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翘嘴鳜生长激素cDNA克隆及其真核表达载体的构建被引量：1: 2009年; 根据GenBank上大眼鳜生长激素cDNA序列(收录号:AY155227)设计了1对特异性引物,应用RT-PCR技术从翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)脑垂体中克隆了生长激素基因(scGH)编码区序列并对其真核表达载体的构建进行了研究。结果显示:扩增片段全长615 bp,共编码204个氨基酸。该序列与GenBank上大眼鳜生长激素cDNA序列同源性为99.84%。将scGHcDNA序列定向插入pYES2/CT真核表达载体中,经过筛选、酶切和测序,证明重组子中确实插入了翘嘴鳜GH片段。; 罗小华刘臻肖克宇张建社梅秋兰房志家鲁双庆; 关键词：生长激素基因克隆

五种鲤科鱼类生长激素cDNA的克隆和序列分析被引量：3: 2008年; 通过RT-PCR方法，以草鱼、鳙鱼、鲫鱼、鲤鱼、齐口裂腹鱼等5种鲤科重要经济鱼类的垂体总RNA为模板扩增出其生长激素（fish growth hormone，fGH）的完整ORF序列，并克隆到pMD18-T载体上，命名为pMD-1（草鱼）、pMD-2（鳙鱼）、pMD-3（鲫鱼）、pMD-4（鲤鱼）、pMD-5（齐口裂腹鱼）。测序结果显示，ORF序列其长度均为633bp。序列分析表明，所有ORF序列均以ATG为起始密码，以TAG为终止密码，编码210个氨基酸残基，推导的生长激素前体由22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟肽组成。同源性分析表明，草鱼、鳙鱼、鲤鱼、鲫鱼和齐口裂腹鱼的fGH同源性在93．3％-99．5％之间。; 于辉李华颜其贵林涛冯婷冯迎春; 关键词：CDNA克隆鳙鱼齐口裂腹鱼

革胡子鲶生长激素cDNA克隆与蛋白质结构分析被引量：5: 2008年; 从革胡子鲶(Clarias lazera(Burchell))的脑垂体组织中提取总RNA,应用RT-PCR方法,扩增得到了革胡子鲶生长激素(Growth hormone,GH)基因cDNA的开放阅读框(Open reading frame,ORF)序列。ORF全长为603nt,编码由22个信号肽氨基酸和178个成熟肽氨基酸共同组成的生长激素前体蛋白。序列同源比较结果表明,研究中得到的革胡子鲶生长激素氨基酸序列与GenBank中已报道的其他6种鲶形目鱼类的氨基酸序列同源性高达95.8%。二级结构预测分析结果表明,革胡子鲶生长激素蛋白中含有α螺旋、β折叠和β转角以及无规卷曲等二级结构,以α螺旋为主,是典型的α型结构蛋白质。此外,抗原性分析表明,在氨基酸序列中的4个区域均可形成优势抗原表位,其结构特点非常适合改造成为重组生长激素疫苗或单克隆抗体制剂加以开发利用。; 杨学明何荆洲黄雄军李芳芳郭亚芬蒋和生; 关键词：革胡子鲶生长激素 CDNA克隆

银狐生长激素cDNA克隆和原核表达被引量：2: 2008年; 为了获得重组的银狐生长激素,本试验用Trizol的方法从银狐脑垂体组织中提取总RNA,以mRNA为模板,用RT-PCR方法扩增出生长激素成熟cDNA片段并克隆到载体质粒pMD18-T中;通过含有BamHⅠ酶切位点的特异引物从pMD18-T-fGH中亚克隆出cDNA片段,并将其重组到pPROEXTMHta质粒中,构建了银狐生长激素原核表达质粒pPRO-EXTMHta-fGH。将pPROEXTMHta-fGH原核表达质粒转化DH5α大肠杆菌,用终浓度1 mmol/L IPTG进行诱导,通过SDS-PAGE进行检测。结果表明在转化的大肠杆菌中检测到分子量为26 kD的fGH蛋白的存在,表达量占菌体蛋白总量的35%,并且表达产物以包涵体的形式存在。; 刘玉堂胡晓航闫丽辉曹殿军刘培欣杨传平; 关键词：银狐生长激素克隆原核表达

贵州香猪生长激素cDNA的克隆及原核表达被引量：1: 2007年; 应用RT-PCR技术从香猪垂体mRNA中扩增出完整的生长激素(growth hormone,GH)cDNA片段,将其克隆入载体质粒pTYB11中,构建了重组质粒pTYB11-xGH,经过IPTG诱导,在大肠杆菌ER2566中获得表达,并确定了最佳表达条件。通过亲合柱层析,得到了完整的香猪生长激素,为香猪GH的结构、功能及其分子水平的作用机制奠定了基础。; 李景冉雪琴王嘉福; 关键词：生长激素定点突变蛋白表达

