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兔离断后肢深低温冻存中二甲基亚砜导入效果的定量分析: 2025年; 背景:保护剂导入效果在器官深低温冻存中至关重要,定量分析保护剂二甲基亚砜导入效果可为器官深低温冻存成功提供理论依据。目的:研究兔离断后肢深低温冻存中二甲基亚砜导入效果。方法:采用随机数字表法将50只新西兰大白兔随机分为A1组(n=8)、A2组(n=8)、B1组(n=8)、B2组(n=8)、C1组(n=6)、C2组(n=6)、C3组(n=6),均建立离断后肢深低温保护剂灌注模型,A1组、A2组分别使用10%,20%二甲基亚砜溶液经股动脉持续灌注50min,利用微透析-冰点渗透压仪检测肌肉组织中二甲基亚砜浓度;B1组、B2组分别使用10%,20%二甲基亚砜溶液经股动脉持续灌注30,20 min,利用核磁共振波谱检测血管周围、肌肉与皮下组织中二甲基亚砜浓度;C1组、C2组、C3组分别浸泡于50%,35%,20%二甲基亚砜溶液中30 min,利用核磁共振波谱检测血管周围、肌肉与皮下组织中二甲基亚砜浓度。结果与结论:①A1组、A2组肌肉组织中的二甲基亚砜浓度随着灌注时间的延长而升高,A1组在灌注30 min后浓度稳定在5%左右,A2组在灌注20 min后浓度稳定在12%左右;A2组各灌注时间点肌肉组织中二甲基亚砜浓度均高于A1组(P<0.05);②B2组肌肉组织、血管周围与皮下组织中二甲基亚砜浓度分别为12%,20%,8.6%,B1组血管周围、肌肉组织与皮下组织中二甲基亚砜浓度分别为10.9%,6.9%,1%,两组间相同组织中二甲基亚砜浓度比较差异有显著性意义(P<0.05);③C1组、C2组、C3组肌肉组织和血管周围未检测到二甲基亚砜存在,C1组、C2组、C3组皮下组织中二甲基亚砜浓度分别为6.5%,2.3%,1.85%,组间比较差异有显著性意义(P<0.05);④结果表明,对于兔离断后肢模型,深低温保护剂二甲基亚砜通过传统的浸泡法导入是无效的,而通过动脉灌注法导入20%二甲基亚砜溶液后可在大部分组织达到或接近有效的玻璃化浓度。; 李唐波宋迪煜郝国兵张树明朱泽兴; 关键词：断肢再植深低温冻存核磁共振波谱

输注深低温冻存自体造血干细胞不良事件发生现状及影响因素分析: 2024年; 目的探讨输注深低温冻存自体造血干细胞不良事件发生现状和相关影响因素。方法选取2019年9月至2022年9月本院血液移植中心行自体造血干细胞移植的患者224例,采用一般资料调查表及输注自体造血干细胞不良事件调查表收集资料,汇总输注深低温冻存自体干细胞不良事件发生现状并分析影响因素。结果输注深低温冻存自体造血干细胞不良事件的总发生率为72.3%。胃肠道疾病发生率最高,占33.3%,其次是呼吸道、胸腔和纵隔疾病,占30.9%。严重程度多为1级,占68%。引起不良事件发生的危险因素为年龄、输注量、既往输血史和合并其他疾病。结论输注深低温冻存自体造血干细胞的不良事件发生率高,但大部分程度轻微。临床医护人员在围输注期,对于高龄、输注量较大、有输血史和合并其他疾病的患者应注意输注速率、加强监护,提供预见性护理措施,以保障患者安全。; 田园庄彦卢文敏王海治; 关键词：影响因素

