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鸡传染性喉气管炎病毒分离鉴定及遗传进化分析: 2025年; 荆州某鸡场出现了疑似鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)感染,为确定该病病因,用PCR初步检测鸡传染性喉气管炎病毒为阳性;将阳性病料经处理后接种于SPF鸡胚绒毛尿囊膜,传至5代,收集出现痘斑和增厚的绒毛尿囊膜及尿囊液,对其进行PCR检测、病毒滴度测定及动物回归试验。确定分离到1株ILTV毒株,命名为JZCD202302株。参照GenBank公布的鸡传染性喉气管炎病毒WG株设计了gB、gC、gD、gE、gK、TK基因特异性引物,用MEGA6.0软件绘制了遗传进化树。gB-gC-gD-gE-gK-TK串联进化树分析结果显示,该毒株与澳大利亚疫苗相关野外重组流行毒株7b、ACC78、CL9和实验室疫苗重组株ILTV.157/19亲缘关系最近。; 袁辉刘丹刘敏吴琼李凌丹宾晨李伟李国攀陈红心周启立熊涛; 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒

云南省双江县三带喙库蚊中乙型脑炎病毒分离及编码区序列: 2025年; 目的了解云南省临沧市双江县蚊虫携带乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)情况及其分子特征。方法2023年8月,在临沧市双江县牛圈采用诱蚊灯采集蚊虫标本,经蚊种鉴定后每25只为一组,采用BHK-21细胞和C6/36细胞进行病毒分离,阳性分离物分别采用黄病毒属引物进行鉴定;然后采用针对GⅠ型JEV全长15对引物进行RT-PCR扩增,测序、拼接,采用MEGA X、DNAstar、GeneDoc、SOPMA和SWISS-MODEL等生物信息学软件进行序列分析。结果共采集到三带喙库蚊1300只,分52组进行病毒分离,获得1株阳性分离株(SJM23-22),接种C6/36和BHK-21细胞后均出现细胞病变,黄病毒属引物扩增为阳性。对该株病毒全序列测定拼接后,获得一条10840个核苷酸长序列,编码3432个氨基酸;基于全基因序列和E基因序列构建的遗传进化分析结果显示,新分离SJM23-22与柬埔寨GⅠa型毒株(C081)的亲缘关系最近,编码区核苷酸同源性为98.5%,氨基酸同源性为99.8%,而与其他基因型编码区核苷酸同源性均在90%以下,氨基酸同源性均在98%以下;位点分析结果显示与减毒活疫苗株SA14-14-2在E基因上共有22个氨基酸差异位点,其中在8个与神经毒力相关氨基酸关键位点上,存在7个位点差异;重要抗原表位分析结果显示,双江分离株与减毒活疫苗株在结构域Ⅲ中的3个重要抗原表位完全一致;二级结构及三级结构预测结果显示,该毒株以无规则卷曲为主要结构特征。结论在双江县三带喙库蚊中分离1株GⅠa型JEV,与抗原性表位相关的关键氨基酸位点未发生明显改变。本研究丰富了云南省双江县三带喙库蚊携带病毒情况,为云南省虫媒疫情的防控提供了参考。; 顾杨杨何于雯阮方超杨杰林杨绍昌冷珺李富雨王佳丽王静林; 关键词：系统进化分析

江汉鸡J亚群禽白血病病毒分离鉴定及致病性分析: 2025年; 为了解禽白血病病毒(ALV)在江汉鸡中的遗传进化方向和致病性,对来自湖北省武汉市疑似感染ALV的江汉鸡进行病理剖检、病毒分离鉴定,并对分离毒株进行env基因遗传进化分析以及致病力评估。结果表明,病鸡脾脏肿大,肝脏表面肉眼可见肿瘤;匀浆组织接种DF-1细胞后,经ELISA和IFA检测发现P27抗原均呈阳性,PCR亚型鉴定仅扩增出J亚群特异性条带,成功分离出1株ALV-J毒株,命名为HB18449株;分离株env基因的遗传进化分析显示分离株与山东商品蛋鸡分离株SD13QJ03遗传关系最近,且和多数地方鸡分离株一样与英国原型株HPRS103处于同一大分支。此外,致病性试验结果表明,HB18449感染雏鸡会抑制其生长、免疫器官发育、引起病毒血症、降低血液中CD4~+/CD8~+T淋巴细胞比例以及体液免疫应答水平。; 许云澎汪最窦俊峰李丽卢琴金鑫鑫凌小淳汪宏才翟新国罗青平李芸轩; 关键词：禽白血病病毒遗传进化

1株鸽新城疫病毒分离鉴定与全基因组序列分析: 2025年; 本研究对2020年从广西地区采集的疑似鸽新城疫临床样品,进行了病毒分离、致病力鉴定,并进行全基因组测序和遗传进化分析。结果成功分离到1株鸽新城疫病毒,致病力试验证实为高毒力毒株;该毒株F蛋白裂解位点序列为112RRQKRF117。通过绘制F基因和全长基因组遗传进化树,确定该毒株属Ⅵ.2.1.1.2.2Ⅵk型,与流行毒株Pi/CH/TJ2017亲缘关系最近,与新城疫疫苗株La Sota遗传关系较远;蛋白序列分析结果显示,F蛋白的两个高度疏水区信号肽区(1-31)和融合肽区(117-141)共存在13个氨基酸位点变异;HN蛋白中和表位共有6个氨基酸位点的突变。上述突变可能造成该分离株的F蛋白和HN蛋白抗原性及疏水性有一定程度变化,影响La Sota疫苗株的保护效力,导致鸽新城疫在鸽群中暴发。; 尹德玮赵钟毅吕荞闭璟珊汪伟郑敏罗廷荣李晓宁; 关键词：鸽新城疫 F基因 HN基因遗传进化分析

