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- 17β雌二醇对子宫腺肌病患者子宫内膜-肌层交界区平滑肌细胞内游离Ca^2＋{2}的调节作用及机制研究被引量：6
- 2015年
- 目的探讨17β雌二醇（17β-E2）对子宫腺肌病患者子宫内膜-肌层交界区（EMI）平滑肌细胞内游离Ca^2＋{2}（[Ca^2＋]i）的调节作用及可能机制。方法选择2011年9月至2012年12月在首都医科大学附属北京妇产医院妇科微创中心因子宫腺肌病行子宫全切除术的患者28例为腺肌病组，选择同期因子宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅲ行子宫全切除术者31例为对照组，对两组患者的EMI平滑肌细胞进行分离及原代培养。应用Ca^2＋荧光探针Fluo-4／AM负载平滑肌细胞，采用细胞外钙阻断实验、细胞内钙释放阻断实验、细胞膜钙通道阻断实验、细胞膜钙激活钾通道阻断实验阻断引起[Ca^2＋]i变化的各个环节，利用激光共聚焦显微镜观察17β-E2诱导后的两组患者EMI平滑肌细胞内[Ca^2＋]i的变化，其变化程度以ΔF[Ca^2＋]i表示。结果（1）在常规有Ca^2＋培养基中，17β-E2诱导后腺肌病组和对照组EMI平滑肌细胞内Ca^2＋荧光强度均明显高于其17β-E2诱导前，腺肌病组ΔF[Ca^2＋]i为384±26，对照组ΔF[Ca^2＋]i为235±20，两组比较，差异有统计学意义（P=0．001）；细胞外钙阻断实验显示，细胞外无Ca^2＋时，腺肌病组ΔF[Ca^2＋]i为207±17，对照组ΔF[Ca^2＋]i为221±19，两组比较，差异无统计学意义（P=0．731）。腺肌病组ΔF[Ca^2＋]i在细胞外有Ca^2＋时明显高于无Ca^2＋时，差异有统计学意义（P=0．000）；而对照组两者比较，差异无统计学意义（P=0．060）。（2）细胞内钙释放阻断实验显示，阻断肌质网钙库上三磷酸肌醇（IP3）敏感的钙释放通道、肌质网利阿诺定（Ryanodine）受体（RyR）钙释放通道、肌质网钙泵释放后，腺肌病组和对照组ΔF[Ca^2＋]i分别与其阻断前相比均明显降低（P〈0．05），且腺肌病组ΔF[Ca^2＋]i均明显高于对照组（P〈0．05）。（3）细胞膜钙通道阻断实验显示，阻断L-型钙通道后，腺肌�
- 汪沙段华张颖王丽平张恒辉李国力
- 关键词：子宫腺肌病雌二醇子宫内膜
- 绞股蓝总黄酮对缺氧心肌细胞损伤标记物及细胞内游离Ca^2＋{2}的影响被引量：8
- 2008年
- 探讨绞股蓝总黄酮(TFG)对缺氧心肌细胞损伤标记物及细胞内游离Ca2+浓度的影响.在离体乳鼠心肌细胞原代培养基础上制备心肌细胞缺氧模型,随机分为正常对照组、缺氧损伤组和绞股监总黄酮干预缺氧损伤组.分别测定各组心肌培养基中乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白I(cTn I)的含量,心肌细胞内游离Ca2+的浓度(荧光探针法).缺氧损伤组心肌培养基中LDH和cTnI的含量及心肌细胞内游离Ca2+浓度较正常对照组明显增加(P<0.05或0.01);经TFG干预后细胞培养基中LDH利cTnI的含量及心肌细胞内游离Ca2+浓度较缺氧损伤组明显降低(P<0.05或0.01).TFG对缺氧心肌细胞具有保护作用,其机理可能与减轻心肌细胞内钙超负荷有关.
