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一种碳青霉烯酶联合检测设备及其检测方法: 本发明属于碳青霉烯酶检测技术领域，公开一种碳青霉烯酶联合检测设备及其检测方法，包括：检测试剂盒，用于对多种碳青霉烯酶进行联合检测，检测试剂盒包括盒体；装液容器，设置于盒体一侧，用于盛装样本溶液；取样滴管，设置为多个，用于...; 马弋潮马亮贾海燕

肠杆菌目细菌碳青霉烯酶检测的研究进展: 2024年; 近年来,细菌耐药已经成为公共卫生的一项重大挑战,其中碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)对抗生素的耐药形势尤为严峻。CRE的主要耐药机制是碳青霉烯酶的产生,不同菌株携带的耐药基因不同,产生的碳青霉烯酶也不同,因此,碳青霉烯酶和耐药基因的早期检测对于控制耐药菌的传播起到重要作用。目前对于碳青霉烯酶的表型检测方法有改良Hodge实验、改良碳青霉烯灭活试验、Carba NP试验、免疫学技术、质谱技术,对于耐药基因型的检测方法有实时荧光定量PCR技术、微阵列技术、等温扩增技术、测序技术,这些方法在碳青霉烯酶的检测中均具有广泛应用。了解各检测技术的优缺点对于在实际应用中选择最适检测方法是非常重要的。本文主要对CRE碳青霉烯酶检测方法的研究进展和各方法的优缺点进行综述,为CRE的检测、预防以及院内感染控制提供数据支持。; 滑少为赵子今赵萌申辛欣冯志山; 关键词：碳青霉烯酶

新型抗KPC-2型碳青霉烯酶纳米抗体的筛选与鉴定: 2024年; 目的:产KPC-2型肺炎克雷伯菌可引起β-内酰胺类抗生素、碳青霉烯类抗生素产生耐药性。通过噬菌体展示技术从抗KPC-2纳米抗体文库中筛选与KPC-2特异性结合的纳米抗体,为产KPC-2型肺炎克雷伯菌耐药性的检测和诊断提供技术支持。方法:利用重组KPC-2免疫双峰骆驼,从骆驼的外周血淋巴细胞中提取RNA,逆转录为cDNA,通过两轮嵌套式PCR扩增出纳米抗体片段,构建抗体文库,并通过噬菌体展示技术筛选特异性纳米抗体。通过HPLC和OCTET分别进行表位分析和亲和力测定。结果:构建了一个库容为5.47×10^(8)cfu/ml且插入有效片段不低于81.25%的纳米抗体文库;并建立抗KPC-2纳米抗体的免疫淘选方法;获得了2个不同CDR3区的纳米抗体K2和K5,亲和力分别为6.0 nmol/L和4.8 nmol/L。且在KPC-2上具有2个非竞争性结合表位。结论:成功淘选出2个不同表位的特异性纳米抗体,有望替代传统抗体用于肺炎克雷伯菌耐药性疾病的检测和诊断。; 张鑫王辉许剑锋; 关键词：噬菌体展示技术 KPC-2型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌

多重耐药肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶的检测和分析: 2024年; 探究多重耐药肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶的检测和分析。方法在2021年1月至2023年11月期间,本研究对黄河中心医院采集的78株肺炎克雷伯菌(一种多重耐药菌)进行深入研究。为了探究这些菌株中是否存在碳青霉烯酶基因,进行碳青霉烯酶表型试验。随后,为了进一步验证这些基因的存在,利用聚合酶链反应对它们进行检测,并对扩增产物进行DNA测序,确保能够准确地确定它们的基因型。经分析发现这78株肺炎克雷伯菌中,有48株被明确鉴定为超广谱β内酰胺酶(ESBL)阳性菌,而另外30株则为ESBL阴性菌。这一研究结果对肺炎克雷伯菌的耐药机制提供了更为精确的认识,对于指导临床用药和防控耐药菌的传播具有重要意义。结果经过严格的检测,发现所检测的菌株中,产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的阳性率高达61.54%。药敏分析结果显示,产ESBL菌株对第一,二代头孢菌素及青霉素类抗菌药物具有较高的耐药性。特别是针对单环类氨曲南,耐药率达到惊人的100.00%。值得注意的是,除了亚胺培南、厄他培南、美罗培南及左氧氟沙星外,产ESBL菌株相较于非产ESBL菌株具有更高的耐药性。在78株肺炎克雷伯菌中,Hodg试验阳性菌共有10株,占比12.82%;阴性菌68株,占比87.18%。在10株Hodg试验阳性菌中,仅有1株金属酶试验呈阳性。通过PCR扩增技术,成功确认10株阳性菌中的4株,其中3株为KPC型,阳性率为3.85%,另1株为IMP型,阳性率为1.28%。进一步的PCR产物测序分析显示,3株产KPC型菌株均携带KPC-2基因亚型,而产IMP型菌株携带的基因亚型为MP4。这些数据为研究和应对肺炎克雷伯菌的抗药性提供宝贵的线索和依据。结论碳青霉烯酶在克雷伯菌中的检出率较高,尤其以KPC-2为最高,因此,在临床用药时应给予足够的关注,合理应用碳青霉烯,尽量减少耐药株,提高治疗效果,具有一定的意义。; 贾立平郭长城; 关键词：多重耐药肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶

