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- 一种日本血吸虫感染小鼠肝脏中单核细胞的分离方法
- 本发明公开了一种日本血吸虫感染小鼠肝脏中单核细胞的分离方法,包括步骤:S1.对小鼠肝脏灌注去除肝脏内血液;S2.碎化肝脏组织,去除纤维结缔组织后,进行组合酶消化,得到混合液;所述组合酶为质量比为5:1的IV型胶原酶和DN...
- 张英张蓓戴洋乔树苗
- Shroom2基因缺陷对日本血吸虫感染影响的初步研究
- 2024年
- SHROOM2是一种肌动蛋白结合蛋白,参与细胞运动调节和肌动蛋白细胞骨架重塑。而日本血吸虫虫卵可引发肉芽肿形成,在虫卵周围形成有组织的免疫聚集体。本研究偶然发现,Shroom2缺失的小鼠在感染血吸虫后,其死亡率远高于野生型小鼠,故本研究旨在研究Shroom2基因敲除小鼠在感染日本血吸虫后的病程进展,以揭示Shroom2基因在血吸虫感染和宿主应对虫卵肉芽肿形成免疫反应中的潜在作用。本文利用CRISPR/Cas9技术构建了Shroom2基因敲除小鼠,采用腹部贴片法将日本血吸虫尾蚴分别感染C57BL/6野生型(WT)和Shroom2基因敲除小鼠(KO),每只小鼠感染30±2条。感染后每日监测小鼠状态,记录死亡数量,并在感染第5、7周将小鼠安乐死,取其外周血进行血常规分析;苏木素-伊红染色观察肝组织的病理变化。结果显示,Shroom2基因敲除小鼠在感染血吸虫后的急性期内死亡率显著提高,并伴有肝脏严重病理变化和血常规指标异常。这表明Shroom2基因在调节宿主免疫反应中起关键作用,其缺失可能导致宿主对病原体的易感性增加,从而加速疾病进程。
- 刘婉玲修磊胡薇胡薇吴晶
- 关键词:免疫缺陷日本血吸虫
- 日本血吸虫感染对小鼠肝脏铁分布及铁蛋白表达的影响被引量:1
- 2024年
- 目的研究日本血吸虫感染对小鼠肝脏铁分布及铁蛋白表达的影响。方法24只昆明小鼠随机分为对照组、感染6、8、10周组,每组6只。感染组经腹部皮肤接种尾蚴(20±2)只,待小鼠染虫6、8、10周时,处死小鼠留取肝脏,采用苏木精-伊红(HE)染色和马松(Masson)染色观察小鼠肝脏病理变化,采用二氨基联苯胺(DAB)增强的普鲁士蓝(Perl’s)铁染色观察肝组织铁分布,采用免疫组织化学染色检测肝脏铁蛋白的表达,采用逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测小鼠肝脏铁蛋白轻链和重链mRNA的表达。结果与对照组小鼠比较,血吸虫感染6、8、10周组小鼠肝脏颜色逐渐变深,质地逐渐变硬。HE和Masson染色显示,感染组小鼠肝组织内有虫卵沉积,围绕虫卵形成肉芽肿及纤维化,而对照组未出现虫卵肉芽肿。DAB增强的Perl’s铁染色显示,与对照组比较,感染6、8、10周组肝细胞铁染色强度降低,差异均有统计学意义(t=5.94、7.72、9.67,P均<0.05),肝血窦内有铁色素沉积,且随感染时间延长逐渐增多(t=3.89、8.59、12.50,P均<0.05),虫卵壳铁染色较强。免疫组织化学染色显示,感染6、8、10周组的肝脏铁蛋白表达均低于对照组(t=5.59、7.35、9.66,P均<0.05),且随着感染时间延长逐渐减少。RT-qPCR结果显示,感染6、8、10周组的铁蛋白轻链和重链mRNA表达水平均低于对照组(t_(轻链)=4.01、7.21、9.97,t_(重链)=4.50、5.23、5.22,P均<0.05)。铁蛋白轻链mRNA随着感染时间的延长逐渐减少,与感染6周组比较,感染8周、10周组差异均有统计学意义(t=3.20、5.96,P均<0.05)。重链mRNA随着感染时间的延长无明显变化,感染6、8、10周组间差异均无统计学意义(t=0.73、0.72、0.01,P均>0.05)。结论日本血吸虫感染可导致小鼠肝细胞铁含量减少,铁蛋白表达降低,这间接反映了血吸虫感染导致机体缺铁的状态,是血吸虫感染所致贫血的机制之一。
- 胡思琴曾雅伦盘星花李青刘鹏赵晋英
- 关键词:日本血吸虫肝纤维化铁铁蛋白
- 重组腺病毒AdV5-SjCB1与rSjCB1联合免疫预防日本血吸虫感染的研究
