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BoHV-1感染新西兰白兔引起脑干损伤的初步研究
牛疱疹病毒1型(Bovine hepervirus 1,BoHV-1)是一种常见的牛传染病病原体,其感染引起呼吸系统和生殖系统等多系统炎性疾病,病毒能够形成潜伏感染,可以被反复激活而导致感染症状反复出现,对养牛业造成巨大...
李宁晰
关键词:脑干新西兰白兔巢式PCRHMGB1
新西兰白兔BMP 15基因的真核表达载体构建、表达模式及其在卵巢组织的表达
2024年
旨在获得新西兰白兔BMP 15基因序列及其组织表达规律,构建其真核表达载体,预测BMP15的生物学功能。本研究选择180日龄性成熟的健康新西兰白兔作为研究对象,采用RT-PCR技术扩增BMP 15基因CDS区序列,利用T4连接方法将目的片段连接至线性化的Pmcherry-N1和pCMV-Myc空载体,构建真核表达载体,利用生物信息学分析其编码蛋白的性质及结构。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术与Western blotting技术检测pCMV-Myc-BMP 15过表达情况。接下来,使用qRT-PCR检测BMP 15基因在不同组织中的表达水平。激光共聚焦方法检测BMP 15基因的亚细胞定位。利用免疫荧光技术检测内源BMP15在新西兰白兔卵巢组织定位情况。结果表明:克隆得到新西兰白兔BMP 15基因CDS区序列长1182 bp,PCR及测序结果表明pCMV-Myc-BMP 15和Pmcherry-N1-BMP 15真核表达载体构建成功。生物信息学分析显示,BMP 15基因编码393个氨基酸;BMP15蛋白不稳定系数为55.32,等电点大小为9.69,是一种稳定的碱性蛋白质。BMP15蛋白共有26个磷酸化位点,15个糖基化位点,存在信号肽,不存在跨膜结构域。系统进化树表明,新西兰白兔与猪亲缘关系最近,与鸡的亲缘关系最远。二级结构和三级结构分析结果表明,BMP15蛋白主要由α-螺旋(38.68%)、无规则卷曲(37.4%)、延伸链(15.52%)、β-转角(8.40%)组成,为混合型蛋白。蛋白互作关系预测发现,BMP15蛋白与FSHR、FIGLA、BMPR1B、AMHR2、NOBOX等卵巢生长发育的相关蛋白之间存在相互作用。不同组织表达分析显示,BMP 15基因在卵巢组织中特异性表达;激光共聚焦结果显示,BMP15主要存在于在细胞质中。将pCMV-Myc-BMP 15转染至HEK293T细胞内,BMP15的mRNA水平和蛋白水平均显著上调。卵巢组织免疫荧光检测结果显示,BMP15主要定位在卵巢颗粒细胞的细胞质中。本研究成功构建了BMP15的真核表达载体,对BMP 15基因及其编码的蛋白的理化性质和生物�
陈孟娟刘雨晴王智通温佳乐许会芬于光晴李明
关键词:新西兰白兔细胞定位
新西兰白兔CTSB、CTSS基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究
2023年
【目的】克隆新西兰白兔组织蛋白酶B(cathepsin B,CTSB)与CTSS基因CDS区序列并进行生物信息学分析,探究其在新西兰白兔不同组织中的表达规律。【方法】采用PCR法扩增并克隆CTSB、CTSS基因CDS区序列,使用Mega 7.0软件构建系统进化树并分析氨基酸序列相似性;利用生物信息学软件分析CTSB、CTSS蛋白理化性质、跨膜结构、信号肽位点及亚细胞定位情况;用实时荧光定量PCR检测CTSB、CTSS基因在新西兰白兔不同组织中的表达量。【结果】新西兰白兔CTSB、CTSS基因CDS区序列长分别为1020、1023 bp,共编码339、340个氨基酸,蛋白分子质量分别为37.627、38.253 ku,理论等电点为5.53、8.40,不稳定系数为30.76、32.38,分别为酸性及碱性蛋白。新西兰白兔CTSB、CTSS基因氨基酸序列分别与猪、马的亲缘关系最近,与鸡亲缘关系较远。CTSB、CTSS蛋白二级结构均主要由α-螺旋和无规则卷曲构成,二者三级结构预测结果与二级结构一致,均为亲水性蛋白;CTSB蛋白信号肽剪切位点位于第17—18位氨基酸处,含有1个N-端Propeptide-C1结构域与1个Peptidase-C1A-C结构域;CTSS蛋白信号肽剪切位点位于第25—26位氨基酸处,含有1个Inhibitor-129结构域与1个Peptidase-C1结构域。亚细胞定位结果表明,CTSB、CTSS蛋白均主要分布于细胞质(包括细胞壁)内。实时荧光定量PCR结果显示,CTSB基因在腹脂和肝脏组织中表达量较高,CTSS基因在脾脏组织中表达量最高,均显著高于其他组织(P<0.05)。【结论】成功克隆新西兰白兔CTSB、CTSS基因CDS全长序列,揭示了CTSB、CTSS基因在新西兰白兔不同组织中的表达水平并初步分析了其生物学功能,为进一步研究家兔CTSB、CTSS基因功能及调控机制提供了基础和参考。
袁冬冬宋国华陈孟娟王智通柏中峰蔡含芳李明许会芬
关键词:新西兰白兔克隆生物信息学分析
中药降脂复方对新西兰白兔胆固醇-胆汁酸代谢的调节
