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激活雪旺细胞干预骨髓间充质干细胞对大鼠坐骨神经损伤的实验研究被引量:5
2020年
目的探讨激活雪旺细胞(activated schwann cells,ASCs)干预骨髓间基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)联合异种神经移植体(acellular nerve xenograft,ANX)修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法取大鼠骨髓腔内BMSCs,另取大鼠的ASCs和普通SCs,行原代培养。将两种细胞置于Transwell培养皿中培养并分成三组:BMSCs组,SCs-BMSCs组及ASCs-BMSCs组。在培养皿中培养后第2、4、6和8天,用CCK-8法检测各组BMSCs生物学活性,通过q-PCR检测各组脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的mRNA表达水平。在无菌条件下制备10 mm坐骨神经缺损的大鼠模型,制作异种神经支架复合体(兔源胫神经)。将SD大鼠分为三组(n=10):ANX+BMSCs组,ANX+SCs-BMSCs组及ANX+ASCs-BMSCs组。将各组细胞打入支架,复合支架培养3 d,移植到大鼠模型中。术后8周通过神经电生理检测各组患肢感觉神经传导速度(sensory nerve conduction velocity,SCV),使用q-PCR检测神经移植体内神经营养因子(BDNF、NGF和bFGF)表达水平,另比较三组模型的下肢患侧/健侧腓肠肌细胞横截面积比恢复率。结果CCK-8测定发现共培养系统中BMSCs组细胞增殖活性强于单细胞组,第2天和第4天,三组的活性差异无统计学意义(P>0.05),第6天ASCs-BMSCs组增殖活性强于BMSCs组与SCs-BMSCs组,差异有统计学意义(P<0.05),BMSCs组与SCs-BMSCs组之间差异无统计学意义(P>0.05)。通过q-PCR检测BMSCs组中BDNF、NGF及bFGF的mRNA表达最低,ASCs-BMSCs组含量最高(P<0.05)。经8周饲养后的动物实验,通过检测发现,ANX-ASCs-BMSCs组的SCV,ANX内相关神经因子表达量以及ANX-ASCs-BMSCs组的大鼠患侧/健侧腓肠肌肌细胞横截面积均最大。结论ASCs能够促进BMSCs的分化增殖;运用ANX-ASCs-BMSCs促进周围神经功能再生。
张博闻赵飞丁一黄永禄巩凡方芳段昉王贺颖仇莽莽马宏宁
关键词:间充质干细胞激活态雪旺细胞
iPS细胞衍生的神经干细胞联合激活雪旺细胞修复脊髓损伤的实验研究
目的:  脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)是困扰医学界的一大难题。干细胞移植促进脊髓损伤后神经修复是目前研究的重点和热点。诱导型多能干细胞(Induced pluripotent stem cel...
史桂东
关键词:脊髓损伤诱导性多能干细胞激活态雪旺细胞
SHH基因转染激活雪旺细胞移植修复脊髓损伤的实验研究
目的:  脊髓损伤临床修复面临难题,再髓鞘化是修复的主要瓶颈之一,本课题通过脂质体介导音猥因子(Sonic Hedgehog,SHH)基因转染大鼠激活雪旺细胞,过表达音猥因子并增强激活雪旺细胞增殖和表达神经营养因子的...
唐亮
关键词:脊髓损伤基因转染雪旺细胞
文献传递
标准化激活雪旺细胞修复脊髓损伤的临床前期研究
【目的】  本研究旨在获取非人灵长类动物雪旺细胞高效激活方法、高表达营养因子的关键技术,制备出标准化非人灵长类动物脊髓损伤的模型,进而移植激活雪旺细胞修复灵长类动物损伤的脊髓,通过行为学评分,感觉诱发电位及运动诱发电...