- 血吸虫病(Schistosomiasis)是由血吸虫寄生引起的人兽共患寄生虫病,危害人类健康,影响社会经济发展。全球有超过2.5亿人感染,感染者中发病率高,导致的损失估计达190万残疾调整生命年(DALYs)。虽然吡喹酮...
- 许孟格
- 关键词:日本血吸虫重组腺病毒
- 日本血吸虫感染小鼠慢性致病阶段肝脏中差异表达长非编码RNA筛选及功能分析
- 2024年
- 目的 筛选日本血吸虫感染小鼠慢性致病阶段肝脏中差异表达长非编码RNA(long non-coding RNA, lnc RNA)并进行功能分析,为探索lnc RNA在日本血吸虫感染所致肝脏病变中的作用提供参考。方法 20只6周龄C57BL/6小鼠随机分为2组,每组10只。实验组每只小鼠采用腹部贴片法感染(15±2)条日本血吸虫尾蚴建立日本血吸虫慢性感染小鼠模型,以蒸馏水作为对照组。两组小鼠均于感染70 d后剖杀,获取小鼠肝脏组织样本,进行RNA抽提及文库构建。通过Illumina Nova Seq 6000测序平台对文库进行测序,采用fastp软件进行数据清洗,使用HISAT2软件进行参考基因组比对及基因表达量(FPKM)计算。采用CNIC、CPC、Pfam、PLEK软件对潜在lnc RNA序列进行编码潜能预测,筛选出潜在lnc RNA。采用DESeq2软件进行基因差异表达分析,筛选出差异表达lnc RNA。通过基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,挖掘差异表达lnc RNA靶基因参与的生物学过程和代谢途径。结果 共筛选出333个潜在lnc RNA,67个鉴定为差异表达lnc RNA,其中49个表达上调、18个表达下调。差异表达lnc RNA预测靶基因共53个,GO富集分析显示这些靶基因主要富集在生物学过程和分子功能;其中Sema7a、Arrb1、Ccl21b等基因可能是细胞外调节蛋白激酶1(extracellular regulated protein kinase,ERK1)和ERK2级联正调控生物学过程的关键靶基因,可能参与调控胶原蛋白表达。KEGG富集分析显示,差异表达lnc RNA靶基因主要参与细胞因子-细胞因子受体相互作用、病毒蛋白与细胞因子和细胞因子受体的相互作用、趋化因子信号通路和核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)通路等信号通路。结论 本研究鉴定了日本血吸虫感染小鼠慢性致病阶段肝脏中差异表达lnc RNA及其靶基因的功能富集,其中上调表达的lnc RNA可能通过调控Sema7a、Arrb1、C
- 李银龙李琴林伟娜冯婷秦志强曹淳力李石柱许静
- 关键词:日本血吸虫细胞外调节蛋白激酶小鼠
- 阻断白细胞介素9对日本血吸虫感染小鼠免疫病理损伤及肠道菌群的影响
- 2024年
- 目的研究阻断白细胞介素9(IL-9)对日本血吸虫(Sj)感染小鼠肝组织免疫损伤以及肠道菌群的影响,探讨阻断IL-9改善血吸虫病免疫病理损伤的机制。方法将15只实验小鼠随机分成正常对照组、Sj组和IL-9阻断组。Sj组和IL-9阻断组小鼠分别感染(15±1)条日本血吸虫尾蚴,IL-9阻断组小鼠每周腹腔注射IL-9抗体2次,Sj组小鼠每周腹腔注射IgG抗体2次作为同型对照。感染9周后处死小鼠,收取肝脏组织进行苏木精-伊红(HE)染色、Masson染色及免疫组化;收取小鼠结肠内容物,对肠道微生物进行宏基因组测序。结果HE、Masson染色显示,单个肉芽肿面积百分比,Sj组(58.6±4.9)%>IL-9阻断组(37.0±2.1)%,差异有统计学意义(F=678.4,P<0.001)。胶原沉积面积百分比,Sj组(35.5±2.0)%>IL-9阻断组(16.2±0.3)%>正常对照组(0.4±0.1)%,差异有统计学意义(F=1314.0,P<0.001)。免疫组化染色显示,IL-9阻断后小鼠肝组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、胶原Ⅰ和胶原Ⅲ蛋白的表达水平显著降低。