部位及病理特点有关。结论神经上皮细胞肿瘤常见类型为胶质瘤,以星形胶质瘤最多。关于肿瘤类型的构成比,肿瘤的好发部位及病理类型等均与患者的年龄有关。
陆建勋
关键词:中枢神经系统病理类型流行病学

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管英俊
作品数:201被引量:559H指数:10
供职机构:潍坊医学院基础医学院
研究主题:转基因鼠 神经管畸形 脊髓 高温 神经干细胞
高英茂
作品数:183被引量:701H指数:13
供职机构:山东大学医学院
研究主题:神经管畸形 高温 神经管 金黄地鼠 胚胎
陈燕春
作品数:107被引量:192H指数:6
供职机构:潍坊医学院基础医学院
研究主题:转基因鼠 肌萎缩侧索硬化症 ALS 脊髓 转基因小鼠
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作品数:221被引量:395H指数:9
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研究主题:神经管畸形 金黄地鼠 间充质干细胞 高温 转基因鼠
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作品数:83被引量:285H指数:9
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