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1种CPPs调节瑟氏泰勒虫病DNA疫苗免疫应答: 2023年; 人工合成一种细胞穿膜肽,制备穿膜肽-DNA疫苗复合物,先将其转染Vero细胞,采用间接免疫荧光抗体试验(IFTA)鉴定目的基因在Vero细胞中的表达;再将40只6周龄雌性昆明小鼠分为CPPs-pVAX1-P33、pVAX1-P33、pVAX1和PBS 4个组;分别肌肉注射相应免疫原,采用ELISA方法检测CPPs血清中IgG抗体水平和IL-4、IFN-γ细胞因子水平;在三免2周后检测小鼠脾脏中CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)含量。结果显示,CPPs-pVAX1-P33复合物成功转染到Vero细胞,并在其中获得表达;CPPs-pVAX1-P33免疫组昆明小鼠血清中IgG抗体水平,IL-4和IFN-γ细胞因子水平及淋巴细胞亚群CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)含量均显著或极显著高于pVAX1-P33(P<0.05或P<0.01)。结果表明,本试验制备的CPPs能显著诱导瑟氏泰勒虫DNA疫苗的体液免疫和细胞免疫应答反应。; 闫宗斌张国帅金春梅于龙政薛书江宋建臣许应天; 关键词：瑟氏泰勒虫 DNA疫苗免疫应答

吉林省牛瑟氏泰勒虫病分子流行病学调查被引量：3: 2022年; 为了解吉林省牛瑟氏泰勒虫病感染情况,本试验根据牛瑟氏泰勒虫18S rRNA基因序列设计引物,应用聚合酶链式反应(PCR)方法对吉林省珲春、通化、安图、舒兰、龙井、辽源、白山共7个县市采集的247份血液样本进行了牛瑟氏泰勒虫病分子流行病学调查,并进行不同地区、不同饲养方式、不同性别及不同年龄之间的比较。结果显示,牛瑟氏泰勒虫总体阳性率为39.68%(98/247),其中通化阳性率最高为70.00%(14/20),龙井阳性率最低为20.00%(8/40),地区之间除安图和白山差异不显著(P>0.05)外,其他各地区之间均差异显著(P<0.05);散养牛阳性率64.44%(58/90)与规模化养殖牛阳性率25.48%(40/157)之间差异极显著(P<0.01);母牛阳性率38.46%(50/130)与公牛阳性率41.03%(48/117)之间差异不显著(P>0.05);1岁以内牛阳性率为56.67%(34/60),1~3岁牛阳性率为42.22%(38/90),3岁以上牛阳性率为26.80%(26/97),不同年龄间差异显著(P<0.05)。结果表明,吉林省牛瑟氏泰勒虫感染的情况普遍存在。本次调查为吉林省牛瑟氏泰勒虫病的有效防控提供了科学依据。; 闵鹏飞宋建臣许应天王浩杨冰祎千慧燕张爽张爽; 关键词：牛瑟氏泰勒虫 PCR 分子流行病学

一种细胞穿膜肽增强牛瑟氏泰勒虫DNA疫苗免疫应答的研究: 细胞穿膜肽（cell-penetrating peptides,CPPs）是一类具有穿膜功能的小分子短肽,可高效携带核酸、肽、蛋白质等生物大分子穿过细胞膜进入细胞质发挥功能,在介导生物大分子药物入胞上有着高效、低毒等诸多...; 闫宗斌; 关键词：CPPS 免疫应答

荧光定量PCR检测牛瑟氏泰勒虫方法的建立: 2021年; 本试验旨在建立快速诊断牛瑟氏泰勒虫的荧光定量PCR检测方法。以常规PCR方法扩增牛瑟氏泰勒虫P33基因,将其克隆至载体pMD-18T,然后进行质粒标准品的构建,以此为模板建立牛瑟氏泰勒虫P33基因TaqMan荧光定量PCR和SYBR Green荧光定量PCR检测方法。结果显示:2种方法均能检测到2.26~2.26×10^(8)copies/μL范围,特异性试验中与其他病原体均无特异性扩增曲线,批内和批间变异系数都小于4%。鉴于2种方法均具有较好的敏感性、特异性和重复性,适用于牛瑟氏泰勒虫P33基因的临床实验室鉴别。; 王轶男胡诗悦陈洪涛金春梅金一于龙政; 关键词：牛瑟氏泰勒虫荧光定量PCR

