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溶血性弧菌产耐热直接溶血毒素对黑色素瘤的抑制作用研究
2022年
为探讨耐热直接溶血毒素(Thermostabile direct hemolysin,TDH)在体内和体外对小鼠黑色素瘤细胞B16的抑制作用,本研究通过MTT法、克隆形成试验、凋亡试验、Caspase-8和Caspase-3的活性试验、线粒体膜电位的检测以及体内C57BL/6小鼠(Mus musculus)荷瘤实验,比较TDH作用于不同细胞的半抑制浓度(IC50),评价TDH对小鼠黑色素瘤细胞B16的体内外抑制作用。结果发现:人结肠上皮细胞NCM460、人正常肝细胞LO2、人肝癌细胞SMMC-7721和小鼠黑色素瘤细胞B16在TDH处理24 h之后,细胞的半抑制质量浓度IC50分别为151、118、54和48μg/mL,正常细胞的IC50高出癌细胞近2~3倍。当质量浓度低于20μg/mL时,TDH以剂量依赖性的方式抑制B16细胞的克隆形成,6 mg/kg TDH在移植瘤模型中显著抑制体内肿瘤的生长(P<0.001)。流式细胞术和荧光试剂盒检测表明:20μg/mL的TDH能诱导19.4%的B16细胞发生早期凋亡,并激活Caspase-8和Caspase-3,但不影响线粒体膜电位。TDH具有体内外的抗肿瘤活性,可能通过细胞表面的死亡受体介导的凋亡信号通路引起凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。
杨兰珠李诗怡郑雯静李静包哲隈杨靖亚
关键词:抗肿瘤死亡受体凋亡
一种PSR检测耐热直接溶血毒素及耐热相关溶血毒素的引物、试剂盒与方法
本发明公开了一种PSR检测耐热直接溶血毒素及耐热相关溶血毒素的引物、试剂盒与方法。本发明针对耐热直接溶血毒素阳性的副溶血弧菌的特异性靶序列tdh及trh保守区的特异区域各设计了一对检测引物,其核苷酸序列如SEQ ID N...
刘丽艳徐振波 徐瑞瑞 徐行勇 刘君彦陈玲苏健裕李冰李琳李晓玺张霞
重组猪链球菌溶血毒素SLY鉴定及SLYD4对小鼠的免疫保护研究
猪链球菌溶血毒素(Suilysin,SLY)是猪链球菌(Streptococcussuis,SS)重要的毒力因子,通过在细胞膜上形成孔道来裂解宿主细胞。靶向抑制SLY的毒力能够显著降低猪链球菌的致病性。SLY由四个结构域...
牟欣然
关键词:动物实验免疫保护毒力因子
溶血弧菌耐热直接溶血毒素的急性毒性研究被引量:7
2020年
为研究耐热直接溶血毒素(TDH)对实验小鼠的急性毒性,经腹腔注射实验小鼠不同浓度梯度的TDH(42.0、19.5、9.1、4.2和1.9 mg·kg^-1体重,对照组设为PBS),连续观察14 d,记录各组小鼠的死亡情况及生理反应。实验终止时进行大体解剖,摘取心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏观测脏器指数,断尾采血并计数血细胞。结果表明,TDH对昆明种小鼠的半数致死量LD50为11.0 mg·kg^-1体重,小鼠的死亡主要集中发生在注射TDH后的72 h内,并且伴随着腹泻现象。各组存活的实验小鼠在注射TDH后的第5天后,精神状态基本恢复,正常进食进水。各组小鼠脏器未见明显炎症反应,小鼠血液中红细胞与白细胞数量也未见统计学差异。TDH的毒性靶器官是心脏、肺、肾脏、脾脏、胃和肠。TDH对小鼠的半数致死量和毒性靶器官及病理学表现可为TDH的进一步实际应用及研究提供科学的依据和资料。
李诗怡杨靖亚马燕郑雯静邢德纯张清卿喻文娟
关键词:急性毒性副溶血弧菌
一种PSR检测耐热直接溶血毒素及耐热相关溶血毒素的引物、试剂盒与方法
本发明公开了一种PSR检测耐热直接溶血毒素及耐热相关溶血毒素的引物、试剂盒与方法。本发明针对耐热直接溶血毒素阳性的副溶血弧菌的特异性靶序列tdh及trh保守区的特异区域各设计了一对检测引物,其核苷酸序列如SEQ ID N...
刘丽艳徐振波 徐瑞瑞 徐行勇 刘君彦陈玲苏健裕李冰李琳李晓玺张霞
溶血弧菌耐热直接溶血毒素抑制人肺腺癌细胞活性的研究被引量:2
2019年
目的海洋细菌毒素抗肿瘤是近年来兴起的用于癌症治疗的新思路。本文旨在研究耐热直接溶血毒素(TDH)对人肺腺癌细胞SPC-A-1细胞的抑制作用。方法利用DEAE-纤维素、DEAE-Sephadex A-50、葡聚糖G-75层析的方法,从海洋细菌-副溶血弧菌ATCC33846的代谢物中分离纯化得到纯度较高的耐热直接溶血毒素(TDH)。通过MTT法、细胞划痕试验、凋亡试验、caspase-3活性试验比较TDH作用于不同细胞的半抑制剂浓度IC50,研究了TDH对人肺腺癌细胞SPC-A-1细胞的作用。结果人结肠上皮细胞NCM460、人肝成纤维细胞LO2、人肺腺癌细胞SPC-A-1在TDH处理24h之后,细胞的半抑制剂浓度IC50分别为151μg/mL、118μg/mL和6.7μg/mL,正常细胞的IC50高出肺腺癌细胞近20倍。在低于5μg/mL浓度下,TDH能剂量依赖性抑制SPC-A-1细胞的生长、增殖和迁移能力。流式细胞法和荧光试剂检测表明:5μg/mL的TDH能诱导33%的SPC-A-1细胞发生早期凋亡,并激活caspase-3。结论 TDH可能通过激活caspase-3途径诱导细胞凋亡,从而抑制SPC-A-1细胞的生长和增殖。
马燕杨靖亚李诗怡喻文娟
关键词:抗肿瘤
溶血弧菌耐热溶血毒素(TDH)抗肿瘤作用研究
近年来,由于手术、放疗、化疗等肿瘤治疗手段的局限性,寻找新的治疗途径迫在眉睫,而生物毒素抗肿瘤则为治疗癌症提供了新的方向,通过对生物毒素进行修饰,可以靶向性的针对一些癌症病例的治疗。本文以 TDH 为研究对象,围绕TDH...