α-SMA蛋白表达百分比,Sj组(29.9±4.0)%>IL-9阻断组(14.9±1.4)%>正常对照组(1.4±0.4)%,差异有统计学意义(F=267.9,P<0.001);胶原Ⅰ蛋白表达百分比,Sj组(33.9±1.2)%>IL-9阻断组(16.2±0.7)%>正常对照组(1.3±0.2)%,差异有统计学意义(F=3112.0,P<0.001);胶原Ⅲ蛋白表达百分比,Sj组(14.5±3.0)%>IL-9阻断组(5.3±0.6)%>正常对照组(1.4±0.2)%,差异有统计学意义(F=131.1,P<0.001)。小鼠肠道微生物宏基因组测序显示,与正常对照组比较,Sj组和IL-9阻断组小鼠肠道菌群的多样性和物种丰富度均降低,其中IL-9阻断组与正常对照组差异有统计学意义(P=0.002),温生菌、巴恩斯氏菌、未分类肠杆菌、埃希氏菌属等的丰度发生显著变化。结论体内阻断IL-9可改变日本血吸虫感染小鼠肠道菌群的物种结构、多样性,并且这种改变可能与日本血吸虫病免疫病理的发生发展密切相关。
- 吕嘉慧王纪龙肖苏羽卢作超莫景筌李彩淇邱然唐泽丽李青战廷正
- 关键词:日本血吸虫虫卵肉芽肿白细胞介素9肠道菌群
- AdV5--SjCB1与rSjCB1联合免疫预防日本血吸虫感染的研究
- 许孟格
- 日本血吸虫感染调控肝脏肿瘤微环境及免疫效应机制研究
- 叶升玉
- 不同病原学方法检测野鼠日本血吸虫感染效果比较被引量:6
- 2023年
- 目的比较不同病原学方法在野鼠日本血吸虫感染检测中的应用价值,为血吸虫病传播风险评估提供技术支持。方法2022年10—11月,于安徽省血吸虫病流行区选取有钉螺分布的环境采用夹夜法捕捉野鼠。采用肝脏组织压片镜检法、肠系膜组织镜检法、肝脏组织匀浆镜检法、肝脏组织匀浆孵化法、改良加藤厚涂片法(Kato⁃Katz法)和粪便毛蚴孵化法等6种方法单独或联合应用检测野鼠日本血吸虫感染,任一种方法检出日本血吸虫虫卵或毛蚴即判为血吸虫感染阳性,比较不同方法检测野鼠日本血吸虫感染敏感度。结果共捕获野鼠1703只,其中366只(21.49%)野鼠日本血吸虫感染阳性。6种方法检测野鼠日本血吸虫感染率(Q=529.33,P<0.001)及敏感度(χ^(2)=527.78,P<0.001)差异均具有统计学意义。肝脏组织压片镜检法联合肠系膜组织镜检法、肝脏组织压片镜检法联合肝脏组织匀浆镜检法及联合应用肝脏组织压片镜检法、肠系膜组织镜检法、肝脏组织匀浆镜检法及Kato⁃Katz法等4种方法检测野鼠日本血吸虫感染敏感度较高,分别为86.61%、87.16%和97.27%。结论不同病原学方法检测野鼠日本血吸虫感染敏感度存在差异,肝脏组织压片镜检法联合肠系膜组织镜检法、肝脏组织压片镜检法联合肝脏组织匀浆镜检法具有潜在现场应用价值。
- 许晓娟陈雪峰吴凡吴晨阳刘婷代波汪天平张世清
- 关键词:日本血吸虫野鼠
- PD-1缺陷在日本血吸虫感染中的作用及机制
- 背景日本血吸虫病是一种人畜共患性寄生虫疾病,在全球范围内有78个国家面临感染风险,感染人数超2亿。日本血吸虫病严重妨碍人类卫生健康事业和经济的发展,每年有超过20万人因其死亡。日本血吸虫病本质上是一种慢性感染并伴有肝实质...
- 刘志龙
- 关键词:T细胞PD-1日本血吸虫调节性T细胞
相关作者
- 夏超明

- 作品数:121被引量:366H指数:10
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- 研究主题:日本血吸虫 日本血吸虫感染 虫卵肉芽肿 血吸虫病 肉芽肿病变
- 李允鹤

- 作品数:79被引量:256H指数:9
- 供职机构:苏州大学医学部
- 研究主题:日本血吸虫 日本血吸虫感染 虫卵肉芽肿 肉芽肿病变 日本血吸虫病
- 龚唯

- 作品数:49被引量:171H指数:8
- 供职机构:苏州大学
- 研究主题:日本血吸虫 日本血吸虫感染 TH1/TH2细胞因子 TH1/TH2 虫卵肉芽肿
- 骆伟

- 作品数:39被引量:154H指数:7
- 供职机构:苏州大学
- 研究主题:日本血吸虫 日本血吸虫感染 TH1/TH2细胞因子 虫卵肉芽肿 TH1/TH2
- 许永良

- 作品数:158被引量:676H指数:17
- 供职机构:江苏省血吸虫病防治研究所
- 研究主题:日本血吸虫 弓形虫感染 血吸虫病 吡喹酮 血吸虫