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细胞因子诱导及贴壁法提取淋巴内皮祖细胞
2022年
目的:使用细胞因子诱导及贴壁法从C57BL/6小鼠骨髓细胞中分离淋巴内皮祖细胞(LEPCs),并对其进行鉴定。方法:通过贴壁技术获取小鼠骨髓24小时后贴壁细胞,待其增殖融合至80%~90%后,使用Tryple Express酶对贴壁细胞消化1分钟,去除消化掉的细胞,剩余细胞继续培养,待其再次融合至80%~90%时,进行1:2传代,将获得的第三代细胞进行流式细胞术检测其表面特异性标记物,并对其进行淋巴管成管分化实验,鉴定细胞。结果:我们所获取的LEPCs,在体外诱导后,可形成典型的微管样结构,并且经过多次传代后可形成“鹅卵石”样的典型细胞形态;其表面特异性标记物为:CD34、CD113双阳性率为:87.17% ±1.77%;CD113、VEGFR-3双阳性率为:85.17% ±1.65%;CD34、VEGFR-3双阳性率为:83.77% ±0.42%,符合相关文献关于LEPCs的报道。结论:利用细胞因子诱导及贴壁法可获取较高纯度的LEPCs。
贺强黄桂林侯吉学
淋巴内皮祖细胞对小鼠后肢淋巴水肿治疗的影响
2022年
目的:研究小鼠淋巴内皮祖细胞(Lymphoid Endothelial Progenitor Cells,LEPCs)对于淋巴水肿的治疗影响。方法:分离并培养小鼠骨髓LEPC细胞,培养至3~4代,使用流式细胞术以及成管实验对LEPCs进行鉴定。通过手术方法建立小鼠后肢淋巴水肿模型,并测试模型的稳定性。将LEPCs在淋巴水肿部位进行注射,测量小鼠腿围并对淋巴管进行计数,测量LEPCs组和对照组差异。结果:分离的细胞呈纤维样,通过流式细胞术鉴定其为LEPCs,在VEGF-C诱导下可以形成管样结构;通过手术建立淋巴水肿模型,手术肢较健康肢明显增粗,且一个月内稳定存在;将LEPCs在淋巴水肿部位进行注射,发现LEPCs干预组较对照组腿围明显变细且淋巴管计数增高,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:LEPCs可以缓解淋巴水肿症状。
何翔贺强吴倩侯吉学
关键词:淋巴水肿
骨髓间充质干细胞淋巴内皮祖细胞增殖作用影响的研究
目的:探讨如何从C57BL/6小鼠骨髓细胞中分离淋巴内皮祖细胞(LEPCs),并研究对其鉴定方法,同时研究骨髓间充质干细胞(MSCs)对淋巴内皮祖细胞(LEPCs)增殖作用的影响。  方法:使用贴壁技术提取小鼠骨髓MSC...
贺强
关键词:间充质干细胞细胞增殖
淋巴内皮祖细胞对小鼠后肢淋巴水肿的影响
何翔
造血干细胞淋巴系祖细胞增殖分化过程中HOXB4基因的表达
2010年
背景:HOXB4基因不仅能促进造血干细胞的扩增及其功能的活化与表达,而且体内试验表明它不会诱发白血病。因此更好地研究HOXB4在造血细胞增殖分化中的变化及作用对进一步研究造血干细胞的扩增可以提供更多的理论基础。目的:观察人类脐血造血干细胞淋巴系祖细胞增殖分化过程中HOXB4基因表达的情况及全反式维甲酸对HOXB4基因表达的影响。方法:将培养的淋巴造血祖细胞按干预方式不同分为2组,全反式维甲酸组:在培养体中加入全反式维甲酸,终浓度6×10-8mol/L。正常组:不加全反式维甲酸,代之以等量的1640培养液。观察人类脐血造血干细胞经植物血凝素诱导后,在培养第3,7,12天的淋巴细胞集落形成单位生成情况。采用实时荧光定量PCR技术检测脐血造血干细胞淋巴系祖细胞增殖分化过程中HOXB4基因的表达水平。结果与结论:人脐血造血干细胞淋巴系祖细胞增殖分化过程中,HOXB4基因呈规律的表达。随培养时间推移,正常组和全反式维甲酸组HOXB4基因的表达均逐渐降低。与正常组比较,全反式维甲酸可上调HOXB4基因的表达。
邹艳翟雪松陈红英
关键词:造血干细胞淋巴系祖细胞
造血干细胞淋巴系祖细胞增殖分化过程中HOXC4基因表达的研究被引量:1
2010年
目的探讨人类脐血造血干细胞(HSC)向淋巴系祖细胞增殖分化过程中HOXC4基因表达的情况及全反式维甲酸(ATRA)对HOXC4基因表达的影响。方法 (1)采用造血干/祖细胞体外培养技术,以ATRA持续干扰人类造血干细胞,观察人类脐血HSC经植物血凝素(PHA-M)诱导后,在培养过程第3、7、12天的淋巴细胞集落形成单位(CFU-TL)生成情况。(2)采用实时荧光定量PCR技术检测HSC向淋巴系祖细胞增殖分化过程中HOXC4基因的表达水平。(3)用RNA表达相对量(2-△△Ct)表示HOXC4基因相对表达量,采用x±s表示HOXC4基因的变化情况。结果 (1)人脐血HSC向淋巴系祖细胞增殖分化过程中,HOXC4基因呈规律的表达。(2)随培养时间推移,HOXC4基因在增殖分化的第7天表达最强烈,第12天表达明显降低。(3)与正常组比较,ATRA可上调HOXC4基因的表达。结论 HOXC4基因在人脐血HSC向淋巴系祖细胞增殖分化过程中呈现规律表达,提示HOXC4基因与人类造血干细胞淋巴系祖细胞增殖分化过程密切相关,是其调控基因之一。ATRA能显著上调HOXC4基因的表达。
