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基于RT-RPA和试纸条的烟草环斑病毒可视化快速检测技术研究
2025年
烟草环斑病毒(tobacco ringspot virus,TRSV)分布于50多个国家,是我国进境植物检疫性病毒。该病毒的寄主范围广,可侵染54科300多种植物;通过机械方式、嫁接、线虫媒介以及种子传播,对作物产量和品质时常造成严重损失。本研究选择了TRSV的外壳蛋白基因序列设计引物,建立了基于反转录(reverse transcription,RT)-重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)和侧流层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD)的RT-RPA-LFD检测方法,灵敏度为486 pg/μL。验证结果表明本研究所设计的RPA引物特异性强,操作简便,适用于田间或口岸现场,利于TRSV的监测与暴发流行的早期预警。
韩春雪徐司琦王欣宇谢丽杨王琰周涛周涛
关键词:烟草环斑病毒
一种利用多重DPO-RT-PCR检测南方菜豆花叶病毒烟草环斑病毒的方法
本发明涉及病毒检测领域,尤其涉及一种利用多重DPO‑RT‑PCR检测南方菜豆花叶病毒烟草环斑病毒的方法。本发明建立的SBMV及TRSV的一步法双重DPO‑RT‑PCR检测方法具有特异性强、适用范围广的优点,可用于南方菜...
袁俊杰龙阳刘芳李冠斯魏霜马新华卢乃会杨卓瑜陈文
一种烟草环斑病毒单克隆抗体及其制备方法和应用
本发明公开了一种烟草环斑病毒单克隆抗体及其制备方法和应用,属于免疫工程技术领域。本发明公开的一种烟草环斑病毒单克隆抗体及其制备方法和应用,以重组表达的全长烟草环斑病毒外壳蛋白TRSV(523aa)免疫BALB/c小鼠,获...
张蓬军傅慧兰刘光富郝培应俞晓平
一种烟草环斑病毒单链抗体TRAB1及其制备方法和应用
本发明公开了一种烟草环斑病毒单链抗体TRAB1及其制备方法和应用,属于生物高分子技术领域。本发明公开的一种烟草环斑病毒单链抗体TRAB1,由15aa组氨酸标签区、184aa烟草环斑病毒重链可变区、15aa连接肽和反向连接...
张蓬军傅慧兰杨倩倩刘光富俞晓平
基于微流控阻抗法的烟草环斑病毒检测装置研发
近几年来新冠肺炎病毒引发的全球疫情,使病原微生物引发的生物安全事件受到了社会的广泛关注,同时也加快了对于病原微生物检测的研究速度。针对如何实现病原微生物快速检测的问题,本文以烟草环斑病毒作为检测对象,基于微流控阻抗法,设...
夏程豪
关键词:安全检测微流控阻抗烟草环斑病毒
烟草环斑病毒RT-PCR检测体系的优化被引量:3
2021年
烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是豇豆花叶病毒科(Comoviridae)线虫传多面体病毒属(Nepovirus)的代表种,是我国公布的二类进境检疫有害生物。建立特异性强、灵敏性高的检测体系是有效控制TRSV传播的技术保障。本研究在分析引物的特异性、优化退火温度及dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶浓度的基础上,建立了完善的TRSV RT-PCR检测体系。筛选出的TRSV特异性引物对为1-1F/1-1R,在退火温度为53℃、dNTPs终浓度为0.075 mmol/L、引物终浓度为0.30μmol/L、Taq DNA聚合酶终浓度为0.035 U/μL条件下检测效率最高,可从发病植物总RNA量为0.090 ng中检测到目的片段。研究结果对准确灵敏地检测TRSV具有重要意义。
郇晓雪刘晓宇房乐杜传印李广强耿超李向东田延平
关键词:烟草环斑病毒
一种烟草环斑病毒单克隆抗体及其制备方法和应用
本发明公开了一种烟草环斑病毒单克隆抗体及其制备方法和应用,属于免疫工程技术领域。本发明公开的一种烟草环斑病毒单克隆抗体及其制备方法和应用,以重组表达的全长烟草环斑病毒外壳蛋白TRSV(523aa)免疫BALB/c小鼠,获...
张蓬军傅慧兰刘光富郝培应俞晓平
文献传递
双重DPO-RT-PCR检测南方菜豆花叶病毒烟草环斑病毒被引量:2
2021年
南方菜豆花叶病毒烟草环斑病毒是中国进境植物检疫性有害生物,属于大豆种传病害,为提高在进口大豆中两种病毒的检出率,本研究针对SBMV及TRSV基因组中的保守序列,分别设计特异性DPO引物,建立了一种快速检测这两种植物病毒的双重DPO-RT-PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏度及退火温度敏感性等性能进行评价。结果表明:该方法能准确地从10种植物病毒中鉴定出SBMV及TRSV,表现出良好的特异性,且检测灵敏度可达0.02 ng·μL^(-1),退火温度为在45~65℃时该方法检测结果无明显差异,表现出对退火温度不敏感的特性。研究结果为进出境植物病毒的高通量检测提供了新的思路。
魏霜袁俊杰杨卓瑜马新华卢乃会陈文渭婷玉龙阳
关键词:南方菜豆花叶病毒烟草环斑病毒进口大豆种传病毒
一种烟草环斑病毒单链抗体TRAB1及其制备方法和应用
本发明公开了一种烟草环斑病毒单链抗体TRAB1及其制备方法和应用,属于生物高分子技术领域。本发明公开的一种烟草环斑病毒单链抗体TRAB1,由15aa组氨酸标签区、184aa烟草环斑病毒重链可变区、15aa连接肽和反向连接...
张蓬军傅慧兰杨倩倩刘光富俞晓平
检测烟草环斑病毒的交叉引物等温扩增引物组、试剂盒及应用
本发明公开了一种检测烟草环斑病毒的交叉引物等温扩增引物组、试剂盒及应用。针对检测烟草环斑病毒存在的问题,本发明涉及并筛选了具有高特异性的检测烟草环斑病毒的交叉引物等温扩增引物组,并进一步涉及了试剂盒和检测方法。本发明提供...
杨倩倩俞晓平张蓬军 王道刘光富郝培应许益鹏
文献传递

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作品数:78被引量:278H指数:10
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