2023年
目的:探讨中药降脂复方对新西兰白兔胆固醇-胆汁酸代谢的调节机制。方法:采用随机数字表法将60只新西兰白兔分为对照组、模型组、中药降脂复方低剂量组和中药降脂复方高剂量组,每组15只。除对照组外,其余组新西兰白兔给予高胆固醇饮食,同时给予相应药物进行灌胃,每天1次,连续4周。ELISA法检测肝脏胆固醇7α羟化酶(cholesterol 7α hydroxylase, CYP7A1)的水平;酶水解法测定血清总胆固醇(total cholesterol, TC)、总胆红素(total bilirubin, TBIL)的水平;酶循环法测定血清总胆汁酸(total bile acid, TBA)水平;HE染色检测肝脏病理变化;RT-PCR检测小异源二聚体伴侣(small heterodimer partner, SHP)、胆盐输出泵(bile salt export pump, BSEP)和三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1) mRNA相对表达量。结果:与对照组相比,模型组TC、TBIL水平及SHP mRNA、BSEP mRNA、ABCA1 mRNA相对表达量升高,TBA水平及CYP7A1活性降低;与模型组相比,中药降脂复方组TBA水平及CYP7A1活性升高,TC、TBIL水平及SHP mRNA、BSEP mRNA、ABCA1 mRNA相对表达量降低,且呈剂量依赖性,差异均具有统计学意义(P<0.05)。HE染色显示,模型组新西兰白兔肝细胞肿大,有炎性细胞浸润;给予中药降脂复方后,各组新西兰白兔肝脏病理改变有所改善。结论:中药降脂复方能有效调节新西兰白兔胆固醇-胆汁酸代谢,其作用机制可能与调控SHP、BSEP及ABCA1表达有关。
陈瑜邱冬妮孙思佳卓家隆廖阳勃孙旭毛奇琦丁伟群邱志兵邵雷
关键词:胆固醇代谢胆汁酸代谢新西兰白兔
食粪行为对新西兰白兔生长性能、肠道微生态和肉品质的影响
食粪是兔的一种本能行为。在长期的自然选择和进化过程中,为适应恶劣的生存环境,兔养成并保持了进食软粪的行为和习惯。由于特殊的消化特性和有限的食物供应,包括兔在内的许多小型食草动物,扩大了它们的前肠或后肠区域的大小,以促进不...
何辉
关键词:新西兰白兔肠道微生态肉品质
饲养密度对新西兰白兔生长性能、行为、免疫器官指数和血清抗氧化指标的影响
2023年
试验旨在探讨饲养密度对家兔生长性能、行为方式、免疫器官指数和血清抗氧化指标的影响。试验选取35日龄体重相近(943.86±51.13)g,健康的雄性新西兰白兔120只,随机分为4组,每组6个重复(笼),即Ⅰ组每个重复(笼)2只(5只/m^(2))、Ⅱ组每个重复(笼)4只(10只/m^(2))、Ⅲ组每个重复(笼)6只(15只/m^(2))、Ⅳ组每个重复(笼)8只(20只/m^(2))。预饲期5 d,试验期35 d。结果显示:在生长性能方面,Ⅰ组和Ⅱ组家兔的末重和平均日增重显著高于Ⅲ组(P<0.05),且极显著高于Ⅳ组(P<0.01),Ⅲ组的末重和平均日增重显著高于Ⅳ组(P<0.05);平均日采食量Ⅰ组和Ⅱ组极显著高于Ⅲ组(P<0.01),Ⅲ组高于Ⅳ组(P<0.01)。在趴卧行为发生率方面,家兔的趴卧行为Ⅰ组和Ⅱ组极显著低于Ⅲ组(P<0.01),Ⅲ组极显著低于Ⅳ组(P<0.01);Ⅰ组和Ⅱ组的运动和站立行为发生率差异均不显著(P>0.05),其余各组之间差异均极显著(P<0.01);Ⅰ组和Ⅱ组的采食行为发生率均极显著高于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.01);Ⅰ组和Ⅱ组的修饰行为发生率极显著高于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.01),而啃咬行为发生率则显著低于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.05)。在免疫器官指数方面,Ⅰ组和Ⅱ组家兔的脾脏指数显著高于Ⅳ组(P<0.05),胸腺指数均显著高于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.05)。在血清抗氧化能力方面,Ⅱ组和Ⅲ组家兔的血清T-AOC浓度和SOD活性均显著高于Ⅳ组(P<0.05);Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组血清中MDA含量均显著低于Ⅳ组(P<0.05)。以上结果表明,适当降低饲养密度能够改善家兔的生长性能和行为状态,提高其免疫和抗氧化能力,在考虑饲养笼具利用率的基础上,以Ⅱ组4只/笼(10只/m^(2))的饲养密度效果最佳。
李彦杰祁海艳宋文超周清波王长平张向宇肖子淳
关键词:新西兰白兔饲养密度免疫器官指数抗氧化
日粮中添加乙酸钠和丁酸钠对新西兰白兔生长性能、肉品质和肠道健康的影响
新西兰白兔生长发育快,肉质细嫩,已成为我国主要养殖肉兔品种之一。养兔业逐步走向集约化养殖,大量使用抗生素会在畜产品和环境中造成药物残留,许多国家都提出了禁止使用抗生素的要求,寻找抗生素替代已成为主要问题。肠道健康是决定...
