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一种水稻悬浮细胞的建立方法: 本发明涉及组织培养技术领域，特别是涉及一种水稻悬浮细胞的建立方法。包括：将水稻种子消毒后接种于诱导培养基上进行诱导培养，得到胚性愈伤组织；将胚性愈伤组织接种于继代培养基上进行继代培养，得到继代后愈伤块；将继代后愈伤块接种...; 姜锦林张慧谢宇峰顾明月王磊龙涛

一种水稻悬浮细胞系快速培养的方法: 本发明涉及一种水稻悬浮细胞系快速培养的方法，属生物技术领域。该水稻悬浮细胞系快速培养的方法包括：外植体的选择、外植体的灭菌、愈伤组织的诱导、愈伤组织的继代、悬浮细胞的培养步骤。本发明对培养悬浮细胞培养基和继代时处理悬浮细...; 陈越程在全付坚王波钟巧芳肖素勤陈玲柯学张敦宇殷富有王玲仙余腾琼蒋聪李娥贤黄兴奇

QCM实时监测五价砷胁迫对水稻悬浮细胞粘弹性的影响被引量：4: 2019年; 本文通过QCM技术实时监测水稻悬浮细胞在不同浓度五价砷连续及单独胁迫下的粘弹性变化,从细胞整体水平评估了重金属对水稻悬浮细胞力学性质的影响。结果表明:1)在2~10 mmol/L范围内,五价砷对水稻悬浮细胞的连续和单独胁迫的影响均随着浓度增加而增强;2)在连续胁迫和单独胁迫下,随着五价砷浓度的增加,水稻悬浮细胞粘弹性指数均下降,细胞软硬度减小即细胞变软;3)在五价砷连续梯度浓度胁迫下,水稻悬浮细胞粘弹性指数呈梯度下降;4)在五价砷不同浓度单独胁迫下,随着五价砷浓度的增加,水稻悬浮细胞粘弹性指数变化逐渐平缓,即水稻悬浮细胞随着五价砷浓度升高,敏感程度降低。以期建立一种用来衡量重金属胁迫对植物影响的一种新方法。; 周菲周铁安潘炜松; 关键词：水稻悬浮细胞五价砷石英晶体微天平

QCM动态监测与研究砷胁迫下水稻悬浮细胞力学性能变化: 植物细胞应对重金属胁迫的最初表现为细胞壁硬化与伸展性受限,即重金属改变了植物细胞壁的力学性能。本论文采用多聚赖氨酸修饰膜黏附水稻悬浮细胞,并通过石英晶体微天平技术(QCM)和宽频QCM技术实时监测水稻悬浮细胞在不同浓度砷...; 周菲; 关键词：水稻悬浮细胞 SOD活性

一种建立水稻悬浮细胞系的方法及其制备工艺: 本发明公开了一种建立水稻悬浮细胞系的方法，包括以下步骤：(1)接种用胚性愈伤组织的获得；(2)将获得的水稻胚性愈伤组织接种于培养基中，在摇床中振荡培养；(3)将培养物中的大颗粒愈伤筛除，收集悬浮液，离心，收集沉淀物；(4...; 龙起樟万建林黄永兰唐秀英王会民芦明

一种水稻悬浮细胞系快速培养的方法: 本发明涉及一种水稻悬浮细胞系快速培养的方法，属生物技术领域。该水稻悬浮细胞系快速培养的方法包括：外植体的选择、外植体的灭菌、愈伤组织的诱导、愈伤组织的继代、悬浮细胞的培养步骤。本发明对培养悬浮细胞培养基和继代时处理悬浮细...; 陈越程在全付坚王波钟巧芳肖素勤陈玲柯学张敦宇殷富有王玲仙余腾琼蒋聪李娥贤黄兴奇

不同启动子在水稻悬浮细胞中诱导外源基因的表达被引量：1: 2014年; 为进一步提高外源基因在水稻悬浮细胞中的表达水平,以花椰菜花叶病毒(Ca MV)35S启动子为对照,克隆了玉米泛素蛋白启动子(Ubi)、水稻肌动蛋白启动子(Actin)以及水稻Oscc1启动子,以GFP为报告基因,通过启动子串联的方式,构建了10个植物表达载体:p CAMBIA 1304 35S-GFP、Ubi-GFP、Actin-GFP、Oscc1-GFP、35S/Ubi-GFP、35S/Actin-GFP、35S/Oscc1-GFP、Ubi/Actin-GFP、Ubi/Oscc1-GFP、Actin/Oscc1-GFP,采用根瘤农杆菌介导的方法,将表达载体导入日本晴胚性愈伤,经悬浮培养分别获得转基因的悬浮细胞系,利用荧光显微镜、酶标仪检测GFP荧光强度,用Western blot检测GFP蛋白质的表达水平。结果发现串联启动子明显强于单个启动子驱动的GFP蛋白质表达水平。在10个表达载体中,35S/Ubi、Ubi/Actin和Ubi/Oscc1是3种优化的启动子组合,其中Ubi/Oscc1串联启动子驱动GFP的表达水平最高,约为对照35S启动子的3倍。; 陈兆骞陈熙张炜; 关键词：水稻悬浮细胞系绿色荧光蛋白异源表达