附子多糖对深低温冻存血管保存效果的影响研究: 2023年; 目的观察不同浓度附子多糖(fuzi-polysaccharides,FPS)对深低温冻存大鼠血管组织的保护作用,并探讨其对线粒体凋亡通路相关因子的调控机制。方法将36只SPF级雄性SD大鼠随机分成6组,对照组、冻存模型组、FPS 0.1 mg/mL组、FPS 1 mg/mL组、FPS 10 mg/mL组和FPS 20 mg/mL组,每组6只。取大鼠腹主动脉后,冻存模型组使用灭菌注射用水,FPS浓度组分别用含不同浓度FPS作冷冻保护剂(0.1 mg/mL、1 mg/mL、10 mg/mL、20 mg/mL),均经程序降温后放入-196℃液氮内保存1周。采用苏木精—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法进行病理切片观察血管组织形态变化;蛋白免疫印迹法(western blot,WB)检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、细胞色素c(cytochrome c,Cyt-c)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(cysteine-dependent aspartate-specifc proteases-9,Caspase-9)蛋白表达。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测Bcl-2、Bax mRNA表达。对照组取材后直接进行上述指标的检测。结果(1)HE染色结果显示:与对照组相比,冻存模型组血管组织结构损伤严重;从FPS浓度1 mg/mL起,FPS组血管组织病理变化较冻存模型组改善,内膜连续性开始增强,中膜层纤维组织排列相对紧密,外膜可见;其中,FPS 10 mg/mL组、FPS 20 mg/mL组血管组织结构保存相对完整。(2)WB结果显示:与对照组相比,冻存模型组Bax、Cyt-c、Caspase-9蛋白表达水平均显著增加(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与冻存模型组相比,FPS可以显著下调Bax、Cyt-c、Caspase-9蛋白表达(P<0.05),上调Bcl-2蛋白表达(P<0.05),且FPS 10 mg/mL组、FPS 20 mg/mL组效果更显著,但两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。(3)qRT-PCR结果显示:与对照组比较,冻存模型组Bcl-2 mRNA表达水平明显降低(P<0.05),Bax mRNA表达水平明显增加(P<0.05);与冻存模型组比较,FPS 10 mg/mL组可以显著上调Bcl-2 mRNA表达水平、下�; 钟郁佳史业弘王成; 关键词：深低温冻存附子多糖冷冻保护剂血管凋亡

附子多糖对深低温冻存大鼠动脉内皮细胞的影响: 目的：　　探讨附子多糖(Fuzi-polysaccharide，FPS)作为冷冻保护剂对深低温冻存过程中大鼠动脉血管内皮细胞结构和功能的影响。　　方法：　　24只SD大鼠，取腹主动脉。每根主动脉修剪成3段，共72段，随机...; 任丹丹; 关键词：附子多糖深低温冻存细胞保护作用

附子多糖对深低温冻存血管力学结构保护作用的研究: 目的：通过将常见的冷冻保护剂与附子多糖（Fuzipolysac-charideFPS）进行对比，初步探索附子多糖在深低温冻存中对血管力学结构的保护作用。　　方法：本研究以大白兔的腹主动脉为研究对象，随机选择健康成年的大白...; 江松松; 关键词：深低温冻存腹主动脉附子多糖弹性模量

附子多糖对深低温冻存血管平滑肌线粒体膜通透性转换孔的研究: 目的：通过对血管平滑肌线粒体膜通透性转换孔的干预，探讨附子多糖在深低温冻存过程中对血管平滑肌细胞凋亡的调控机制。　　方法：36只雄性SD大鼠随机分为6组，即对照组和冻存模型组（灭菌注射用水），二甲基亚砜组，附子多糖组，附...; 殷俊; 关键词：附子多糖深低温冻存血管平滑肌细胞凋亡