倪萌柯
关键词:乙酸钠丁酸钠新西兰白兔肠道健康
YAP 1基因调控新西兰白兔肌肉生长发育
2023年
Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)在哺乳动物组织中对于调节器官大小、肿瘤发生和细胞的增殖、分化、凋亡等具有重要作用。为探究YAP 1基因在新西兰白兔肌肉组织生长发育中的生物学功能,本研究通过RT-PCR从新西兰白兔腿肌中克隆到YAP 1基因,并对其生物信息学功能、表达模式及亚细胞定位、启动下游基因表达的转录活性,以及参与调控肌肉组织生长发育的功能进行分析。结果表明,YAP1的CDS区序列长度为1302 bp,编码433个氨基酸,等电点为5.10的亲水性蛋白质,YAP1蛋白不存在信号肽和跨膜区域,其结构主要由无规则卷曲构成。系统进化树分析表明,与绵羊的亲缘关系较近,与小鼠的亲缘关系较远。亚细胞定位显示,该蛋白质在细胞核和细胞质中均有表达。RT-qPCR结果显示,YAP 1基因在新西兰白兔的心、肝、脾、肺、肾、卵巢、子宫和肌肉中均有表达,但在肌肉中的表达量最高,且在腿肌组织中表达水平较高。双荧光素酶报告基因检测结果表明,YAP 1基因第127位的丝氨酸突变为丙氨酸(YAP1-S127A),8xGTIIC的启动子活性明显增强。在肌肉细胞中过表达YAP 1基因可以加快肌肉细胞的增殖,同时上调肌球蛋白重链6(myosin heavy chain 6,MYH6)和肌细胞生成素(myogenin,MYOG)基因的mRNA表达水平,以及MYH6和肌分化因子(myogenic differentiation,MYOD)蛋白质水平,抑制肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因mRNA的表达水平。综上结果提示,YAP 1基因在新西兰白兔肌肉生长发育中发挥重要作用。本研究为后续进一步阐明YAP 1基因精准调控肌肉生长发育的分子机制奠定基础,同时为改良家兔品种提供理论依据和基因资源。
刘雨晴陈孟娟王亿杰许会芬李明于光晴
关键词:肌肉家兔亚细胞定位转录活性
BVDV对新西兰白兔致病性分析及E2蛋白免疫效果的评价
牛病毒性腹泻是由牛病毒性腹泻病毒引起的疾病,一种或多种病原体混合感染均会引起牛呼吸道疫病综合征(BRDC),牛传染性鼻气管病毒(IBRV)、牛副流感三型病毒(BPIV-3)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)等是引起牛呼吸道疾...
赵逢淼
关键词:牛病毒性腹泻病毒E2蛋白
桑叶DNJ对新西兰白兔生产性能和肠道消化功能的影响机制研究
桑树(Morus alba L.)具有较高的营养价值,可作为一种的饲料资源。1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)是桑叶中高度富集的植物次生代谢物,对动物机体糖脂代谢有较强的调控作用,然而其对...
李少璁
关键词:桑叶肠道功能

相关作者

吴信生
作品数:207被引量:1,343H指数:20
供职机构:扬州大学动物科学与技术学院
研究主题:家兔 微卫星 新西兰白兔 体重 獭兔
恽时锋
作品数:182被引量:681H指数:13
供职机构:南京军区南京总医院
研究主题:实验动物 小鼠 大肠埃希氏菌 屏障环境 福利
李明
作品数:316被引量:1,047H指数:16
供职机构:河南农业大学
研究主题:固始鸡 硒 家兔 钴 克隆
刘继红
作品数:790被引量:3,256H指数:26
供职机构:华中科技大学同济医学院
研究主题:勃起功能障碍 精子运动 草酸钙 体外 阴茎海绵体
王涛
作品数:522被引量:1,111H指数:16
供职机构:华中科技大学同济医学院
研究主题:勃起功能障碍 帕金森病 阴茎海绵体 大鼠阴茎海绵体 阴茎海绵体平滑肌细胞