基于PCR/RAA-CRISPR-Cas13a检测NDM型碳青霉烯酶基因试剂盒: 本发明公开了基于PCR/RAA‑CRISPR‑Cas13a检测NDM型碳青霉烯酶基因试剂盒。所述试剂盒包括特异性扩增NDM型碳青霉烯酶基因的引物对和crRNA。本发明构建了PCR或RAA技术联合CRISPR‑Cas13a...; 任锋张向颖曹亚玲徐玲田原范子豪高耀段钟平

用于检测细菌内碳青霉烯酶的免疫层析装置及检测方法: 本发明涉及微生物检测领域，公开了一种用于检测细菌内碳青霉烯酶的免疫层析装置及检测方法，免疫层析装置包括样品处理袋和免疫层析盒，处理袋内分隔有裂解处理区、吸附处理区和释放处理区，裂解处理区、吸附处理区和释放处理区依次通过可...; 马亮马弋潮贾海燕

评价快速碳青霉烯酶灭活试验在肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型检测中的应用价值: 2024年; 目的评价快速碳青霉烯酶灭活试验(rCIM)与改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)在肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型检测中的应用价值。方法选择86株耐碳青霉烯肠杆菌科细菌,使用聚合酶链式反应(PCR)检测常见碳青霉烯酶基因,比较rCIM与mCIM法检测碳青霉烯酶表型的性能。结果共检测到61株碳青霉烯酶基因型,检出率为70.9%。mCIM法发现阳性菌株61株,阴性菌株25株,rCIM法发现阳性菌株62株,阴性菌株24株。以PCR结果作为金标准,mCIM法的准确度、灵敏度和特异度分别为100.0%、100.0%和100.0%,rCIM法的准确度、灵敏度和特异度分别为98.8%、100.0%和96.0%。结论rCIM法检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型,操作简便,不需过夜培养,不需特殊的仪器或试剂,准确度较高。; 孙文悦周小梅卢金英梁栋伟; 关键词：肠杆菌科碳青霉烯酶

外科ICU与内科ICU碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌耐药性、碳青霉烯酶基因检测及流行病学研究: 2024年; 目的分析外科ICU和内科ICU碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性、常见的碳青霉烯酶基因及菌株之间的亲缘性关系。方法收集2019年1月至2020年12月从某三甲医院外科ICU和内科ICU分离鉴定的CRKP非重复菌株,采用自动仪器法对菌株进行药物敏感性试验;采用mCIM联合eCIM试验进行碳青霉烯酶表型检测,并通过PCR技术联合DNA测序检测碳青霉烯酶基因;利用多位点序列分型(MLST)方法对碳青霉烯酶阳性菌株进行同源性分析。结果共收集15株CRKP菌株,其中外科ICU 8株,内科ICU 7株。CRKP菌株对临床多数抗菌药物表现高耐药性,仅对替加环素表现较高敏感性。mCIM联合eCIM试验并经PCR验证,共有14株CRKP携带碳青霉烯酶基因,其中7株单纯携带KPC⁃2基因,主要来源于内科ICU;5株单纯携带NDM⁃5基因,来源于外科ICU;1株携带KPC⁃2基因合并少见金属酶基因来源于内科ICU;1株携带NDM⁃1基因合并OXA⁃181基因来源于外科ICU。MLST结果显示,医院ICU分离的CRKP菌株为ST11、ST15、ST163个序列型别。内科ICU优势序列为ST11(6/6),全部携带KPC⁃2基因;外科ICU优势序列为ST15(5/8),主要携带NDM⁃5基因。结论医院外科ICU和内科ICU分离的CRKP菌株耐药性高,其携带的耐药基因和优势流行菌株存在差异。应加强多重耐药菌的监测及流行病学研究,及时采取有效治疗方案和防控策略,防止耐药菌株产生和流行播散。; 李秋香金静梁宏洁黄鑫林青蒋诚传李泰阶; 关键词：肺炎克雷伯菌耐药性碳青霉烯酶基因多位点序列分型

鲍曼不动杆菌临床分离株第1类整合子、碳青霉烯酶基因和生物膜相关基因的分析: 修瑜

耐碳青霉烯酶肠杆菌科耐药基因及其药敏分析: 2024年; 分析耐碳青霉烯酶肠杆菌科耐药基因及其药敏。方法研究对象为彭水县人民医院收集的45株非重复CRE菌株,采用微量肉汤稀释法和碳青霉烯酶检测试剂盒(胶体金法)和酶抑制剂增强试验进行试验KPC,blaNDM,blaIMP和blaVIM经胶体金试剂盒筛选,分析耐碳青霉烯酶肠杆菌科耐药基因、耐碳青霉烯酶肠杆菌科药敏结果。结果在本次研究中所选的45株肠杆菌科细菌样本中,kpn(42.2%)占比最高,其次为koz(15.6%)、ecoz(15.6%)、cfr(8.90%)等;酶型以N(60.00%)为主,其次为K(26.70%);Ko2、cfr、kpn敏感度最高。结论肠杆菌科细菌样本中,kpn占比最高,其次为koz、eco;酶型以N为主,其次为K,Ko2、cfr、kpn敏感度最高。因此未来应高度重视碳青霉烯类抗菌药物的耐药性变化,做好预防,这对于提升治疗效果的意义重大。; 郭秋红葛良琼朱华恋罗飞; 关键词：肠杆菌科耐药基因药敏

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