- 李乐高小利丁宝兴
- 关键词：缺氧心肌细胞CTN游离CA^2+
- 利用激光扫描共聚焦显微镜实时监测体外诱导分化的人骨髓间充质干细胞内游离Ca^2＋{2}动态变化被引量：2
- 2008年
- 目的利用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）实时监测由人骨髓间充质干细胞（hMSC）诱导分化的心肌样细胞内游离Ca^2＋{2}的动态变化。方法体外分离培养hMSC，5-氮胞苷诱导向心肌样细胞分化。分别以体外分离培养的原代搏动的出生2dSD大鼠乳鼠心肌细胞（CM）和同代次的hMSC为阳性对照和阴性对照。Fluo-3／AM荧光探针分别标记hMSC、由hMSC诱导的心肌样细胞及CM，利用LSCM实时监测单细胞内Ca^2＋动态变化的优势，观察加入心脏正性肌力药物后的细胞反应及细胞内Ca^2＋水平的动态变化。结果静息状态下（给药前），搏动的CM荧光强度有变化，而hMSC及心肌样细胞Ca^2＋的荧光强度保持在稳定的波动水平内，两者差异无统计学意义。给药后，hMSC的Ca^2＋离子流没有改变，与静息状态下趋于一致；而心肌样细胞则表现出一个明显的Ca^2＋离子流，且下降后细胞内Ca^2＋水平明显高于加药前静息钙水平，其Ca^2＋离子流的表现趋势与搏动的CM基本一致。比较给药后hMSC与心肌样细胞的Ca^2＋荧光强度落差值，差异具有统计学意义（64．04±22．68比180．75±34．04，P〈0．01）。结论hMSC经5-氮胞苷诱导后，在电学特性方面具有向CM分化的趋势，心肌样细胞与CM具有某些相同的电生理特性。
- 邓方阁郭连峰张秀英李玉林
- 关键词：激光扫描共聚焦显微镜间质干细胞心肌样细胞游离CA^2+浓度
- 苯乙酸对胶质瘤C6细胞凋亡和细胞内游离Ca^2＋{2}的影响被引量：3
- 2007年
- 目的观察苯乙酸（PA）对胶质瘤C6细胞凋亡和细胞内游离Ca^2＋{2}的影响，探讨其作用机制。方法体外培养胶质瘤C6细胞，PA诱导分化后，用透射电镜和AnnexinV／PI标记流式细胞仪检测细胞凋亡，Fluo-3／AM探针激光共聚焦显微镜检测细胞内游离Ca^2＋{2}的变化。结果电镜观察到凋亡细胞，PA对C6细胞早期凋亡率无影响，主要增加晚期凋亡率，随PA{2}的增加而增加。PA能明显增加细胞内游离Ca^2＋{2}，并且随药物{2}的增加而增加。结论PA能诱导C6细胞凋亡，呈剂量依赖性，PA诱导C6细胞凋亡的机制可能与增加细胞内游离Ca^2＋{2}有关。
- 杨朝华蔡博文游潮
- 关键词：苯乙酸神经胶质瘤细胞凋亡钙离子
- 不同频率电磁场对胆囊癌细胞内游离Ca^2＋{2}的影响被引量：5
- 2002年
- 目的探讨不同频率的低功率电磁场对胆囊癌细胞内游离钙离子水平的影响及其意义.方法采用流式细胞仪检测不同频率电磁场作用后,胆囊癌细胞内游离钙离子(Ca2+)水平的变化.结果经不同频率(0.1 MHz～40 MHz)电磁场作用后,各实验组均可见细胞内游离Ca2+浓度上升,0.1 MHz和20 MHz作用后游离Ca2+浓度上升最为显著,有显著统计学意义,1 MHz和40 MHz作用后游离Ca2+浓度上升不明显,无统计学意义.结论 0.1 MHz～40 MHz范围低功率电磁场作用后引起胆囊癌细胞内游离Ca2+浓度升高,不同频率电磁场对游离钙离子升高的影响有明显差异.细胞膜上的不同分子有不同的谐振频率,推测0.1 MHz、20 MHz两频率可能与Ca2+离子回旋谐振频率有关,或与之产生某种偶联,对Ca2+离子产生明显作用,进而在细胞和分子水平产生生物效应.
- 陈平杨耀琴陶惠红杨虎川李晶华张珏
- 关键词：电磁场流式细胞仪细胞内游离钙离子浓度胆囊肿瘤细胞
- 胸部撞击伤时游离Ca^2+{2}与中性粒细胞凋亡及肺损伤的关系被引量：2
- 2002年
- 目的 :动态观察兔胸部撞击伤时中性粒细胞 (PMN)凋亡的发生以及与肺损伤之间的关系。方法 :制备兔胸部撞击伤模型 ,分离纯化肺灌洗液中的 PMN,应用流式细胞术测定 PMN凋亡、坏死、存活细胞比例及呼吸爆发功能的变化 ,并且观察与乳酸脱氢酶 (L DH)和胞浆游离 Ca2 +变化之间的关系。结果 :肺灌洗液中PMN的凋亡延迟持续至 12小时 ,在伤后各时间点活细胞增多 ;而肺灌洗液 PMN呼吸爆发从伤后 2小时即显著增强 ,8小时达到峰值 ;同时肺灌洗液 L DH的升高在伤后 4～ 2 4小时显著高于正常对照组 ;伤后 PMN胞浆游离 Ca2 +有短暂升高。结论 :胸部撞击伤时 ,PMN在肺组织中大量扣押 ,且正常的凋亡途径发生障碍 ,造成PMN持续处于激活状态及毒性内容物的持续释放 ,与肺组织损伤有密切关系 ,并且 PMN凋亡延迟可能与胞浆游离 Ca2