人胎盘组织cDNA文库的构建及人生长激素cDNA的克隆: cDNA文库构建和筛选是基因克隆的重要方法之一,它是目前发现新基因和研究基因功能的基本工具。从cDNA文库中可以筛选到目的基因,并直接用于该基因的表达。经典cDNA文库存在克隆的片段短等缺点,而全长cDNA文库则能提供完...; 刘红军; 关键词：胎盘组织 CDNA文库构建人生长激素 RT-PCR; 文献传递

黄颡鱼生长激素cDNA序列克隆及其序列分析被引量：5: 2006年; 采用RT-PCR方法,首次从黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)脑垂体总RNA中克隆出生长激素(growth hormone,GH)cDNA的开放阅读框ORF(open reading frame)序列,长603nt,推导的GH前体由200个氨基酸组成。以生长激素氨基酸序列为分子标记,比较了包括黄颡鱼在内的鲇形目6科9种鱼类的生长激素氨基酸序列同源性,并用PHYLIP软件构建了鲇形目6科9种鱼类的系统发育树,可识别3个大的单系类群,即类群Ⅰ:鲇科Siluridae;类群Ⅱ:芒鲇科Pangasiidae+(鱼尝科Bagridae+异囊鲇科Heteropneustidae);类群Ⅲ:鱼回科Ictaluridae+胡子鲇科Clariidae。; 孙玉华谢从新; 关键词：鲇形目

水貂生长激素cDNA的克隆与序列分析被引量：6: 2005年; 从水貂脑垂体中分离提取总RNA,经过RT-PCR分别扩增出水貂生长激素前体肽和成熟肽cDNA。PCR产物经凝胶回收纯化,克隆到载体pGEM-T,然后转化感受态细胞DH5α。在含X-galI、PTG的LB(Amp+)平板上筛选阳性克隆,提取质粒作限制性酶切鉴定后,对目的片段进行测序。结果表明,RT-PCR扩增出的2个cDNA片段碱基数分别为713bp和780bp,用DNAsis2.5软件进行分析表明,此扩增序列与GenBank中发表的水貂生长激素cDNA100%相同。前体肽编码区由651bp组成,编码216个氨基酸,包括长度为29个氨基酸的信号肽;成熟肽的开放阅读框全长564bp,编码187个氨基酸,分子量约为21kDa。通过Blast比对,分析了与人、马、牛、猪、山羊、绵羊、猫、狗、大鼠和小鼠生长激素核苷酸序列的同源性。; 尚丹刘维全孙绍光王吉贵李全张丽朱宝成; 关键词：水貂生长激素CDNA 克隆

水貂生长激素cDNA的克隆与原核表达的相关研究: 水貂生长激素(minkgrowthhormone，mGH)是由脑垂体前叶细胞分泌的一种蛋白质激素，它是具有广泛的生理功能。人工注射动物自身的生长激素，可以明显加快其生长速度，增加体长，提高毛皮质量。但从水貂脑垂体提取天然...; 尚丹; 关键词：水貂生长激素 CDNA 原核表达基因工程; 文献传递

鲫两种不同生长激素cDNA的分子克隆和分析被引量：8: 2004年; 从鲫脑垂体组织提取总RNA ,采用 3′RACE PCR的方法 ,从单一垂体总RNA中扩增出编码两种不同类型鲫生长激素的cDNA :生长激素Ⅰ (GrowthhormoneⅠ ,GHⅠ )和生长激素Ⅱ (GrowthhormoneⅡ ,GHⅡ )。将两种类型的鲫GHcDNA分别克隆到pGEM TEasyVector上进行序列测定和分析。克隆的鲫GHⅠ和GHⅡcDNA均包括编码 188个氨基酸残基的GH成熟肽序列和 3′端的非翻译区 ,但不含信号肽序列和 5′端非编码区。序列分析结果表明 ,鲫GHⅠ的碱基序列和推测的氨基酸序列与国外已经发表的金鱼GHⅠ的同源性分别为 98 7%和 97 9% ;GHⅡ的碱基序列和推测的氨基酸序列与金鱼GHⅡ的同源性分别为 99 1%和 99 5% ,虽然同源性较高。; 劳海华白俊杰叶星简清罗建仁; 关键词：分子克隆生长激素 CDNA

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