细胞穿膜肽介导的基因转化及其对瑟氏泰勒虫p33基因的克隆与表达: 细胞穿膜肽(Cell penetrating peptides，CPPs)是一类氨基酸数目为5～30的小分子多肽。由于其自身可穿透细胞膜却不会引起细胞损伤，并且它可以运载亲水分子如核酸，肽，蛋白质等生物大分子物质进入胞内...; 闫可心; 关键词：瑟氏泰勒虫基因克隆

绒山羊环形泰勒虫和瑟氏泰勒虫的鉴别诊断分析: 2020年; 【目的】实现对绒山羊环形泰勒虫和瑟氏泰勒虫的鉴别诊断。【方法】研究在形态学鉴定的基础上,结合分子生物学方法,分别根据二者的差异保守基因30KDa基因和MPSP表面蛋白基因设计上下游引物进行片段扩增和序列鉴定。【结果】制作的血涂片经显微镜观察,在红细胞内一侧边缘可见一个或多个,环形,杆状,梨籽形等多形态的虫体,经姬姆萨染色后,虫体原生质呈淡蓝色,染色质呈红色。以发生泰勒虫病绒山羊的血液DNA为模板,进行PCR扩增,分别在193 bp和875 bp处获取目的条带。测序数据和GenBank登录的环形泰勒虫和瑟氏泰勒虫同源性为100%。此外,通过敏感性试验发现,实验所建立的PCR检测方法能够检测出环形泰勒虫和瑟氏泰勒虫的最低检测量分别为0.15 fg和0.17 fg。; 仇薪鑫牛华锋贾燕青张振仓; 关键词：绒山羊泰勒虫

关岭自治县关岭牛瑟氏泰勒虫的分子生物学检测及不同季节感染率统计被引量：3: 2020年; 为了掌握关岭牛瑟氏泰勒虫的感染情况,为有效防治提供科学依据,试验参考NCBI数据库中的瑟氏泰勒虫MPSP基因序列(登录号:MF996372.1)设计引物,应用PCR方法对采自关岭自治县12个乡镇规模化养牛场的262份关岭牛血液样品进行检测,并对扩增片段进行测序和序列分析。结果:(1)以顶云街道办同富养殖场3号样品为模板的扩增片段(GLT)为485 bp。基于MPSP基因构建的种系进化树分析表明,GLT与瑟氏泰勒虫中国参考株MF996372、MG664538聚为1支,与其他参考株在不同分支上,可判定GLT为瑟氏泰勒虫特异性基因片段。(2)统计分析结果表明:关岭自治县关岭牛瑟氏泰勒虫夏季感染率为5.10%,冬季感染率为0.95%,夏季感染率明显高于冬季节。; 冯明祥图雅徐雨韦登雄刘苹陈颖杨和俊; 关键词：瑟氏泰勒虫分子生物学检测感染率

瑟氏泰勒虫血液直接PCR检测方法的应用被引量：1: 2019年; 为建立快速、灵敏、特异、低成本的瑟氏泰勒虫检测方法,根据GenBank上发表的瑟氏泰勒虫p33基因序列设计合成1对引物,通过PCR退火温度的筛选、特异性试验、敏感性试验和重复性试验,建立瑟氏泰勒虫血液直接PCR检测方法。该方法能扩增瑟氏泰勒虫p33基因的1段416 bp序列,而与弓形虫、新孢子虫、牛附红细胞体基因序列均无交叉反应。该方法检测出的1μL血液最大稀释倍数为40。应用血液直接PCR方法和常规PCR对吉林省8个地区某牛场采取的210份样本进行检测的结果表明:直接PCR阳性率为30.0%,而常规PCR阳性率为25.7%,差异不显著(P>0.05);两者的总符合率为94%,阳性符合率为80%,阴性符合率为92%;2种方法之间的Kappa值为0.85,说明该法更具有推广和应用价值。该试验成功应用了血液直接PCR检测方法,为瑟氏泰勒虫病的快速诊断和流行病学调查提供了一种新的方法。; 赵云于龙政闫可心薛书江许应天; 关键词：瑟氏泰勒虫

瑟氏泰勒虫病文献综述: 2017年; 本文旨在介绍泰勒虫的分类,瑟氏泰勒虫病的临床症状、剖检变化、诊断方法及防治。伴随着全球经济迅速飞快的发展,养牛产业逐渐快速的扩大,瑟氏泰勒虫病的感染区域也随之不断地扩大。这种血液原虫病给我国的养殖业造成了不可挽回的经济损失以及引起兽医界的高度关注,因此,系统全面地了解瑟氏泰勒虫病变得十分必要。; 赵云伍生军倪婷婷王淼陈健; 关键词：瑟氏泰勒虫

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