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核糖体展示技术筛选抗呋喃唑酮单链抗体: 2023年; 目的运用核糖体展示技术筛选高特异性抗呋喃唑酮(furazolidone,FZD)单链抗体,并进行初步分析。方法提取小鼠杂交瘤细胞总RNA,利用反转录PCR及重叠延伸(splicing by overlap extension,SOE)-PCR技术合成VH-linker-VL单链抗体文库。采用TNT T7 Quick for PCR DNA试剂盒对单链抗体文库进行体外翻译及筛选,经过三轮筛选富集目的基因,对目的基因进行原核表达及纯化后,初步分析其特异性及亲和力。结果获取1株特异性较高的单链抗体FZD-ScFv1,IC_(50)值为13.01 ng/mL,与呋喃它酮、呋喃妥因、氨基脲、呋喃西林及其衍生物之间的交叉反应率均小于1%。结论利用核糖体展示技术成功获得亲和力较好的单链抗体,该抗体可用于建立ELISA法,为FZD残留量的快速检测提供了新的思路。; 陈荫楠罗彩林郑晨娜石贤爱刘震; 关键词：呋喃唑酮单链抗体核糖体展示技术

应用核糖体展示技术筛选抗人p53单链抗体的效果: 2023年; 目的运用核糖体展示技术筛选抗人p53单链抗体,并进行初步分析。方法诱导表达p53蛋白,用其免疫小鼠。提取免疫小鼠脾脏组织的总RNA,通过反转录PCR和重叠延伸PCR分别扩增抗体重链可变区基因VH-Linker和轻链可变区基因VL-Linker,并合成VH-linker-VL型单链抗体基因。TNT T7 Quick for PCR DNA试剂盒对单链抗体基因进行体外转录与翻译,以p53蛋白为靶标,经过5轮筛选富集ScFv基因。将获取单链抗体片段进行原核表达后,采用ELISA法和细胞免疫学法检测。结果成功构建抗p53单链抗体库,并筛选出p53蛋白具有较强结合活性的单链抗体株p53-scFv1、p53-scFv2和p53-scFv3,可用以检测细胞中的p53蛋白。结论利用核糖体展示技术获得亲和力较好的抗人p53单链抗体,可为p53抗体的制备提供新思路。; 陈荫楠罗婉妹罗彩林郑晨娜郭娜燕; 关键词：P53蛋白单链抗体核糖体

核糖体展示复合体及其制造方法: 本发明的课题在于提供一种核糖体复合体、及该核糖体复合体的制备方法，所述核糖体复合体能够在不经过复杂的反应步骤的情况下制备，并且在不会损害核糖体的功能(特别是用于制作多肽文库的功能)的情况下修饰有呈递多肽。本发明的核糖体展...; 北宽士鹿仓敏裕前田博文高津庆士

SARS--CoV--2核糖体展示纳米抗体文库的构建与筛选: 由新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID...; 王馨悦; 关键词：新型冠状病毒核糖体展示技术抗体库真核表达

SARS-CoV-2核糖体展示纳米抗体文库的构建与筛选被引量：2: 2022年; 目的通过核糖体展示技术构建一个库容量大、多样性好的严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)特异性纳米抗体文库;利用真核表达系统表达并制备具有筛选质量的SARS-CoV-2受体结合域(Receptor Binding Domain,RBD)蛋白,并作为钓饵蛋白应用于纳米抗体的筛选。方法利用多种SARS-CoV-2特异性免疫原免疫羊驼,分离高免羊驼外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMCs),提取总RNA并反转录获得cDNA,通过巢式PCR扩增纳米抗体基因,同时引入核糖体文库所需要的展示元件。利用重叠延伸PCR将VHH片段与间隔序列gene-Ⅲ连接,构建核糖体展示纳米抗体文库。利用Expi293F哺乳动物细胞表达SARS-CoV-2 RBD蛋白,通过StrepTrap HP亲和柱纯化重组蛋白,将其作为钓饵蛋白对所构建的纳米抗体文库进行四轮特异性筛选。结果成功构建核糖体展示纳米抗体文库,该文库的多样性高、完整性好,有效库容为1.12×10^(13)。利用哺乳动物细胞表达系统表达出SARS-CoV-2 RBD蛋白,纯度高达97.5%。通过对核糖体纳米抗体文库进行四轮特异性筛选,获得纳米抗体的基因序列,经鉴定序列多样性丰富。结论成功构建SARS-CoV-2核糖体展示纳米抗体文库,制备出具有筛选质量的抗原并应用于抗体库的筛选,获得结构完整且序列多样性丰富的纳米抗体基因序列,为SARS-CoV-2纳米抗体的获得奠定了研究基础。; 王馨悦韩秋雪王振山焦翠翠毕津豪许梦园赵永坤冯娜王铁成迟航杨松涛夏咸柱; 关键词：新型冠状病毒核糖体展示抗体库真核表达

运用核糖体展示技术筛选PD-L1与HER2的鼠源特异性scFv: PD-L1与HER2是肿瘤治疗中具有代表性的重要靶点。随着癌症靶向治疗和免疫治疗技术的发展,治疗性抗体由于它们对靶标细胞具有良好的特异性,而对其他细胞的损伤较小,在癌症治疗方面取得了显著的治疗效果,并越来越受到重视。因此...; 陈云峰; 关键词：PD-L1 SCFV 核糖体展示

核糖体展示复合体及其制造方法: 本发明的课题在于提供一种核糖体复合体、及该核糖体复合体的制备方法，所述核糖体复合体能够在不经过复杂的反应步骤的情况下制备，并且在不会损害核糖体的功能(特别是用于制作多肽文库的功能)的情况下修饰有呈递多肽。本发明的核糖体展...; 北宽士鹿仓敏裕前田博文高津庆士; 文献传递

核糖体展示天然纳米抗体文库筛选HIF-1α单域重链抗体的应用基础研究: 作为体外展示技术，核糖体展示技术是用于从大容量文库中快速筛选功能性和特异性蛋白分子的强有力工具。与其他展示技术相比，核糖体展示技术有其独特的优势。该技术的应用领域广泛，包括抗体工程、蛋白质组学、诊断学和治疗学。对高亲和力...; 李若微; 关键词：核糖体展示 HIF-1Α 瞬时转染 RT-QPCR 抑癌活性; 文献传递

核糖体展示研究进展被引量：3: 2016年; 核糖体展示是一种无细胞系统,可以从文库中筛选蛋白质和多肽。翻译的蛋白质及其mRNA同时结合在核糖体上形成mRNA-核糖体-蛋白质三聚体,通过配体亲和分离得到功能性蛋白及其编码的mRNA,转换成对应的DNA后进行相关蛋白的表达,可用于抗体及蛋白质文库选择、蛋白质体外改造等,而且其可以展示较大的文库而不受细菌转化的限制,可对毒蛋白、蛋白酶敏感和不稳定的蛋白质进行筛选,也可在特定位点进行氨基酸修饰。就核糖体展示技术的研究进展及其在蛋白质进化和筛选方面的应用进行综述。; 郭园; 关键词：核糖体展示抗体蛋白质进化

基于核糖体展示技术的兔单克隆抗体制备方法: 本发明公开了一种兔单克隆抗体的制备方法，其特征在于采用核糖体展示技术来制备兔单克隆抗体，即通过PCR扩增目的抗体的基因文库，同时加入启动子、核糖体结合位点和茎环，并置于有偶联转录-翻译的无细胞翻译系统中孵育，使目的抗体基...; 不公告发明人; 文献传递

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