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一种过表达APPswe695的小鼠海马神经元细胞株及其构建方法和应用
本发明属于稳转细胞株技术领域,具体涉及一种过表达APPswe695的小鼠海马神经元细胞株及其构建方法和应用,所述的小鼠海马神经元细胞株HT22‑APPswe695保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC No:...
张瑞周宏桢龚桠楠彭楠李梅艳周国黎郭妍徐海明孙健
n-3多不饱和磷脂酰丝氨酸对大鼠海马神经元细胞的抗凋亡作用研究
2025年
目的研究n-3多不饱和磷脂酰丝氨酸对大鼠海马神经元细胞(rat hippocampal neurons cells,RHNC)抗凋亡能力的影响。方法以RHNC为对象,以乙酸佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)为诱导剂,建立凋亡模型。以二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)/二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)型磷脂酰丝氨酸(DHA/EPA-phosphatidylserine,DHA/EPA-PS)为保护剂,用吖啶橙染色后在激光共聚焦显微镜下观察细胞不同凋亡时期的形态。通过磷脂酰丝氨酸外翻实验(Annexin V-FITC/PI双染实验),在细胞水平研究以DHA/EPA-PS为代表的n-3多不饱和磷脂酰丝氨酸对RHNC的抗凋亡能力。结果在PMA质量浓度为10.0 mg/L、作用时间24 h条件下,建立RHNC凋亡模型。15.0 mg/L DHA/EPA-PS对RHNC的预保护效果最好,此时早期、中期凋亡细胞较少且无晚期凋亡细胞,凋亡率为11.46%±4.11%,细胞形态和核膜完整,突起不受PMA的影响。结论以DHA/EPA-PS为代表的n-3多不饱和磷脂酰丝氨酸对RHNC具有一定的抗凋亡作用。本研究可为磷脂酰丝氨酸的生物活性研究提供较好的数据支撑。
付万冬杨艳周宇芳廖妙飞
关键词:海马神经元细胞抗凋亡
lnc-Eif4a2/miR-142a-5p/Vmp1通路抵抗缺氧诱导小鼠海马神经元细胞损伤的机制研究
2025年
目的研究长链非编码RNA真核翻译起始因子4A2(lnc-Eif4a2)、微小RNA 142a-5p(miR-142a-5p)以及液泡膜蛋白1(Vmp1)在缺氧诱导小鼠海马神经元细胞损伤中的作用及其调控关系。方法建立缺氧诱导小鼠海马神经元细胞损伤模型,采用实时荧光定量PCR检测lnc-Eif4a2、miR-142a-5p以及Vmp1 mRNA表达。实验设为nc组(转染对照载体)、lnc-Eif4a2组(转染lnc-Eif4a2载体)、miR-142a-5p组(转染miR-142a-5p模拟物)以及Vmp1组(转染Vmp1载体)。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,CCK-8法检测各组细胞存活率,ELISA法检测各组促炎因子(TNF-α、IL-1β及IL-6)和抗炎因子IL-10表达,试剂盒检测各组丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)水平以及超氧化物歧化酶(SOD)活性。采用双荧光素酶报告基因试验和蛋白质印迹验证lnc-Eif4a2/miR-142a-5p/Vmp1通路。结果与正常细胞相比,模型细胞中lnc-Eif4a2和Vmp1 mRNA表达降低,而miR-142a-5p表达升高。与nc组相比,lnc-Eif4a2和Vmp1组细胞凋亡率减少,细胞存活率增加,TNF-α、IL-1β、IL-6浓度降低,IL-10浓度升高,MDA和LDH水平降低,SOD活性升高。与nc组相比,miR-142a-5p组细胞凋亡率增加,细胞存活率减少,TNF-α、IL-1β、IL-6浓度升高,IL-10浓度降低,MDA和LDH水平升高,SOD活性降低。Vmp1是miR-142a-5p靶基因,lnc-Eif4a2海绵吸附miR-142a-5p上调Vmp1表达。结论lnc-Eif4a2/miR-142a-5p/Vmp1通路具有对抗缺氧诱导小鼠海马神经元细胞损伤的作用,表明该通路可能作为缺血性卒中的潜在治疗靶点。
黄正义刘淑云赵增霞
关键词:缺氧诱导
胞外信号调节激酶信号通路对亚砷酸钠诱导的小鼠海马神经元细胞凋亡的调控作用
2025年