马燕
关键词:提取纯化线粒体膜CASPASE-3抗肿瘤机制
芦荟苷对金黄色葡萄球菌生长抑制作用及对溶血毒素表达的影响被引量:6
2018年
目的研究芦荟苷体外对金黄色葡萄球菌生长抑制作用以及对溶血素表达的影响。方法采用肉汤倍比稀释法检测芦荟苷水溶物对金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度(MIC);琼脂打孔法观察芦荟苷对金黄色葡萄球菌的抑菌圈大小;试管法检测芦荟苷作用下金黄色葡萄球菌凝固酶的产生变化;检测芦荟苷作用下金黄色葡萄球菌溶血素活性变化;采用实时荧光定量PCR检测芦荟苷水溶物作用于金黄色葡萄球菌后对hla和agr A基因表达的影响。结果芦荟苷水溶物可抑制金黄色葡萄球菌生长并呈现浓度依赖性,作用于ATCC 25923和临床菌株SA1.5后的抑菌圈直径和MIC分别为21.5 mm、12.5 mg/m L和17mm、15 mg/m L;与对照组凝固酶效价32比较,1/2MIC组、MIC和2MIC组芦荟苷作用ATCC 25923后的凝固酶效价分别降为16、4和2;与对照组相比,1/2MIC组、MIC组及2MIC组芦荟苷水溶物降低ATCC 25923溶血活性,溶血率分别为(77.4±3.41)%、(42.2±2.4)%和(38.7±2.4)%;1/2MIC组、MIC组和2MIC组芦荟苷作用ATCC 25923后hla表达量分别为0.020 3(0.019 6,0.028 8)、0.011 6(0.010 6,0.013 1)和0.033 7(0.020 2,0.042 9),3组间差异有统计学意义(H=16.807,P<0.05);agr A表达量分别为0.074 6(0.066 2,0.098 2)、0.020 8(0.012 2,0.032 6)和0.021 3(0.010 2,0.029 6),3组间差异有统计学意义(H=16.320,P<0.05)。结论芦荟苷可抑制金黄色葡萄球菌生长,并对α-溶血素表达有抑制作用。
王晔狄瑜朱琳琦邵世和
关键词:金黄色葡萄球菌芦荟苷
嘉定地区副溶血性弧菌溶血毒素基因特征的研究
2016年
目的了解嘉定地区从患者肛拭和食品中分离的副溶血性弧菌菌株的溶血毒素基因特征。方法收集近年来嘉定地区从腹泻患者肛拭和食品中分离到的282株副溶血性弧菌菌株,应用PCR技术进行tdh基因、trh基因、tlh基因的检测。结果肛拭来源的226株副溶血性弧菌,其tdh基因携带率为96.90%,而分离自食品的56株菌株未见有tdh基因携带;肛拭和食品分离到的菌株trh基因携带率分别为2.21%、5.36%;肛拭和食品分离到的菌株tlh基因携带率分别为99.56%、98.21%。结论引起嘉定地区食物中毒及散发腹泻的副溶血性弧菌主要为tdh阳性、trh阴性菌株,而食品中主要是tdh阴性、trh阴性菌株。
陈伟鑫余玮
关键词:副溶血性弧菌溶血毒素基因
海洋微藻溶血毒素化学结构研究进展被引量:2
2016年
海洋微藻产生的溶血毒素(Hemolytic toxins)对海洋生物影响极大,是造成鱼类和贝类死亡的重要原因之一。国内外对于溶血毒素的研究尚处在起步阶段,海洋微藻溶血毒素的成分非常复杂,对于毒素化学结构的分析是制约溶血毒素研究的关键因素。本文总结了已经报道的溶血毒素的化学结构,共分为五类,即糖脂类(Glycolipids)、大环内酯类(Macrolides)、长链多羟基多烯类(Long-chain polyenes)、聚醚类(Polyethers)以及卟啉类(Porphyrins)化合物,为深入研究溶血毒素性质提供依据。
杨琳刘磊许道艳李冬梅刘仁沿梁玉波
关键词:溶血毒素化学结构海洋微藻赤潮

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杨维东
作品数:195被引量:941H指数:20
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研究主题:赤潮 启动子 微藻 塔玛亚历山大藻 三角褐指藻
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供职机构:暨南大学
研究主题:赤潮 塔玛亚历山大藻 三角褐指藻 启动子 球形棕囊藻
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供职机构:暨南大学
研究主题:麻痹性贝类毒素 赤潮 贝类 麻痹性贝毒 产毒
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供职机构:暨南大学
研究主题:麻痹性贝类毒素 溶血毒素 贝类 海洋卡盾藻 毒性
李宏业
作品数:96被引量:89H指数:6
供职机构:暨南大学
研究主题:微藻 启动子 三角褐指藻 基因 基因工程