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冠状病毒被引量:5
1996年
冠状病毒(BCV)是的一种致病性病毒.目前普遍认为是新生犊腹泻的重要病原,还可引起的呼吸道感染和成年的冬季血痢。美国Mebus等首次报道了本病毒。此后证明BCV分布广泛,许多国家和地区已发现此病。1987年,我国有本病报道。本文就有限文献对BCV进行阐述。1 病原特征 BCV届冠状病毒科抗原2群的成员,病毒粒子具有多形性,但基本呈球形。直径为80~60nm,平均直径约120nm。基因组由不分段的单股(+)
杨建德刘杰
关键词:牛病牛冠状病毒病原流行病学病理变化
冠状病毒引起的犊急性腹泻治疗
2025年
当前,我国养殖业呈现出集约化、规模化发展的趋势,为广大养殖人员带来了可观的经济效益。然而,也正是因为养殖规模的扩大,受到饲养管理、营养供给、免疫不到位等因素的影响,使得冠状病毒引起的犊急性腹泻问题频繁发生,给养殖行业带来了严重威胁。此种病毒主要是经过消化道侵入犊体内,使之出现精神萎靡、食欲不振、腹痛腹泻、机体脱水等一系列症状,同时也会影响到营养物质的消化吸收,不利于犊的健康生长和快速发育。本文首先分析冠状病毒引起的犊急性腹泻的流行病学、临床症状,其次从几个方面深入探究此种疾病的治疗方法和预防策略,以期为养殖行业的健康可持续发展保驾护航。
黄洁
关键词:牛冠状病毒犊牛腹泻
一株冠状病毒的分离鉴定
2025年
本研究通过RT-PCR检测到冠状病毒BCoV阳性病料,使用HRT-18细胞成功分离1株BCoV,并对N基因进行克隆、测序及遗传进化分析,最终确定分离株为该病毒,命名为NN221214株。根据对N基因序列分析发现NN221214与中国江苏冠状病毒株HBSJZ2112同源性最高99.6%。该毒株与中国江苏省冠状病毒HBSJZ2112和中国四川株SWUN-A10聚集在一个大分支,遗传距离近,但与疫苗株处于不同的分支,遗传距离较远,该毒株在广西的传播可能与的引种、运输、交易等因素相关。本研究为广西地区冠状病毒的研究提供数据支撑,在一定程度上也为冠状病毒的防控奠定基础,同时具有重要的公共卫生和安全意义。
李晴晴苏亚权李常挺马春霞马春霞李军李军吴翠兰滕翎韦天超彭昊
关键词:牛冠状病毒病毒分离N基因
冠状病毒单克隆抗体的制备
2025年
冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)是引起犊肠胃炎的主要病原之一。为获得由天然免疫反应引起的单克隆抗体,采用纯化BCoV蛋白足垫法免疫BALB/c小鼠;采用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞;经6~7次亚克隆获得了4株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,分别是5D6、5G5、1B9、1D9;采用腹水法制备大量单克隆抗体,并对腹水效价为1∶6.4×10~5的5D6纯化;最后,利用IFA、抗体亚类鉴定试验、杂交瘤细胞染色体数目检查、Western blot及特异性试验对4株单克隆抗体生物学活性鉴定。结果显示:IFA试验表明4株单克隆抗体均可以与BCoV反应呈特异性红光,制备的4株单克隆抗体轻链均为Kappa链,1D9、5D6、5G5重链为IgG2a,而1B9重链为IgG1;杂交瘤细胞染色体检查结果显示染色体数目在95~110个;Western blot结果显示,单克隆抗体与感染病毒的细胞存在55 kDa的特异性条带,且特异性试验结果表明4株单克隆抗体均不与感染传染性鼻气管炎病毒副流感病毒3型及轮状病毒的细胞发生非特异性反应。综上,利用BCoV全病毒制备了4株单克隆抗体,能与BCoV发生特异性反应,生物学活性良好,为BCoV特异性诊断方法的建立及病毒的受体感染机制的研究奠定了基础。
项钰周玉龙
关键词:牛冠状病毒单克隆抗体
冠状病毒流行病学及实验室诊断方法研究
2025年
冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)为冠状病毒科β冠状病毒属,有囊膜单股正链RNA病毒,可导致呼吸道感染、犊腹泻和成年冬季痢疾等疾病,给养业造成了巨大的经济损失。BCoV具有潜在的跨物种传播能力,因此深入开展对BCoV的研究对其防控具有重要意义。对BCoV病原学概况、临床表现、流行情况及分布、实验室诊断方法进行了综述,以期对BCoV早期诊断和监测提供参考。
吉木日布谭帮琼吉巴阿拉
关键词:牛冠状病毒流行病学实验室
HE基因受体结合域变异对冠状病毒感染的影响
2025年
