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- 甘蔗黄叶病毒的RAA恒温检测方法及其试剂盒与应用
- 本发明公开了甘蔗黄叶病毒的RAA恒温检测引物对,据此还研制了相应试剂盒并建立了相应检测方法。该法原理是利用重组酶,单链结合蛋白和DNA聚合酶在等温的条件下扩增甘蔗黄叶病毒CP蛋白基因的保守区核酸片段。本发明可用于甘蔗中的...
- 温荣辉翁广振王凤林张心茹
- 甘蔗黄叶病毒检测技术规程
- 甘蔗黄叶病毒运动蛋白的原核表达和抗血清制备被引量:2
- 2020年
- 甘蔗黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus,ScYLV)属于黄症病毒科(Luteoviridae)、马铃薯卷叶病毒属(Polerovirus),主要由蚜虫传播,能够侵染甘蔗、玉米等多种作物,引发严重的植物病害。本研究将编码ScYLV运动蛋白(Movement protein,MP)的基因连接到pDB-His-MBP原核表达载体上,转化到大肠杆菌菌株Rosetta中,经IPTG诱导,表达分子量大小约为70 kDa的融合蛋白,将纯化后的融合蛋白制备多克隆抗血清。利用western blot检测抗血清的效价为1∶128000,灵敏度为1∶256,抗血清不与马铃薯卷叶病毒属(Polerovirus)的其它病毒以及黄症病毒属(Luteovirus)病毒发生交叉反应,具有很好的特异性。本文制备的ScYLV MP抗血清可以用于ScYLV的检测,并为深入研究ScYLV与寄主的相互作用等问题提供材料基础。
- 刘玉姿张绍康田畅张晓艳左登攀王颖张宗英韩成贵
- 关键词:甘蔗黄叶病毒运动蛋白原核表达抗血清
- 一种甘蔗黄叶病毒运动蛋白表达纯化方法及其多克隆抗血清的制备
- 本发明涉及一种甘蔗黄叶病毒运动蛋白(ScYLV‑MP)表达纯化方法以及ScYLV‑MP多克隆抗血清的制备和检测试剂盒的构建,其中ScYLV‑MP表达纯化步骤为:(1)ScYLV‑MP基因的调取及扩增:(2)ScYLV‑M...
- 韩成贵张绍康刘玉姿王颖张宗英李大伟于嘉林王献兵张永亮
- 甘蔗黄叶病毒侵染性克隆构建及与诱饵病毒蛋白P0互作的甘蔗ScPetC蛋白的鉴定
- 甘蔗黄叶病是由甘蔗黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus,SCYLV)引起的一种病毒性病害,已经成为甘蔗生产上最为严重的病毒性病害之一。SCYLV属于黄症病毒科(Luteoviridae)马铃薯...
- 郑清雷
- 关键词:甘蔗黄叶病毒
- 高粱蚜应答甘蔗黄叶病毒侵染的转录组学研究
- 甘蔗是世界最重要的糖料和能源作物,具有光合效率高、生物量高等特点。由黄叶病毒(sugarcane yellow leaf virus,SCYLV)侵染引起的甘蔗黄叶病是甘蔗生产上的重要病害之一,由于病毒破坏叶绿体结构,造...
- 柯余生
- 关键词:高粱蚜甘蔗转录组荧光定量PCR
- 甘蔗黄叶病毒CHN3-P0蛋白抑制RNA沉默的关键结构域和氨基酸残基定位
- 甘蔗黄叶病(Yellow Leaf Disease,YLD)是由甘蔗黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus,SCYLV)引起的一种流行性病害,在全球种植甘蔗的国家和地区均有发病,严重影响甘蔗的产...
- 赵春慧
- 关键词:甘蔗黄叶病毒RNA沉默抑制子RNA沉默
- 甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究被引量:9
- 2016年
- 甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分离物CP基因序列,经过比对选取保守序列作为干扰序列。通过在序列两端添加酶切位点,合成并连接成双价甘蔗黄叶病和花叶病毒干扰序列,然后构建到中间载体p HANNIBAL上,形成双价RNAi干扰结构,最后插入到p ART27上形成干扰表达载体。利用基因枪轰击甘蔗品种福农15号愈伤组织进行转化,经G418筛选获得抗性再生植株。通过提取DNA和RNA分析,证实双价RNAi干扰结构不仅以不同拷贝整合到甘蔗基因组中,而且得到了转录表达。
- 陈利平陈平华陈忠伟王恒波许莉萍刘迪高三基郭晋隆陈如凯
- 关键词:甘蔗黄叶病毒甘蔗花叶病毒CP基因
- 一种检测和鉴定甘蔗黄叶病毒基因型的试剂盒
- 本发明涉及一种检测和鉴定甘蔗黄叶病毒基因型的试剂盒。本发明试剂盒中至少包括SCYLV-P0/F3和SCYLV-P0/R2简并引物对,试剂盒内还有RT反应液、PCR反应液、限制性内切酶及其缓冲液、阳性对照RNA模板、阴性对...
- 高三基林艺华陈建生赵春慧吴小斌傅华英陈如凯刘营航
- 甘蔗黄叶病毒P0蛋白基因细菌双杂交诱饵载体的构建和自激活鉴定
- 2015年
- 由甘蔗黄叶病毒所引起的甘蔗黄叶病是甘蔗生产中潜在的重要病毒病害之一。该病毒属黄症病毒科(Luteoviridae)中的马铃薯卷叶病毒属(Poleroviruses)。根据甘蔗黄叶病毒海南分离物(SCYLV-CHN-HN1)全基因组序列(Gen Bank No.HQ342888),设计P0蛋白基因的一对特异性引物P0-Bait F/P0-Bait R。以实验室保存的重组质粒p MD18T-P0为DNA模板,PCR扩增P0蛋白基因。然后将P0蛋白基因和细菌双杂交诱饵质粒p BT分别进行双酶切后,连接构建重组诱饵质粒p BT-P0。经PCR扩增、双酶切鉴定和序列分析,表明获得了细菌双杂交重组诱饵载体p BT-P0,且编码框正确。将重组载体p BT-P0转化细菌双杂交系统Bacterio Match RⅡScreening Reporter感受态细胞,进行自激活和毒性验证。结果显示p BT-P0重组载体在细菌双杂交系统中无自激活作用及毒性作用,表明本试验构建的p BT-P0可应用于该系统筛选与之互作的寄主蛋白。
- 杨文君余乃通张雨良王健华谢慧敏刘锋刘志昕
- 关键词:甘蔗黄叶病毒
相关作者
- 张雨良

- 作品数:118被引量:335H指数:8
- 供职机构:中国热带农业科学院热带生物技术研究所
- 研究主题:甘蔗 甘蔗黄叶病毒 番木瓜 原核表达 香蕉束顶病毒
- 高三基

- 作品数:144被引量:656H指数:16
- 供职机构:福建农林大学
- 研究主题:甘蔗 甘蔗黄叶病毒 白条 转基因甘蔗 甘蔗愈伤组织
- 陈如凯

- 作品数:564被引量:3,113H指数:31
- 供职机构:福建农林大学
- 研究主题:甘蔗 转基因甘蔗 斑茅 甘蔗品种 配合力
- 王洪星

- 作品数:55被引量:134H指数:5
- 供职机构:海南大学
- 研究主题:甘蔗黄叶病毒 甘蔗 槟榔 PCR 黄化
- 杨文君

- 作品数:26被引量:31H指数:4
- 供职机构:雅安职业技术学院
- 研究主题:甘蔗黄叶病毒 蛋白基因 诱饵 原核表达 CP