中原地区牛肠道病毒分离鉴定及其遗传变异分析: 2025年; 旨在探究中原地区牛肠道病毒(BEV)的生物学特性及其5′-UTR序列遗传特征。采用RT-PCR方法对2023—2024年从四川、河南和河北地区收集的77份腹泻牛粪便样品进行BEV检测,对阳性样本的BEV 5′-UTR序列进行克隆及遗传变异分析,通过接种Madin-Darby牛肾细胞(MDBK)进行病毒分离与鉴定。结果:77份牛粪便样品中有20份(25.97%)检测为BEV阳性,获得20株BEV 5′-UTR核苷酸序列;20株BEV与13株BEV参考毒株5′-UTR序列同源性为77.2%~94.1%;遗传变异分析显示,获得的20株BEV序列中17株属于BEV-F种,余下3株属于BEV-E种;分离到2株BEV,命名为HB002、HN004-8,均为BEV-F种,病毒滴度均在48 h时达到高峰,分别为10^(5.49)TCID_(50)/μL和10^(5.67)TCID_(50)/μL;电子显微镜观察病毒粒子呈球形,直径20~30 nm。本研究为BEV感染的防控提供了参考。; 刘颖黄宗梅王轩昂郑兰兰马世杰陈红英

一种流感病毒分离检测试剂盒: 本实用新型公开了一种流感病毒分离检测试剂盒，涉及病毒分离技术领域，包括储存筒，储存筒上的开口端设有筒盖，筒盖一侧开设有用于取放病毒试剂管的通槽；储存筒中转动布设定位杆，定位杆靠向筒盖的方向固定布设第一定位盘，定位杆端部贯...; 张煜华李高波

猪细小病毒分离鉴定与遗传进化分析: 猪细小病毒病（Porcine parvovirus disease,PPD）由猪细小病毒（Porcine parvovirus,PPV）感染引起,其主要表现为母猪出现繁殖障碍的症状,不孕、流产、畸形胎、死胎和木乃伊胎等,...; 杨洁; 关键词：猪细小病毒 PCR 病毒分离鉴定遗传进化分析

猪源轮状病毒分离鉴定与生物学特性研究: 猪轮状病毒（Porcine Rotavirus,PoRV）是引起仔猪腹泻、胃肠炎的重要病原。该病毒的感染可引起仔猪病毒腹泻类症状,严重时可致仔猪死亡,深刻影响着世界各国养猪业及公共卫生安全。为了解四川某猪场PoRV感染情...; 罗旭; 关键词：猪轮状病毒病毒分离鉴定生物学特性

流感样病例中的病毒载量对流感病毒分离效果的影响: 2024年; 目的分析流感样病例标本中的病毒载量对流感病毒分离效果的影响,从而提高流感病毒分离工作的质量和效率。方法2023年1-10月,在区哨点医院和周边区县收集320例核酸阳性流感样病例标本,采用吸附法和直接接种法接种于狗肾传代细胞中,比较流感病毒分离效率;再以实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)中的Ct值为界,划分为3组进行对比;对相关因素进行分析。结果不同性别流感病毒细胞分离结果差异无统计学意义(直接接种法:χ^(2)=0.676,P>0.05;吸附法:χ^(2)=1.359,P>0.05)。采用直接接种法分离出的流感阳性毒株数明显高于吸附法,差异有统计学意义(χ^(2)=20.516,P<0.05)。Ct值越低,流感病毒分离阳性率越高,不同Ct值分离阳性率差异有统计学意义(直接接种法:χ^(2)=35.594,P<0.05;吸附法:χ^(2)=15.496,P<0.05)。不同接种方法中,甲型流感亚型H3N2和新甲H1N1分离的流感病毒阳性率差异无统计学意义(直接接种法:χ^(2)=1.563,P>0.05;吸附法:χ^(2)=1.214,P>0.05)。结论在流感病毒细胞分离实验中,采用直接接种法,选取流感病毒载量高(Ct值<30)的标本可以有效提高流感病毒分离阳性率。; 胡攀攀周静周宗良周宗俞李雪娇乔洁李霞; 关键词：流感病毒病毒载量细胞培养病毒分离

新疆某规模化肉牛场牛病毒性腹泻病毒分离与基因型鉴定被引量：3: 2024年; 新疆许多规模化牛场存在牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的感染,且因病毒基因型具有多样性,给该病的防控、疫苗选择、净化带来了一定的困难,开展新疆地区规模化牛场BVDV基因分型鉴定,对BVDV防控具有重要的指导作用。采集BVDV胶体金抗原检测卡确定为阳性的犊牛抗凝血样品并分离淋巴细胞,在MDBK单层细胞上进行病毒分离,盲传5代,提取培养物RNA,以BVDV5′-UTR、N^_(pro)特异性引物进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测分析。结果显示,获得BL分离株1株,属于BVDV-1m亚型,研究结果丰富了新疆南疆地区规模牛场BVDV分子流行病学数据库。; 黄琴陈红强张怡淼马颖超胡建军张伟; 关键词：牛病毒性腹泻病毒基因型鉴定逆转录-聚合酶链反应

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