深低温冻存肾肿瘤患者全血细胞RNA提取质量的影响因素被引量：1: 2023年; 为了研究深低温冻存的全血细胞RNA提取质量的影响因素,本文选择海军军医大学附属长海医院生物样本库收集、冻存的186份肾肿瘤患者的全血细胞标本,采用商用试剂盒提取RNA并测定其纯度。根据不同冻存时间和冻存位置比较各组全血细胞RNA提取质量。结果表明:本组全血细胞RNA的冻存时间中位数为101(62,127.25)d,260 nm和280 nm波长处的吸光度比值(A260/A280)中位数为1.87(1.76,1.92),A260/A230比值中位数为1.72(1.23,1.96),样本RNA提取质量合格率61.3%;冻存时间短的样本RNA提取质量合格率高于冻存时间长的样本,且随着冻存时间变长,A260/A280比值下降。冻存于深低温冰箱上层的样本RNA提取质量合格率高于下层的样本。冻存时间和冻存位置均会对深低温冻存的全血细胞RNA提取质量有影响,应在样本冻存时予以注意。; 庄明珠井杰李友婷张悦朱亚庆颜宏利; 关键词：全血细胞冻存影响因素

线粒体-ROS-KV1.5信号通路在附子多糖联合DMSO深低温冻存血管保护作用中的研究: 目的：通过建立深低温冻存大鼠腹主动脉模型，初步探索线粒体-ROS-KV1.5信号通路在血管深低温冻存损伤中的潜在机制及附子多糖（Fuzi-polysaccharides,FPS）联合二甲基亚砜（DimethylSulfo...; 余玉勇; 关键词：深低温冻存附子多糖血管保护

无动物源成分纯细胞因子从深低温冻存脐血中高效扩增NK细胞: 2023年; 背景:从深低温冻存脐血中获得大量高纯度无滋养层细胞、无动物源成分的NK细胞,以便更好地开展NK细胞杀伤肿瘤的实验研究,此次研究通过使用NK扩增培养试剂盒和血清替代物,以获得安全、高效的体外扩增培养NK细胞的方法。目的:建立一种从冷冻脐血中采用纯细胞因子扩增NK细胞的技术体系并证明其体外杀瘤能力。方法:解冻液氮存储的冻存脐血,优化复苏体系,采用Ficoll密度梯度离心的方法收集脐血单个核细胞,接种于预先铺板的T175培养瓶中,采用细胞因子试剂盒+血清替代物法培养21 d后收集细胞并计数,应用流式细胞术检测细胞中CD3^(-)CD56^(+)的比例,并将所得数据与K562滋养层细胞+胎牛血清的培养方法进行对比分析。同时以髓系白血病细胞K562为靶细胞,采用CCK-8试剂盒检测不同效靶比NK细胞杀伤K562细胞的作用。最后进行了12 h内的模拟储存运输实验,采用流式检测CD3-CD56^(+)的比例变化,并使用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率。结果与结论:(1)采用K562滋养层细胞+胎牛血清的培养方法扩增培养14 d,细胞扩增(51.47±4.28)倍;采用细胞因子试剂盒+血清替代物法扩增培养21 d,细胞数量5×10^(9)以上,细胞扩增(328.32±116.36)倍,细胞扩增倍数明显升高,2种方法获得的CD3^(-)CD56^(+)纯度比例均在80%以上,未见明显差异;(2)纯细胞因子方法培养后的NK细胞对K562细胞的杀伤效果(效靶比=10∶1)达80%以上;(3)在12 h的模拟储运实验中,CD3^(-)CD56^(+)的比例变化不明显,直至第12小时,NK细胞凋亡率<7%;(4)结果表明:优化复苏体系和纯细胞因子扩增方法可以高效培养出高纯度的NK细胞,同时具有有效杀伤K562肿瘤细胞的能力,且经过12 h储运后仍然具有良好的细胞纯度和较低的凋亡率。; 刁小娟石超群李栋王帅肖春刘国军曲廷瑜杨卫娟贾晓鹏; 关键词：NK细胞扩增细胞毒性凋亡率

附子多糖对深低温冻存血管线粒体凋亡通路调控机制的研究: 目的:通过建立深低温冻存大鼠腹主动脉模型,探讨深低温冻存过程中附子多糖(Fuzi-polysaccharide,FPS)对血管组织线粒体凋亡通路相关基因的调控作用。方法:将36只SD大鼠的腹主动脉随机分成6组,每组6只,...; 钟郁佳; 关键词：附子多糖深低温冻存血管

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