目的探讨活性氧(ROS)及其介导的胞外信号调节激酶(ERK)/cAMP反应件结合蛋白(CREB)信号通路在亚砷酸钠(NaAsO_(2))诱导的小鼠海马神经元HT-22细胞凋亡中的作用机制。方法体外培养NaAsO_(2)暴露HT-22细胞,建立体外NaAsO_(2)暴露模型。将细胞分为对照组,4、6、8、10μmol/L NaAsO_(2)暴露组,N-乙酰半胱氨酸(NAC,5 mmol/L)独立干预组,NAC(5 mmol/L)与NaAsO_(2)(10μmol/L)联合干预组。二氯荧光素检测ROS水平;Western blotting检测ERK/CREB信号通路相关蛋白和凋亡相关蛋白水平;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果与对照组相比,4、6、8、10μmol/L NaAsO_(2)暴露组细胞中ROS水平显著升高,细胞核中p-ERK蛋白水平显著降低(P<0.05),细胞中p-CREB、Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,8、10μmol/L NaAsO_(2)暴露组细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。与10μmol/L NaAsO_(2)暴露组相比,NAC与NaAsO_(2)联合干预组细胞中ROS水平显著降低,细胞核中p-ERK蛋白水平显著升高(P<0.05),细胞中p-CREB、Bcl-2蛋白水平显著升高,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。结论NaAsO_(2)暴露激活细胞氧化应激反应,通过阻碍p-ERK核易位过程抑制CREB信号通路,从而诱发细胞凋亡。
陈峣于漫李昕尉玉婷刘旭丹王欢欢王梅
关键词:胞外信号调节激酶CAMP反应元件结合蛋白凋亡神经损伤
靶向海马神经元细胞的核酸适配体
本发明公开了靶向海马神经元细胞的核酸适配体。本发明基于Cell‑SELEX技术,筛选获得可结合海马神经元细胞的核酸适配体xsj‑1,并在此基础上截短,获得xsj‑1a、xsj‑1b、xsj‑1c,其中,长度为48bp的...
孙曙明熊诗俊
西红花苷对氟中毒海马神经元细胞的保护作用研究
实验目的:氟是维持我们机体健康的重要素,但人体长期接触氟化物会有产生氟斑牙及氟骨症的风险。值得关注的是,氟能透过血脑屏障,长期接触氟化物会导致神经系统危害,影响神经系统的结构和功能。脑组织中的海马区域对氟的敏感性很高,...
陈晓雪
关键词:氟中毒西红花苷海马神经元钙超载Β-CATENIN
甜菜碱拮抗氟暴露致海马神经元细胞损伤的作用机制研究
目的:课题组前期发现甜菜碱对氟的神经毒性具有拮抗作用,但其机制尚不明确。因此,本研究基于PI3K/AKT/CREB信号通路探讨甜菜碱(Betaine,BET)拮抗氟暴露致海马神经元细胞损伤的保护作用及其机制,为氟中毒引起...
孙钟铭
关键词:甜菜碱
苁蓉散通过抑制内质网应激减少AD模型大鼠海马神经元细胞凋亡被引量:1
2024年
目的:探究苁蓉散(Cong Rong San,CRS)对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型大鼠神经元损伤及内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的影响。方法:将60只SD雄性大鼠(2月龄)随机分为对照组、模型组、低剂量CRS组、中剂量CRS组、高剂量CRS组和盐酸美金刚组。Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力;HE和尼氏染色观察大鼠海马CA1区的神经元形态;透射电镜观察大鼠海马的内质网形态;TUNEL染色观察大鼠海马CA1区神经元的凋亡情况;Western blot实验检测大鼠海马中葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bcl-2-ssociated X protein,Bax)、caspase-3及通路蛋白蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)、p-PERK、激活转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)和C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的表达。结果:与模型组比较,中、高剂量的CRS能有效提高大鼠学习记忆能力,减少神经元的丢失,抑制ERS通路PERK-ATF4-CHOP的发生,减少海马中凋亡蛋白Bax和caspase-3的表达,增加海马中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结论:CRS可以减轻AD大鼠认知损伤、海马神经元的损伤和神经元凋亡,其机制可能是抑制了ERS。
蔡元钦龙清华王曦曾楚华
关键词:内质网应激神经元损伤细胞凋亡
芹菜素对脂多糖诱导小鼠海马神经元细胞损伤的改善作用及其机制
2024年