为研究HE基因受体结合域变异对冠状病毒(BCoV)感染的影响,构建了pEGFP-HE420、pEGFP-HE424和pEGFP-HE428重组质粒。三种重组质粒分别转染至HCT-8细胞,然后感染NX-2021-B2-HE424分离株通过RT-qPCR检测病毒mRNA在吸附、内化和复制阶段的表达水平以及通过TCID 50检测胞内和胞外的病毒滴度。结果显示,pEGFP-HE420、pEGFP-HE424和pEGFP-HE428三种重组质粒均能在HCT-8细胞中表达。与pEGFP-HE424相比,HE基因受体结合域缺失或插入不影响病毒的吸附、内化、复制及胞内病毒滴度;HE基因受体结合域缺失降低了BCoV胞外病毒滴度;HE基因受体结合域插入不影响BCoV胞外病毒滴度。本研究通过构建仅受体结合域变异的三种HE基因的重组质粒在HCT-8细胞上探究了其对冠状病毒感染的影响,为研究冠状病毒的感染机制提供了数据支撑。
姜慧华赵龙郭抗抗
关键词:牛冠状病毒病毒感染
冠状病毒N基因的原核表达和多克隆抗体的制备
2025年
为制备冠状病毒N蛋白多克隆抗体,建立简单快捷的冠状病毒检测方法。根据冠状病毒N基因序列设计引物,将N基因重组至PET-30a载体上,经PCR及测序鉴定重组载体构建成功;将构建的PET-30a-N重组质粒转入大肠埃希氏菌DH5-α和Rosetta(DE3)感受态细胞,进行扩增和诱导表达,后经超声破碎后获取N蛋白并进行蛋白纯化;最后将纯化后的N蛋白与弗氏佐剂乳化后免疫新西兰白兔,共制得35 mL抗N蛋白多克隆抗体血清,经Western blot和IFA鉴定,抗N蛋白多克隆抗体有良好的特异性,试验制备的抗N蛋白冠状病毒多克隆抗体可用于冠状病毒的检测。
刘文锴曹兴旺汪萍金映红金映红李月薛晶李晓卓韩翔舒郑启铭蒋松夏俊
关键词:牛冠状病毒N蛋白多克隆抗体原核表达
体外对冠状病毒复制具有抑制效应藏药的筛选
2025年
本研究旨在筛选出对冠状病毒(BCoV)体外复制具有抑制效应的藏药。构建BCoV核衣壳(N)蛋白原核表达载体,诱导表达后将纯化的蛋白分别免疫小鼠和兔,获得鼠抗和兔抗N蛋白多克隆抗体,建立用于测定BCoV复制的Western blot和间接免疫荧光法(IFA);水煎法获得21种候选藏药的水提物,CCK-8法测定水提物对人结直肠腺癌细胞(HCT-8)的最大安全浓度,以BCoV感染HCT-8细胞为研究对象,分别设置BCoV感染组、藏药水提物处理组、利巴韦林处理组,在BCoV感染24 h后分别应用实时荧光定量PCR、Western blot、IFA测定细胞中BCoV复制量,统计分析藏药水提物对病毒复制的抑制作用,筛选对BCoV具有显著抑制作用的藏药。结果显示:分别制备鼠抗与兔抗BCoV N蛋白多克隆抗体,建立了检测BCoV的Western blot与IFA方法;21种藏药中的15种具有显著抑制BCoV复制效应(P<0.01),其中青藏大戟、诃子、瑞香狼毒3种藏药对BCoV复制的抑制作用优于利巴韦林。本研究筛选到15种对BCoV体外复制具有抑制效应的藏药,其中青藏大戟、诃子、瑞香狼毒3种藏药抑制作用效果显著,为BCoV防治药物的开发奠定了基础。
赵龙林静怡豆薇徐婷萱顾庆云高海慧李生庆李生庆
关键词:牛冠状病毒核衣壳蛋白多克隆抗体藏药病毒复制
一种同时检测冠状病毒刺突蛋白、包膜蛋白和跨膜蛋白的引物组、试剂盒及方法
本发明公开了一种同时检测冠状病毒刺突蛋白、包膜蛋白和跨膜蛋白的引物组、试剂盒及方法。属于分子生物学检测技术领域。本发明实现了冠状病毒刺突蛋白、包膜蛋白和跨膜蛋白的同时检测,相比于现有技术而言,极大的提高了检测的灵敏性...
徐晓静谢梦圆石晓娇丁宁马利琼
冠状病毒刺突蛋白研究进展被引量:2
2024年
冠状病毒(bovine coronavirus, BCoV)是一种能感染肠道、呼吸道引起新生犊腹泻、成年冬季痢疾和各年龄段的呼吸道疾病的重要病原体,严重危害着养业的发展。刺突(spike, S)蛋白是该病毒主要的结构蛋白和免疫原性蛋白,在病毒初始感染和诱导保护性免疫中发挥重要作用。本文就该病毒刺突蛋白的结构特征、生物学功能及应用研究、免疫原性、变异原因和潜在双受体系统的最新研究进展做一阐述,期望为新型疫苗研制和靶点治疗药物开发提供科学依据,以便制定快速有效的安全防治对策应对预出现的新毒株。
刘强牛小霞方敏刘艳玲高辉陈吉祥加华才让张思浓张思浓
关键词:牛冠状病毒刺突蛋白生物学功能

相关作者

汤承
作品数:459被引量:1,667H指数:19
供职机构:西南民族大学
研究主题:牦牛 山羊 病毒 PCR 绵羊肺炎支原体
岳华
作品数:389被引量:1,247H指数:16
供职机构:西南民族大学
研究主题:牦牛 副猪嗜血杆菌 病毒 PCR 新城疫病毒
侯喜林
作品数:208被引量:711H指数:14
供职机构:黑龙江八一农垦大学动物科技学院
研究主题:干酪乳杆菌 奶牛 原核表达 大肠杆菌 ETEC
徐晓静
作品数:58被引量:134H指数:6
供职机构:内蒙古农业大学
研究主题:牛轮状病毒 试剂盒 引物 牛冠状病毒 探针
李军
作品数:408被引量:899H指数:13
供职机构:广西大学
研究主题:试剂盒 特异性检测 引物 大肠杆菌 流行病学调查