邹艳刘文君翟雪松陈艾
关键词:造血干细胞淋巴系祖细胞全反式维甲酸
造血干细胞淋巴系祖细胞增殖分化过程中HOXC6基因表达的研究
2010年
目的探讨人脐血造血干细胞(HSC)向淋巴系祖细胞增殖分化过程中HOXC6基因表达的情况及全反式维甲酸(ATRA)对HOXC6基因表达的影响。方法采用造血干/祖细胞体外培养技术,以ATRA持续诱导人脐血造血干细胞,观察人脐血HSC经植物血凝素(PHA-M)诱导后,在培养过程第3、7和12天的淋巴系祖细胞集落生成情况;采用实时荧光定量PCR技术检测人脐血造血干细胞淋巴系祖细胞增殖分化过程中HOXC6基因的表达水平。结果人脐血造血干细胞淋巴系祖细胞增殖分化过程中,HOXC6基因表达呈现时间规律性。结论HOXC6基因在增殖分化的第7天表达最强烈,第12天表达明显降低,提示HOXC6基因与人脐血造血干细胞淋巴系祖细胞增殖分化过程密切相关,可能是其调控基因之一。ATRA能显著上调HOXC6基因的表达。
邹艳刘文君陈红英刘春艳
关键词:造血干细胞淋巴系祖细胞全反式维甲酸
造血干细胞淋巴系祖细胞增殖分化过程中同源盒基因表达的研究
目的:本课题主要探讨人类脐血造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell,HSC)向淋巴系祖细胞(Colony Forming Unit-T Lymphocyte,CFU-TL)增殖分化过程中HOXC4、H...
邹艳
关键词:造血干细胞淋巴系祖细胞增殖分化
文献传递
人类巨细胞病毒感染对淋巴系祖细胞增殖过程中Hoxc4及Hoxc6基因表达的影响被引量:8
2009年
本研究探讨人类脐血造血干细胞(HSC)向淋巴系祖细胞(CFU-TL)分化过程中hoxc4、hoxc6基因表达的情况,并且用人类巨细胞病毒(HCMV)和/或全反式维甲酸(ATRA)进行干扰,在基因水平探讨HCMV感染导致脐血CFU-TL损伤的机制。采用体外定向培养CFU-TL,经MTT法检测后,应用荧光定量RT-PCR技术检测经人HCMV和/或ATRA处理的人脐血CFU-TL中hoxc4、hoxc6基因的mRNA表达水平。HCMV-AD169滴度为106蚀斑形成单位(PFU)/ml,按0.1ml105PFU/ml接种培养体。结果表明:正常对照组、病毒处理组、维甲酸处理组hoxc4、hoxc6基因均在增殖分化的第3天少量表达,第7天表达最强烈(p<0.05),第12天表达明显下降。各组中hoxc4基因表达量高于hoxc6组(p<0.05)。与正常对照组比较,维甲酸组(6×10-8mol/L)的hoxc4、hoxc6基因表达上调(p<0.05),而病毒处理组hoxc4、hoxc6基因表达下调(p<0.05)。结论:hoxc4与hoxc6基因在脐血CFU-TL中各组呈现规律的表达,提示hoxc4、hoxc6均与淋巴造血有密切的相关性。HCMV能使hoxc4、hoxc6基因表达下调,提示HCMV致造血细胞损害可能与hoxc4、hoxc6基因表达异常有关。ATRA能显著上调hoxc4、hoxc6基因的表达。
冯静乔刘文君陈红英郭渠莲陈艾陈书琴
关键词:巨细胞病毒淋巴系祖细胞全反式维甲酸HOX基因
经HCMV感染的人脐血造血干细胞淋巴系祖细胞增殖过程中Hoxb4、Hoxb6基因的表达
目的:探讨经人类巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)感染的人脐血造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell,HSC)向淋巴造血祖细胞(或称淋巴细胞集落生成单位,Colony...
施翰
关键词:淋巴系祖细胞
文献传递

相关作者

刘文君
作品数:158被引量:443H指数:12
供职机构:泸州医学院附属医院
研究主题:脐血 儿童 人巨细胞病毒感染 造血干细胞 全反式维甲酸
邹艳
作品数:40被引量:174H指数:8
供职机构:泸州医学院附属医院
研究主题:肾损伤 新生鼠 窒息后 窒息 治疗小儿
陈红英
作品数:64被引量:203H指数:8
供职机构:泸州医学院附属医院
研究主题:窒息 肾损伤 窒息新生儿 新生儿 新生鼠
翟雪松
作品数:97被引量:254H指数:9
供职机构:泸州医学院附属医院
研究主题:肾损伤 高氧诱导 新生儿 窒息 窒息后
陈艾
作品数:30被引量:60H指数:5
供职机构:泸州医学院附属医院
研究主题:全反式维甲酸 HOXB6 白血病 红系祖细胞 脐血