不同启动子及其组合在水稻悬浮细胞中驱动外源基因的表达分析: 启动子是基因表达调控的重要顺式作用元件，对于目的基因的表达至关重要。在基因工程的研究和应用中，选用合适的启动子对于外源基因的高效表达具有重要意义。植物悬浮细胞系是研究细胞分化、代谢、死亡等问题的重要材料。因此，研究适用于...; 陈兆骞; 关键词：水稻悬浮细胞绿色荧光蛋白异源表达

水稻悬浮细胞培养过程中3个逆转座子的转录与转座特性: 2014年; 【目的】在水稻悬浮细胞培养不同时期研究3个具有多逆境应答特征逆转座子相关基因的转录与转座特性,为揭示该类基因的生物学功能奠定理论基础。【方法】以水稻品种月亮谷为材料进行悬浮细胞培养,以实时荧光定量PCR检测不同培养时期材料的3个逆转座子相关基因Tos17、Os05g24920和Os01g02040相对表达量及拷贝数的变化,初步分析其转录活性与转座活性。【结果】在培养期间,Os01g02040、Os05g24920、Tos17转录活性呈先升高后下降的变化趋势,其最高转录活性分别出现在培养期的第3个月和第6个月,相对表达量分别为71.84、41.26和53.20倍;Tos17保持较稳定的转录活性,其他2个基因在组培6个月后转录活性迅速下降。在培养3个月后,Os01g02040和Os05g24920的转座活性变化较稳定,相对拷贝数变化范围为2.14-2.64和2.76-5.03倍;Tos17转座活性变化极明显,拷贝数不断提高,至第14个月达12.13倍,明显高于其他两个基因。【结论】在细胞悬浮培养过程中3个逆转座子相关基因均被强烈激活进行转录,但其转录调控和转座调控途径不同。; 徐玲杨静刘林李成云; 关键词：水稻转录转座活性

PLD途径合成的PA增强高表达转玉米C_4型pepc水稻悬浮细胞中PEPC酶活性被引量：5: 2013年; 为了研究外源信号分子对高表达玉米C_4型pepc酶活性的调节机制,本实验以高表达玉米C_4型pepc水稻(PC)和原种水稻Kitaake(WT)的悬浮细胞系为材料,研究葡萄糖、胡蜂蜂毒肽(mastoparan,Mas)及其磷脂酸(phosphatidicacid,PA)的两个合成途径的专一性抑制剂(磷脂酶D(phospholipaseD,PLD)的专一性抑制剂正丁醇和磷脂酶C(phospholipaseC,PLC)的专一性抑制剂新霉素)对供试材料PEPC活性的影响。结果表明,3%葡萄糖处理0.5h对WT的PEPC酶活性抑制最明显;相对于PC,则5%的葡萄糖处理5h时,对其PEPC酶活性抑制的最明显。5mmol/L的Mas对WT和PC悬浮细胞的PEPC酶活性分别抑制了约60%和40%。0.01mmol/L、0.1mmol/L和1mmol/L新霉素处理对WT的PEPC酶活性影响不明显,且无时间效应;与WT相比较,不同浓度的新霉素均增强了PC的PEPC酶活性,其中0.1mmol/L新霉素处理增加为对照的约7倍。正丁醇处理明显抑制了WT的PEPC酶活性,但不同浓度处理之间却没有显著差异;而对于PC,0.02%、0.04%正丁醇处理使得PEPC酶活性显著下降,且比WT的更显著。同时0.04%的正丁醇的抑制效应具有明显的时间效应。以上结果表明,对PC的PEPC酶活性的调节主要依赖于由PLD途径产生的PA的参与。; 王满钱宝云李霞; 关键词：水稻磷脂酸磷脂酶C 磷脂酶D 悬浮细胞

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