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牛乳铁蛋白在酵母中的异源表达及抑菌性研究
本发明公开了牛乳铁蛋白在酵母中的异源表达及抑菌性研究,属于生物工程领域。本发明中牛乳铁蛋白通过密码子优化,在26℃、pH 6.0的条件下,在本发明构建的重组菌中中实现了可溶性表达,表达量为40.2mg·L<Sup>...
张荣珍徐岩赵慧婷
牛乳铁蛋白N-叶在酵母中的高效表达及抑菌性被引量:1
2022年
【目的】本研究将牛乳铁蛋白的N-叶(BLF-N)克隆至酵母菌基因组中,通过密码子优化和发酵条件优化,实现BLF-N的异源高效表达,研究重组BLF-N的抑菌功能。【方法】本文以BLF基因为模板,按照酵母的密码子偏好性进行密码子优化,构建重组表达载体pPIC9K-UBLF-N,电击转化到Pichia pastoris GS115中,获得重组菌P.pastoris GS115/pPIC9KUBLF-N。通过高拷贝策略和发酵条件优化,结合SDS-PAGE分析BLF-N蛋白表达情况,研究重组的BLF-N蛋白对革兰阳性和革兰阴性菌的抑菌活性。【结果】SDS-PAGE结果表明,BLF-N在P.pastoris GS115中实现了可溶性高效表达,分子量为37 kDa左右,与其理论分子量一致。通过高拷贝筛选,获得了在3 mg/mL遗传霉素G418抗性平板上生长的转化子;通过发酵条件优化,获得最优蛋白表达条件为:0.2%(V/V)甲醇添加量、30℃、pH 5.0,在此条件下,重组BLF-N的表达量为50.5 mg/L。抑菌实验结果表明,重组BLF-N对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有较强的抑菌活性,且重组BLF-N较商业BLF抑菌活性更高。【结论】通过蛋白表达和发酵条件优化策略,本研究成功实现了BLF-N在酵母中的高效表达,且重组BLF-N的抑菌活性较BLF显著提升。该研究为牛乳铁蛋白的高效绿色制备及产业化生产奠定了研究基础,同时为后续研究BLF和BLF-N的结构-功能关系差异提供了理论指导。
赵慧婷李利宏张荣珍徐岩
关键词:毕赤氏酵母可溶性表达抑菌功能
一种利用酵母菌株制备具有菠萝香味啤酒的方法
本发明公开了一种利用酵母菌株制备具有菠萝香味啤酒的方法,通过原料粉碎、糖化、过滤、洗糟、煮沸、酵母培养、酵母扩培、接种、满罐、主发酵、双乙酰还原、降温、贮酒等步骤制得啤酒,本发明利用酵母FBKL2.0008(...
王晓丹李袁巍
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一株丝孢酵母及其应用
本发明涉及微生物技术领域,公开了一株丝孢酵母及其应用。所述丝孢酵母的保藏编号为CCTCC NO:M 2018666。本发明还公开了能够使茶叶增香的制剂,该制剂含有所述丝孢酵母和酶助剂。本发明还公开了所述...
冯磊赵江源李铭刚文孟良梁宇鹏
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一种利用酵母制备陈皮酒的方法
本发明公开了一种利用酵母制备陈皮酒的方法,通过陈皮预处理、发酵物料的制备、发酵、包装等步骤制得陈皮酒。本发明将陈皮通过水浴加热,最大限度的提取出陈皮中的主要物质陈皮黄酮,然后与糖水混合,接入酵母进行发酵处理,...
王晓丹周鸿翔班世栋罗小叶邱树毅陈文思
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酵母中高效表达人血清白蛋白及基因编辑新技术的研究
人血清白蛋白是临床上具有重要应用的蛋白,但重组人血清白蛋白未能工业化生产,严重限制了它在临床上的供应。本课题开展人血清白蛋白高效表达和相关的酵母中基因编辑技术的研究具有重要的应用前景。  本文首先将密码子优化后的人血...
谷洋
关键词:人血清白蛋白毕赤酵母同源重组
一株丝孢酵母及其应用
本发明涉及微生物技术领域,公开了一株丝孢酵母及其应用。所述丝孢酵母的保藏编号为CCTCC NO:M 2018666。本发明还公开了能够使茶叶增香的制剂,该制剂含有所述丝孢酵母和酶助剂。本发明还公开了所述...
冯磊赵江源李铭刚文孟良梁宇鹏
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一种利用酵母发酵烟草的方法
本发明公开了一种利用酵母发酵烟草的方法,包括以下步骤:将酵母FBKL2.0008(Pichia kudriavzevii FBKL2.0008)菌种接种于斜面培养基上,在28℃下培养24h‑48h,待菌长满试...
王晓丹邱树毅李朝云
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一种利用酵母生产调香液的方法
本发明公开了一种利用酵母生产调香液的方法,包括以下步骤:斜面培养:将酵母FBKL2.0008菌种接种于斜面培养基上,在28℃下培养24‑48h,待菌丝长满试管;菌种活化;种子液制备;三角瓶固态发酵,得发酵品;...
王晓丹周鸿翔邱树毅罗小叶
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酵母发酵液中重组人血清白蛋白分离纯化工艺的初步研究
重组人血清白蛋白是血源蛋白的一种替代品,生理功能与人血清白蛋白相同,因具有不携带传染性病毒的优点而受到广泛的关注。目前重组人血清白蛋白主要通过基因重组酵母发酵产生,由于发酵过程中会产生许多杂质,因此从发酵液中分离、...
李辰雨
关键词:重组人血清白蛋白毕赤氏酵母发酵液分离纯化吸附脱色离子交换层析

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宋大新
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研究主题:毕赤氏酵母 大肠杆菌 基因 毕赤酵母 酵母
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作品数:14被引量:75H指数:3
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研究主题:APOA 毕赤氏酵母 胞内表达 分泌型载体 L型钙离子通道
周鹏
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