李岩
关键词:脊髓损伤激活态雪旺细胞
激活雪旺细胞联合脐血间充质干细胞移植修复脊髓损伤的研究被引量:4
2017年
目的观察激活雪旺细胞(ASCs)与人脐血间充质干细胞(HUCBMSCs)局部联合移植后脊髓损伤局部神经标志物的变化,探讨ASCs与HUCBMSCs联合移植在促进大鼠脊髓损伤后轴突再生和功能恢复方面所起的作用。方法采用前期实验方法获得ASCs及HUCBMSCs,并制作成年雌性Wistar大鼠胸10脊髓损伤模型。将80只大鼠随机分成4组:空白对照组[注射杜尔伯科改良伊格尔培养基(DMEM)];ASCs移植组;HUCBMSCs移植组;ASCs与HUCBMSCs联合移植组。分别将DMEM、ASCs、HUCBMSCs以及ASCs+HUCBMSCs移植入对应组的脊髓损伤部位。术后采用Basso,Beattie和Bresnahan (BBB)评分对大鼠的后肢功能恢复情况进行评价。于脊髓损伤后1、2、3、4周取脊髓损伤中心组织进行Western blot半定量检测及实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测。12周后,从每组随机选取8只大鼠进行10%生物素葡聚糖胺(BDA)顺行示踪标记。标记2周后处死大鼠,将损伤段脊髓取出作5 μm快速冰冻切片后,进行BDA显影、苏木素-伊红(HE)染色,神经丝蛋白-200(NF-200)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫组织化学染色。综合以上数据并进行统计学分析。结果Western blot及FQ-PCR结果显示NF-200及MBP表达量在各组均有升高,但以联合移植组最高(损伤后4周NF-200:4.581±0.588,MBP:3.922±0.259);损伤后8周,共移植组大鼠的BBB评分[(16.800 0±0.223 0)分]显著高于其余3组(P=0.000)。BDA顺行示踪标记显示共移植组较ASCs移植组和HUCBMSCs移植组有较多的再生神经纤维通过损伤区,而空白对照组几乎未见再生神经纤维穿越。HE染色显示细胞共移植组损伤空洞明显小于其余3组(P=0.000)。结论ASCs联合HUCBMSCs移植治疗脊髓损伤可促进更多的HUCBMSCs向神经元方向分化,促进轴突再生,改善脊髓损伤后功能的恢复。
周先虎冯世庆刘燊郝岩魏志坚林伟樊保佑任一鸣史桂东陈家童
关键词:脐血间充质干细胞激活态雪旺细胞脊髓损伤神经修复分化
神经干细胞联合激活雪旺细胞与PCL支架生物相容性的实验研究
【目的】本课题拟通过检测激活雪旺细胞(activated Schwann cells,ASCs)和非激活雪旺细胞(Schwann cells,SCs)之间营养因子的表达差异,探究体外培养对ASCs的功能状影响,及A...
樊保佑
关键词:神经干细胞激活态雪旺细胞生物相容性
探究激活雪旺细胞与生物可降解聚己内酯支架的生物相容性
2017年
目的:探究激活雪旺细胞(ASC)、非激活雪旺细胞(SC)与生物可降解聚己内酯(PCL)支架的生物相容性。方法:实验组由结扎7 d Wistar大鼠坐骨神经提取激活雪旺细胞,对照组由未结扎大鼠坐骨神经提取非激活雪旺细胞。将细胞分别种植在PCL支架上,通过CCK-8检测细胞增殖活性,通过结晶紫观察细胞分布,激光共聚焦显微镜观察细胞和功能表达。结果:ASC与SC相比S-100阳性率无明显差异;PCL支架上ASC增殖率明显高于SC;ASC能够贴附PCL纤维生长,可沿纤维长轴分布,进入支架内部,并且表达髓鞘碱性蛋白(MBP)。结论:激活雪旺细胞比非激活雪旺细胞能够更好地在PCL支架上生长,PCL支架具有良好的生物相容性。
樊保佑林伟史桂东任一鸣魏志坚郝岩周先虎冯世庆
关键词:激活态雪旺细胞生物相容性
激活雪旺细胞联合骨髓间充质干细胞移植修复脊髓损伤的蛋白组学分析
【目的】  采用iTRAQ蛋白组学技术筛选脊髓损伤(Spinal Cord Injury,SCI)后激活雪旺细胞(Activated Schwann cells,ASCs)联合骨髓间充质干细胞(Bone marrow ...
刘毅
关键词:脊髓损伤激活态雪旺细胞骨髓间充质干细胞蛋白组学
正常激活雪旺细胞与轴突再生相关基因甲基化差异的实验研究
【目的】  雪旺细胞(Schwann cells, SCs)是周围神经系统中最重要的细胞之一。成熟的SCs包裹神经元的轴突形成髓鞘,此时的SCs称为正常雪旺细胞(Normal Schwann cells, NSCs)。...
林伟
关键词:轴突雪旺细胞
激活雪旺细胞源性神经营养因子对胚芽干细胞向神经细胞分化的影响
目的:  探索小鼠胚芽干细胞(Embryonic Germ Cells,EGCs)分离、培养的有效方法;观察激活雪旺细胞(Activated Schwann cells, ASCs)源性神经营养因子对小鼠EGCs向神经...
曹代桂
关键词:激活态雪旺细胞神经营养因子动物模型
文献传递

相关作者

劳杰
作品数:145被引量:1,339H指数:19
供职机构:复旦大学
研究主题:臂丛 臂丛神经损伤 神经再生 激活态雪旺细胞 周围神经
冯世庆
作品数:403被引量:2,443H指数:24
供职机构:天津医科大学总医院
研究主题:脊髓损伤 雪旺细胞 细胞移植 腰椎 大鼠脊髓损伤
周先虎
作品数:52被引量:225H指数:8
供职机构:天津医科大学总医院
研究主题:脊髓损伤 雪旺细胞 激活态雪旺细胞 细胞移植 许旺细胞
顾玉东
作品数:841被引量:6,523H指数:42
供职机构:复旦大学
研究主题:臂丛 周围神经 臂丛神经损伤 神经移位 周围神经损伤
何继银
作品数:12被引量:72H指数:5
供职机构:复旦大学附属华山医院手外科
研究主题:激活态雪旺细胞 雪旺细胞 信号转导通路 许旺细胞 几丁糖