目的观察芹菜素对脂多糖(LPS)诱导小鼠海马神经元细胞损伤的改善作用,并探讨其相关机制。方法体外培养小鼠海马神经元细胞系HT22,采用CCK-8法筛选造模药物LPS及干预药物芹菜素的最佳作用浓度,筛选得到LPS、芹菜素的最佳作用浓度分别为2µg/mL、0.25µmol/L。将HT22细胞分为对照组、模型组及芹菜素组,对照组正常培养不作任何处理,模型组加入0.25µmol/L的LPS培养,芹菜素组以2µg/mL的LPS干预24 h后,再加入0.25µmol/L芹菜素培养。采用Annexin V/PI双染法观察细胞凋亡情况,Western blotting法检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)蛋白。采用UPLC-Q-TOF-MS/MS分析并筛选各组细胞差异代谢产物,对差异代谢产物进行MetPA分析,获取其潜在的代谢途径。结果细胞凋亡率及TNF-α、IL-1β蛋白表达模型组>芹菜素>对照组(P均<0.01)。代谢组学分析共筛选出尿苷二磷酸葡萄糖、谷氨酸、琥珀酸、柠檬酸、左旋肉碱等16个差异代谢产物,共涉及亚油酸、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、三羧酸循环、谷胱甘肽代谢等28条代谢途径。结论芹菜素对LPS诱导的小鼠海马神经元细胞损伤具有改善作用,其机制可能与调控细胞内代谢紊乱有关。
杨萌薛傲李雪赵红梅任毅帆雷霞张亚峰张宁
关键词:芹菜素海马神经元损伤神经保护
LINC00657对氧糖剥夺诱导的小鼠海马神经元细胞损伤的影响及机制研究
2024年
目的探讨LINC00657对氧糖剥夺(OGD)诱导的小鼠海马神经元细胞损伤的影响及作用机制。方法对小鼠海马神经元细胞HT22进行OGD处理,建立损伤模型,将正常培养的HT22细胞作为对照;将si-NC、si-LINC00657、微小RNA(miR)-NC、miR-224-3p mimics分别转染至HT22细胞,然后进行OGD处理;向HT22细胞共转染si-LINC00657和anti-miR-NC,或共转染si-LINC00657和anti-miR-224-3p,然后进行OGD处理。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LINC00657、miR-224-3p相对表达量;采用CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞存活率、细胞凋亡率;采用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)水平;采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-224-3p过表达对野生型LINC00657载体(WT-LINC00657)、突变型LINC00657载体(MUT-LINC00657)荧光素酶活性的影响。结果与对照细胞相比,OGD诱导的HT22细胞中LINC00657表达上调,miR-224-3p表达下调,差异有统计学意义(P<0.05);分别与转染si-NC或转染miR-NC相比,转染si-LINC00657或转染miR-224-3p mimics后,细胞存活率、SOD活性和GSH-Px活性升高,细胞凋亡率、LDH活性和MDA水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);miR-224-3p过表达降低了WT-LINC00657的荧光素酶活性,差异有统计学意义(P<0.05);与共转染si-LINC00657和anti-miR-NC的细胞相比,共转染si-LINC00657和anti-miR-224-3p的细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,LDH活性、MDA水平升高,SOD、GSH-Px活性降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论干扰LINC00657可通过上调miR-224-3p而促进细胞增殖,并抑制细胞凋亡和氧化应激反应,从而减轻OGD诱导的小鼠海马神经元细胞损伤。
史倩王保奇齐桃桃鲍汉中
关键词:海马神经元细胞氧糖剥夺细胞增殖氧化应激

相关作者

纪志盛
作品数:59被引量:48H指数:4
供职机构:暨南大学
研究主题:脊髓损伤 海马神经元细胞 氧化应激反应 脊髓 氧自由基
王珂
作品数:21被引量:2H指数:1
供职机构:暨南大学
研究主题:海马神经元细胞 脊髓损伤治疗 脊髓损伤 氧化应激反应 脊髓损伤修复
林宏生
作品数:176被引量:741H指数:13
供职机构:暨南大学
研究主题:脊髓损伤 椎弓根钉 椎体 脊髓损伤修复 脊髓
丁砚兵
作品数:60被引量:329H指数:9
供职机构:湖北省中医院
研究主题:名医经验 偏头痛 中西医结合疗法 失眠 阿托伐他汀钙片
张宏
作品数:206被引量:1,252H指数:18
供职机构:北京协和医院
研究主题:白念珠菌 筋脉通 高糖培养 汉防己甲素 氟康唑