- 刘韧肖南田昆仑刁有芳
- 关键词：胸部撞击伤继发性肺损伤
- 单个牛视网膜神经细胞内游离Ca^2＋动态变化的实时观测方法
- 2013年
- 为观测神经营养因子对胞内Ca2+浓度的影响,将牛视网膜神经细胞内的Ca2+用Fluo-3标记,用搭建的活细胞实时成像荧光显微系统对其成像,并观测在脑源性神经营养因子BDNF等四种神经营养因子的作用下细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)随时间的变化的规律。由于荧光分子有自发衰减效应,故对得到的细胞内荧光强度采用"去衰减效应修正"的处理方法,再现了较真实地代表[Ca2+]i的荧光强度。修正后的数据显示,加入四种神经因子后,[Ca2+]i皆有不同程度的升高,与相关文献所描述的类似实验具有相似结果,说明此种对活细胞内荧光标记物的实时动态成像的实验方法可行,去衰减效应修正的数据处理方法可靠。
- 杨寻刘晓晨马万云
- 关键词：神经细胞游离钙离子浓度神经营养因子
- 青蒿琥酯对人前列腺癌PC-3细胞内游离Ca^(2+)的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:研究青蒿琥酯(ART)对人前列腺癌PC-3细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响。方法:ART处理PC-3细胞,用Ca2+荧光探针Fluo-3/AM标记PC-3细胞,激光共聚焦扫描显微镜检测PC-3细胞内[Ca2+]i变化。结果:ART诱导PC-3细胞内[Ca2+]i在0～0.5h显著升高;在0.5～1h维持高水平;在4～24h降到初始水平。结论:ART能够诱导PC-3细胞内[Ca2+]i显著持续升高,[Ca2+]i升高可能在ART诱导PC-3细胞凋亡中起重要作用。
- 张长城张小鹏
- 关键词：青蒿琥酯前列腺癌游离CA^2+浓度
- 大鼠肺动脉平滑肌细胞培养及对不同类型激动剂刺激产生的反应
- 2008年
- 目的分离和培养SD大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCc），并检测其功能状态。方法显微分离肺内小动脉，并在含胶原酶（1750 U·mL^-1）和木瓜蛋白酶（9．5U·mL^-1）的低钙HBSS溶液中酶解和培养PASMCs，采用动态细胞荧光成像技术检测PASMCs胞浆{2}Ca^2＋浓度（[Ca^2＋]i）的变化。结果在18～24h内可获得PASMCs，并可观察到环匹阿尼酸和5-HT可引起PASMCs[Ca^2＋]i的升高效应。结论大鼠PASMCs一步酶消化法，方法简便实用。所分离的PASMCs细胞形态和功能正常，适用于动态细胞荧光成像技术检测实验及PASMCs信号转导功能的研究。
- 郑向红刘晓如林默君
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞细胞培养
- Ⅰ型胶原促进骨髓基质干细胞粘附的细胞机制被引量：15
- 2006年
- 目的观察骨髓基质干细胞(BMSCs)经Ⅰ型胶原作用后细胞粘附能力增加、细胞骨架肌动蛋白的表达和细胞内钙水平变化情况。方法以密度梯度离心法获得成年兔BMSCs,在含10%小牛血清的RPMI 1640培养基条件下,以一定初始浓度分别接种盖玻片(实验组包被Ⅰ型胶原,对照组不做处理)。培养一定时间后,检测细胞的粘附情况,分别以免疫荧光技术并参照El-Amin方法观察细胞骨架肌动蛋白结构分布、以Fluo-3作为钙指示剂行细胞内游离Ca{2}(2+)测定。结果观察细胞接种12 h内细胞骨架肌动蛋白结构分布显示：细胞接种6 h时,实验组Ⅰ型细胞占56%,Ⅱ型细胞占44%；而对照组Ⅰ型细胞则占79%,Ⅱ型细胞为21%。接种12 h时,实验组Ⅰ型细胞占11%,大部分为Ⅱ型细胞；而对照组Ⅰ型细胞只占45%。提示材料经Ⅰ型胶原修饰后,细胞多数表现为圆形,铺展良好,细胞骨架肌动蛋白的构建活跃。细胞内游离Ca{2}(2+)测定显示：在Ⅰ型胶原存在的条件下生长的细胞内荧光明显增强,说明细胞内游离Ca{2}(2+)浓度较对照组高。结论兔BMSCs经Ⅰ型胶原作用后,细胞粘附能力增强不仅与细胞骨架肌动蛋白的构建活跃有关,还与细胞内游离Ca{2}(2+)浓度明显提升有关。
- 刘刚胡蕴玉赵建宁吴苏稼周光新
- 关键词：骨髓基质干细胞细胞骨架游离CA^2+
