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柯萨奇病毒B组4型TaqMan探针一步法实时荧光定量PCR检测方法的建立及验证
2025年
目的建立柯萨奇病毒B组4型(Ccoxsackievirus B4,CVB4)Taq Man探针一步法实时荧光定量PCR(real-time fluo-rescence quantitative PCR,RT-q PCR)检测方法,并进行验证,以期为CVB4的快速定量检测提供可靠方法。方法选择CVB4的VP1序列中较保守部分,设计引物和探针;经体外转录获得阳性RNA标准品,绘制标准曲线,建立CVB4的Taq Man探针一步法RT-q PCR法。验证方法的灵敏度、线性范围、重复性、特异性。应用建立的方法检测16份临床样本。结果方法的检测灵敏度为10~3copies/μL;阳性RNA标准品在10^(3)~10^(10)copies/μL范围内,与荧光单位(relative fluorescence unit,RFU)具有良好的线性关系,线性方程为:y=-3.742 x+48.651,R^(2)为0.998;重复性验证CV<2%;与柯萨奇病毒B组其他血清型CVB2、CVB3、CVB5、CVB6,肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71),柯萨奇病毒A组(Coxsackie virus A,CVA)8、10、12型(CVA8、CVA10、CVA12),埃可病毒11型(Echovirus 11,E11)均无交叉反应。16份临床样本中12份为CVB4阳性。结论建立的Taq Man探针一步法RT-q PCR检测方法具有较好的灵敏度、特异性和重复性,可用于CVB4临床样品的检测。
郭伟陈俊薇刘煜菡张名冯昌增马绍辉
关键词:TAQMAN探针实时荧光定量PCR
柯萨奇病毒B组合物及其使用方法
本公开文本提供了柯萨奇病毒B(CVB)组合物以及使用此类组合物在个体中诱导针对CVB的免疫应答的方法。
H·孝蒂 M·克尼普 F·莱昂
柯萨奇病毒B型药物的研究进展
2024年
柯萨奇病毒B型(Coxsackieviruses B,CVB)是一种微小、无包膜的单正链RNA病毒,属于小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)肠道病毒属(Enterovirus),主要经消化道传播。CVB感染可以引起多种疾病,如手足口病、腹泻、急性心肌炎、无菌性脑膜炎、骨髓炎及出疹性疾病等。此外,CVB感染也是Ⅰ型糖尿病的诱发因素,严重威胁人们健康。目前,越来越多的天然和人工合成化合物以及单克隆抗体等已经被用于CVB感染的治疗,但是高效抗CVB药物仍然缺乏。本文对抗CVB病毒的药物进行综述,以期为CVB的预防、治疗和药物研发提供思路和依据。
朱丹东刘洪波
关键词:抗病毒药物药物靶点
一种柯萨奇病毒B组1型毒株及应用
本发明公开了一种柯萨奇病毒B组1型毒株,毒株命名为KM7‑X29,于2022年3月6日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:V202213,保藏地址为中国.武汉.武汉大学,该毒株利用Vero细胞进行培...
马绍辉张名许丹菡冯昌增王晓辉郭伟刘煜菡杨昭庆孙浩
一种柯萨奇病毒B组5型毒株及应用
本发明提供一种柯萨奇病毒B组5型毒株及其应用。该毒株命名为柯萨奇病毒B组5型KM299‑L05株,于2024年2月1日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:V202411,保藏地址为中国.武汉.武汉大...
马绍辉张名刘煜菡冯昌增陈俊薇王晓辉杨昭庆和占龙叶尤松孙浩
一种柯萨奇病毒B组5型毒株及应用
本发明提供一种柯萨奇病毒B组5型毒株及其应用。该毒株命名为柯萨奇病毒B组5型KM299‑L05株,于2024年2月1日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:V202411,保藏地址为中国.武汉.武汉大...
