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一株盖塔病毒传代致弱毒株及其应用: 本发明公开了一株盖塔病毒（Getah virus，GETV）传代致弱株GETV HuN1‑230株，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：V2024111。该致弱病毒株免疫小鼠和猪可产生高水平的中和抗...; 杨涛涛陆莹梅林安淇陈婧胡威李鹏成张志榜李凯张晓燕

稳定表达绿色荧光蛋白的盖塔病毒的构建与鉴定: 2025年; 为了开发表达外源基因的重组盖塔病毒,通过反向遗传技术,在盖塔病毒nsP3基因的C端插入绿色荧光蛋白ZsGreen,并通过转染至BHK-21细胞拯救重组病毒并研究其生长特性。结果:感染性cDNA克隆pSM-GETV-nsP3/ZsGreen转染BHK-21细胞后表达绿色荧光蛋白,所拯救的报告病毒可以在BHK-21细胞上稳定传代(至少10代),并表现出良好的遗传稳定性;多步生长曲线试验表明,报告病毒GETV-ZsGreen在BHK-21细胞上的增殖能力略低于亲本毒株,但仍能达到较高病毒滴度。综上,本研究构建并拯救了1株遗传稳定的GETV报告病毒GETV-ZsGreen。; 姜智文秦颖陈杰粟硕; 关键词：盖塔病毒感染性克隆

福建省赤腹松鼠源盖塔病毒的分子鉴定及其遗传进化分析: 2025年; 盖塔病毒(Getah virus,GETV)是一种人畜共患的虫媒传播病毒,主要感染养殖动物,遗传多样性高,具有流行风险。本研究基于高通量测序技术,在来自福建省的死亡野生赤腹松鼠中首次发现了GETV,结合一代测序技术进一步鉴定到赤腹松鼠肺组织感染GETV,并成功获得该病毒的全基因组序列,命名为GETV/RS/China/2022毒株。基于GETV全基因组的系统发育分析结果表明,源自野生啮齿目动物的GETV/RS/China/2022毒株属于罕见GETV谱系Ⅱ型衍生株,这提示了GETV宿主谱的扩展以及野生动物对甲病毒进化和传播的重要性。; 鄢梓晴粟硕; 关键词：盖塔病毒甲病毒系统发育分析

表达H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白的重组盖塔病毒的构建方法及其应用: 本发明公开了一种表达H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白的重组盖塔病毒，该病毒具有H1N1亚型猪流感病毒HA1蛋白基因，且HA1蛋白基因位于盖塔病毒基因组的E1和3’UTR基因之间。据此，还建立了相应构建方法。进一步地，还研制...; 韦祖樟张丽萍隋梦琪陈樱任同伟王豪黄伟坚欧阳康覃一峰

盖塔病毒TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立: 2025年; 盖塔病毒(GETV)是一种在我国广泛分布的虫媒病毒,可通过蚊虫传播感染人畜,导致猪、马等动物出现发热、出疹及淋巴结肿大等症状,可致妊娠母猪流产或死胎。目前尚无特效治疗方式。本研究根据GenBank公布的盖塔病毒nsP1基因序列,设计3组引物探针,筛选出最佳的引物探针,建立一种灵敏度高、特异性强的针对盖塔病毒的TaqMan探针实时荧光定量RTPCR检测方法。对该方法进行敏感性、特异性、重复性试验和临床样品检测。标准曲线Ct值与相应质粒标准品浓度存在良好的线性关系,相关系数(R^(2))为0.9989;对含GETV基因的重组质粒pCDNA3.1-nsP1体外转录RNA进行敏感性试验,最低检出限达10 copies,是普通RT-PCR方法的1000倍,敏感性高;与PRRSV、CSFV与PEDV的核酸不发生交叉反应,特异性好;变异系数小于2%,重复性好。本研究建立了一种敏感、特异的GETV检测方法,对GETV的快速诊断具有重要意义。; 顾志刚郭洁真王子涵孙彤陈鸿军孙竹筠陈丹清; 关键词：盖塔病毒 TAQMAN探针实时荧光定量RT-PCR

