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适应悬浮MDCK细胞A型流感病毒株的筛选及拯救: 2025年; 目的筛选并拯救适应在悬浮MDCK细胞中增殖的A型流感病毒株,以期为细胞流感疫苗株的制备及筛选提供实验依据。方法将A/Nebraska/14/2019(H1N1)及A/Guangdong-Maonan/SWL1536/2019_CNIC-1909(H1N1)2株流感毒株分别于悬浮MDCK细胞中进行连续适应性传代,通过检测血凝滴度及细胞培养半数感染量(CCID50)筛选稳定适应悬浮MDCK细胞培养的毒株,并以其为亲本株,采用反向遗传学技术拯救获得流感病毒骨架毒株reH1N1及重组毒株rcH1N1,电镜下观察病毒粒子形态,经空斑纯化后进行序列验证。将纯化重组毒株rcH1N1在悬浮MDCK细胞中进行连续传代培养,检测血凝滴度及CCID50,并验证其遗传稳定性。结果毒株A/Guangdong-Maonan/SWL1536/2019_CNIC-1909的血凝滴度和CCID50更稳定,更适应悬浮MDCK细胞培养。拯救获得的重组毒株rcH1N1及骨架毒株reH1N1的病毒粒子形态均具有流感病毒粒子形态特征,空斑形成单位分别为8×10^(7)及6×10^(7)PFU,各段基因的PCR产物序列与重组质粒序列一致。重组毒株rcH1N1经5次传代后可获得较高滴度且稳定的毒株,血凝滴度最高为1∶512,lgCCID50最高为7.57,且传代毒株遗传物质保持稳定。结论筛选及拯救获得了适应悬浮MDCK细胞的A型流感病毒株rcH1N1,为细胞流感疫苗的研发奠定了基础。; 相振环李臣锋刘莹隋丽娜王宇田孙艳军吴业红; 关键词：反向遗传学 MDCK细胞

一种携带狂犬病毒基因的重组流感病毒株及其制备方法与应用: 本发明提供了一种携带狂犬病毒基因的重组流感病毒株及其制备方法与应用，所述重组流感病毒株为携带狂犬病毒基因的流感病毒载体通过反向遗传系统在细胞中拯救出的携带狂犬病毒基因的重组流感病毒；所述狂犬病毒基因位于甲型流感病毒NA片...; 朱应豆凯文刘实佘应龙

一种基于M基因核苷酸片段删除的流感病毒的致弱方法以及致弱流感病毒株和应用: 本发明涉及一种流感病毒的致弱方法以及致弱流感病毒株和应用，属于减毒疫苗技术领域。本发明所述致弱方法，包括以下步骤：删除流感病毒M2部分基因序列，利用反向遗传操作系统，拯救出致弱流感病毒株。本发明致弱方法所产生的致弱病毒株...; 陈瑞婷毛水花孙慧敏周孟云李晓雨宋家升

一种C型流感病毒株: 本发明属于生物技术领域，涉及一种C型流感病毒株。本发明所述的C型流感病毒株，保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：V202299。本发明所提供的C型流感病毒株可传代培养，根据应用需要可进行扩繁。该毒...; 曹蓝陈艺韵周腾飞李魁彪狄飚

一种同义突变结合删除突变的流感病毒的致弱方法及致弱流感病毒株和应用: 本发明涉及一种同义突变结合删除突变的流感病毒的致弱方法及致弱流感病毒株和应用，属于致弱病毒疫苗技术领域。本发明所述致弱方法包括以下步骤：对A型流感病毒M基因中M2基因和M1基因重叠的部分进行同义突变，保证M1氨基酸序列的...; 毛水花周孟云陈瑞婷刘晓菲宋家升

一种携带HIV-1基因的重组流感病毒株及其制备方法与应用: 本发明提供了一种携带HIV‑1基因的重组流感病毒株及其制备方法与应用，所述重组流感病毒株为携带HIV‑1基因的流感病毒载体通过反向遗传系统在细胞中拯救出的重组流感病毒；所述HIV‑1基因位于改造甲型流感病毒NS片段的开放...; 朱应马采娇刘实佘应龙

一种携带狂犬病毒基因的重组流感病毒株及其制备方法与应用: 本发明提供了一种携带狂犬病毒基因的重组流感病毒株及其制备方法与应用，所述重组流感病毒株为携带狂犬病毒基因的流感病毒载体通过反向遗传系统在细胞中拯救出的携带狂犬病毒基因的重组流感病毒；所述狂犬病毒基因位于甲型流感病毒NA片...; 朱应豆凯文刘实佘应龙

一种表达II型单纯疱疹病毒蛋白的重组流感病毒株及其制备方法与应用: 本发明提供了一种表达II型单纯疱疹病毒蛋白的重组流感病毒株及其制备方法与应用，所述表达II型单纯疱疹病毒蛋白的重组流感病毒株的保藏编号为CCTCC NO:V202148。本发明由II型单纯疱疹病毒蛋白优势表位整合入流感病...; 朱应刘林刘实佘应龙

一种同义突变结合删除突变的流感病毒的致弱方法及致弱流感病毒株和应用: 本发明涉及一种同义突变结合删除突变的流感病毒的致弱方法及致弱流感病毒株和应用，属于致弱病毒疫苗技术领域。本发明所述致弱方法包括以下步骤：对A型流感病毒M基因中M2基因和M1基因重叠的部分进行同义突变，保证M1氨基酸序列的...; 毛水花周孟云陈瑞婷刘晓菲宋家升

一种基于M基因核苷酸片段删除的流感病毒的致弱方法以及致弱流感病毒株和应用: 本发明涉及一种流感病毒的致弱方法以及致弱流感病毒株和应用，属于减毒疫苗技术领域。本发明所述致弱方法，包括以下步骤：删除流感病毒M2部分基因序列，利用反向遗传操作系统，拯救出致弱流感病毒株。本发明致弱方法所产生的致弱病毒株...; 陈瑞婷毛水花孙慧敏周孟云李晓雨宋家升

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