马绍辉张名刘煜菡冯昌增陈俊薇王晓辉杨昭庆和占龙叶尤松孙浩
柯萨奇病毒B组1型感染动物模型研究进展
2024年
柯萨奇病毒B组1型(coxsakievirus B1,CVB1)能引起人类心肌炎、无菌性脑膜炎、新生儿全身感染等多种疾病,幼儿感染后病情较重甚至引发死亡,而目前尚无针对该病毒的疫苗及特效治疗药物。因此,建立并开展相关动物模型研究对CVB1感染后的机体免疫反应、病毒毒力机制、药物疫苗研发等问题的解决具有重要意义,同时也能为临床治疗提供部分依据。本文通过对CVB1病毒感染构建的不同动物模型进行总结,以期望为建立合适的动物模型以及开展相关研究提供参考。
李咏洁和占龙
关键词:动物模型
柯萨奇病毒B组5型山东分离株基因特征分析被引量:1
2024年
目的探明山东11株柯萨奇病毒B组5型(CVB5)的全基因组特征,探讨CVB5病毒遗传进化规律。方法采集2020年山东省手足口病患者的粪便样本,通过临床样本荧光定量检测、病毒分离、高通量和一代测序验证,共获得11株CVB5分离株,同时结合GenBank公共数据库中收录的CVB5病毒株全长基因组和结构蛋白VP1基因序列,构建最大似然系统进化树,研究CVB5基因特征和遗传进化规律。结果11株CVB5分离株全长基因组呈高度核苷酸和氨基酸相似性(>99.9%),与多数2008-2020年我国流行毒株均位于全基因组进化树的Group 4分支,且与2013年江苏省分离株417核苷酸相似性最高,为96.8%;11株CVB5分离株与Group 4参考株相比,P3区3A、3B、3C和3D基因核苷酸同源性均低于P1和P2区其他基因,且多为同义突变;11株CVB5分离株VP1基因位于我国主要流行亚型即C4基因亚型中,与2018年山东省分离株SWG14、SWG44、JN18120亲缘关系较近,核苷酸同源性为96.1%~98.2%。结论CVB5毒株在我国多地持续流行,11株山东分离株同国内多数CVB5株的全基因组及VP1基因均位于同一进化分支,说明11株分离株均为近期国内流行株,它们所在Group 4为国内优势流行分支,C4基因亚型为国内VP1基因流行亚型。
曹梦圆崔亚楠王敏姚雪韦庆娟胡弢邢薇佳史卫峰李娟
关键词:全基因组VP1遗传进化
一种柯萨奇病毒B1型的核酸定量检测方法
本发明涉及病毒检测领域,具体地,本发明涉及用于检测柯萨奇病毒B1型(CVB1)的引物及探针,以及使用所述引物及探针检测CVB1的方法。此外,本发明还涉及用于CVB1核酸提取的稳定剂以及使用所述稳定剂提取CVB1核酸的方法...
黄芳杨立生王倩刘冰付文锟施炜
应用KMB17细胞培养柯萨奇病毒B族1、2、3型的研究
2024年
目的 采用人胚肺二倍体细胞(human embryonic lung diploid cell)KMB17株对柯萨奇病毒B族(Coxsackievirus B,CVB)1、2、3型进行适应性培养,探索应用KMB17细胞培养CVB1-3型病毒的相关参数,为基于KMB17细胞研发CVB多价疫苗提供参考。方法 将CVB 1-3型分别设置8个不同的感染复数(mulitiplicity of infection, MOI)梯度(0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4),在KMB17细胞上进行培养观察,对病毒培养结果进行统计分析。结果 CVB 1-3型病毒均能KMB17细胞中复制,并使细胞产生明显的细胞病变(cytopathic effect, CPE)。其中CVB 1型在KMB17细胞上适宜的种毒MOI值为0.25~0.3,病毒收获液的平均滴度为7.25 lgCCID50/mL,适宜MOI范围内病毒培养时间的95%置信区间为96.1~97.6 h;CVB 2型在KMB17细胞上适宜的种毒MOI值为0.20~0.25,病毒收获液平均滴度为7.375 lgCCID50/mL,适宜MOI范围内病毒培养时间的95%置信区间为74.8~76.8 h。CVB 3型在KMB17细胞上适宜的种毒MOI值为0.30~0.35,病毒收获液的平均滴度为7.25 lgCCID50/mL,适宜MOI范围内病毒培养时间的95%置信区间为82.7~84.7 h。结论 KMB17为一株理想的用于CVB1、2、3型培养的基质细胞,可为基于KMB17细胞研发CVB多价疫苗提供参考。
邓自君靳玮华李艳艳张伟杨凤梅张名陈丽雄徐鸿界李明学刘权唐洁段素琴孙文亭李咏洁马绍辉赵远杨明和占龙杨净思
关键词:病毒培养

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齐秀英
作品数:89被引量:542H指数:12
供职机构:天津医科大学公共卫生学院
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作品数:53被引量:132H指数:7
供职机构:天津医科大学基础医学院
研究主题:仙台病毒 医学微生物学 呼吸道感染 副粘病毒 单纯疱疹病毒
夏弈明
作品数:69被引量:393H指数:12
供职机构:中国疾病预防控制中心营养与食品安全所
研究主题:硒 硒蛋白 硒水平 克山病 谷胱甘肽过氧化物酶
麦根荣
作品数:65被引量:283H指数:9
供职机构:武汉大学人民医院
研究主题:病毒性心肌炎 儿童 新生大鼠 心肌炎 超声心动图
杨英珍
作品数:246被引量:1,786H指数:26
供职机构:复旦大学附属中山医院
研究主题:病毒性心肌炎 心肌炎 扩张型心肌病 小鼠心肌 柯萨奇病毒