一株盖塔病毒弱毒疫苗株及其应用: 本发明公开了一株盖塔病毒弱毒疫苗株及其应用。该疫苗株是在一株高毒力盖塔病毒HN株的基础上，通过在Vero细胞上低温传代，并进行多轮空斑筛选获得了在nsP3区域出现部分碱基缺失的病毒，该病毒在Vero细胞上空斑显著减小，将...; 粟硕姜智文邢刚秦颖

一株盖塔病毒弱毒疫苗株及其应用: 本发明公开了一株盖塔病毒弱毒疫苗株及其应用。该疫苗株是在一株高毒力盖塔病毒HN株的基础上，通过在Vero细胞上低温传代，并进行多轮空斑筛选获得了在nsP3区域出现部分碱基缺失的病毒，该病毒在Vero细胞上空斑显著减小，将...; 粟硕姜智文邢刚秦颖

盖塔病毒感染性克隆及复制型表达载体的构建: 2024年; 本研究利用反向遗传学的方法成功拯救了一株盖塔病毒(Getah virus, GETV)(GenBank:OM363683)。首先,将优化后的病毒序列克隆到含有T7或CMV启动子的低拷贝质粒pFK中,分别命名为T7-GETV和CMV-GETV。以T7-GETV为模板,通过体外转录(in vitro transcription, IVT)合成病毒RNA。随后,采用脂质体转染的方式将RNA递送到BHK-21细胞中,通过半数组织培养感染量(50%tissue culture infectious dose, TCID_(50))法测定病毒滴度,并利用免疫印迹法(western blot, WB)检测病毒蛋白E1表达,证明盖塔病毒被成功拯救。进一步通过光学显微镜观察细胞病变(cytopathic effect, CPE),以及TCID_(50)法、实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)和WB的方法,系统地表征盖塔病毒的生长特征。此外,在CMV-GETV的基础上,基于盖塔病毒复制子的结构,采取保留非结构蛋白基因并用报告基因mCherry或renilla luciferase(Rluc)代替结构蛋白基因的策略构建盖塔病毒复制型表达载体,分别命名为pFK-GETV-mCherry和pFK-GETV-Rluc。随后构建pFK质粒的CMV启动子并仅插入报告基因的对照质粒,分别命名为pFK-mCherry和pFK-Rluc。Image J软件分析显示,转染pFK-GETV-mCherry后单细胞平均荧光强度比转染pFK-mCherry高约5倍。同时,RT-qPCR结果表明,转染pFK-GETV-mCherry后mCherry基因转录水平也比转染pFK-mCherry高约5倍,两组结果高度一致。WB结果进一步说明,在相同时间点转染pFK-GETV-mCherry组mCherry蛋白表达水平比转染pFK-mCherry组高。荧光素酶检测显示,转染pFK-GETV-Rluc后细胞表达Rluc的效率比转染pFK-Rluc高约3个数量级。本研究为后续盖塔病毒研究提供了有力的反向遗传学工具,同时验证了盖塔病毒复制型表达载体提高外源基因表达水平的能力,为研究盖塔病毒复制型DNA疫苗奠定了基础。; 王永康曹恒龙钢; 关键词：盖塔病毒感染性克隆病毒拯救 DNA疫苗

基于盖塔病毒骨架的嵌合甲病毒制备方法和应用: 本发明公开了一种基于盖塔病毒骨架的嵌合甲病毒制备方法和应用；本发明先公开一种质粒载体，所述质粒载体以含有盖塔病毒基因组的感染性cDNA克隆为骨架质粒，再通过如下（A1）或（A2）任一方式进行构建：（A1）将盖塔病毒的OR...; 粟硕姜智文邢刚秦颖

基于盖塔病毒骨架的嵌合甲病毒制备方法和应用: 本发明公开了一种基于盖塔病毒骨架的嵌合甲病毒制备方法和应用；本发明先公开一种质粒载体，所述质粒载体以含有盖塔病毒基因组的感染性cDNA克隆为骨架质粒，再通过如下（A1）或（A2）任一方式进行构建：（A1）将盖塔病毒的OR...; 粟硕姜智文邢刚秦颖

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